Ras homolog enriched in brain (Rheb) and FK506 binding protein 38 (FKBP38) are two important regulatory proteins in the mammalian target of rapamycin (mTOR) pathway. There are contradictory data on the interaction between Rheb and FKBP38 in human cells, but this association has not been examined in cashmere goat cells. To investigate the interaction between Rheb and FKBP38, we overexpressed goat Rheb and FKBP38 in goat fetal fibroblasts, extracted whole proteins, and performed coimmunoprecipitation to detect them by western blot. We found Rheb binds directly to FKBP38. Then, we constructed bait vectors (pGBKT7-Rheb/FKBP38) and prey vectors (pGADT7-Rheb/FKBP38), and examined their interaction by yeast two-hybrid assay. Their direct interaction was observed, regardless of which plasmid served as the prey or bait vector. These results indicate that the 2 proteins interact directly in vivo. Novel evidence is presented on the mTOR signal pathway in Cashmere goat cells.
Insulin-like growth factor binding protein-3 (IGFBP-3) gene is important for regulation of growth and development in mammals. The present investigation was carried out to study DNA polymorphism by PCR-RFLP of IGFBP-3 gene and its effect on fibre traits of Chinese Inner Mongolian cashmere goats. The fibre traits data investigated were cashmere fibre diameter, combed cashmere weight, cashmere fibre length and guard hair length. Four hundred and forty-four animals were used to detect polymorphisms in the hircine IGFBP-3 gene. A 316-bp fragment of the IGFBP-3 gene in exon 2 was amplified and digested with HaeIII restriction enzyme. Three patterns of restriction fragments were observed in the populations. The frequency of AA, AB and BB genotypes was 0.58, 0.33 and 0.09 respectively. The allelic frequency of the A and B allele was 0.75 and 0.25 respectively. Nucleotide sequencing revealed a C>G transition in the exon 2 region of the IGFBP-3 gene resulting in R158G change which caused the polymorphism. Least squares analysis revealed a significant effect of genotypes on cashmere weight (p<0.0001), cashmere fibre length (p<0.001) and hair length (p<0.05) of the animals. The effect of genotypes on cashmere fibre diameter was not statistically significant (p>0.05). The animals of AB and BB genotypes showed higher cashmere weight, cashmere fibre length and hair length than the animals possessing AA genotype. These results suggested that polymorphisms in the hircine IGFBP-3 gene might be a potential molecular marker for cashmere weight in cashmere goats.
Insulin-like growth factor-binding protein-5 (IGFBP-5) is one of the six members of IGFBP family, important for cell growth, apoptosis and other IGF-stimulated signaling pathways. In order to explore the significance of IGFBP-5 in cells of the Inner Mongolian Cashmere goat (Capra hircus), IGFBP-5 gene complementary DNA (cDNA) was amplified by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) from the animal's fetal fibroblasts and tissue-specific expression analysis was performed by semi-quantitative RT-PCR. The gene is 816 base pairs (bp) in length and includes the complete open reading frame, encoding 271 amino acids (GenBank accession number JF720883). The full cDNA nucleotide sequence has a 99% identity with sheep, 98% with cattle and 95% with human. The amino acids sequence shares identity with 99%, 99% and 99%, respectively. The bioinformatics analysis showed that IGFBP-5 has an insulin growth factor-binding protein homologues (IB) domain and a thyroglobulin type-1 (TY) domain, four protein kinase C phosphorylation sites, five casein kinase II phosphorylation sites, three prenyl group binding sites (CaaX box). The IGFBP-5 gene was expressed in all the tested tissues including testis, brain, liver, lung, mammary gland, spleen, and kidney, suggesting that IGFBP-5 plays an important role in goat cells.
As a member of a subclass of immunophilins, it is controversial that FKBP38 acts an upstream regulator of mTOR signaling pathway, which control the process of cell-growth, proliferation and differentiation. In order to explore the relationship between FKBP38 and mTOR in the Cashmere goat (Capra hircus) cells, a full-length cDNA was cloned (GenBank accession number JF714970) and expression pattern was analyzed. The cloned FKBP38 gene is 1,248 bp in length, containing an open reading frame (ORF) from nucleotide 13 to 1,248 which encodes 411 amino acids, and 12 nucleotides in front of the initiation codon. The full cDNA sequence shares 98% identity with cattle, 94% with horse and 90% with human. The putative amino acid sequence shows the higher homology which is 98%, 97% and 94%, correspondingly. The bioinformatics analysis showed that FKBP38 contained a FKBP_C domain, two TPR domains and a TM domain. Psite analysis suggested that the ORF encoding protein contained a leucine-zipper pattern and a Prenyl group binding site (CAAX box). Tissue-specific expression analysis was performed by semi-quantitative RT-PCR and showed that the FKBP38 expression was detected in all the tested tissues and the highest level of mRNA accumulation was detected in testis, suggesting that FKBP38 plays an important role in goat cells.
Background: The physiologic characteristics of the cashmere trait and many of the differentially expressed genes relevant to hair cycling have been extensively studied, whereas genes involved in the prenatal development of hair follicles have been poorly investigated in cashmere goats. The aim of this study, therefore, was to quantify the time-course changes in the expressions of $TR{\alpha}$ and CRABPII genes in the fetal skin of Chinese cashmere goats at the multiple embryonic days (E70, E75, E80, E90, E100, E120 and E130) using real-time quantitative PCR (RT-qPCR). Results: RT-qPCR showed that $TR{\alpha}$ was expressed at E70 with relatively high level and then slightly decreased (E75, E80, and E90). The highest expression of $TR{\alpha}$ mRNA was revealed at E130 (P > 0.05). The expression pattern of CRABPII mRNA showed an 'up-down-up' trend, which revealed a significantly highest expression at E75 (P < 0.05) and was down-regulated during E80 to E120 (P < 0.05) and mildly increased at E130, subsequently. Conclusion: This study demonstrated that $TR{\alpha}$ and CRABPII genes expressed in different levels during prenatal development of cashmere. The present study will be helpful to provide the comprehensive understanding of $TR{\alpha}$ and CRABPII genes expressions during cashmere formation and lay the ground for further studies on their roles in regulation of cashmere growth in goats.
Zhang, Chong Zhi;Sun, Hai Zhou;Li, Sheng Li;Sang, Dan;Zhang, Chun Hua;Jin, Lu;Antonini, Marco;Zhao, Cun Fa
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.32
no.4
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pp.541-547
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2019
Objective: This study investigated the effects of photoperiod on nutrient digestibility, hair follicle (HF) activity and cashmere quality in Inner Mongolia white cashmere goats. Methods: Twenty-four female (non-pregnant) Inner Mongolia white cashmere goats aged 1 to 1.5 years old with similar live weights (mean, $20.36{\pm}2.63kg$) were randomly allocated into two groups: a natural daily photoperiod group (NDPP group:10 to 16 h light, n = 12) and a short daily photoperiod group (SDPP group: 7 h light:17 h dark, n = 12). All the goats were housed in individual pens and fed the same diets from May 15 to October 15, 2015. The digestibility of crude protein (CP), dry matter (DM), and neutral detergent fiber (NDF) were measured in different months, along with secondary hair follicle (SHF) activity, concentration of melatonin (MEL), and cashmere quality. Results: Although there was no significant difference in the live weights of goats between the SDPP and NDPP groups (p>0.05), the CP digestibility of goats in the SDPP group was significantly increased compared to the NDPP group in July, September, and October (p<0.05). For the DM and NDF digestibility of goats, a significant increase (p<0.05) was found during in September in the SDPP group. Furthermore, compared to the NDPP group, the SHF activity in July, the MEL concentration in July, and the cashmere fiber length and fiber weight in October were significantly increased in the SDPP group (p<0.05). Conclusion: The cashmere production of Inner Mongolia white cashmere goats was increased without obvious deleterious effects on the cashmere fibers in the SDPP group (metabolizable energy, 8.34 MJ/kg; CP, 11.16%; short daily photoperiod, 7 h light:17 h dark).
Nowadays natural textile materials should cope with the global warming. Soft, thin and light angora fibers which have two components. One is spiky hair and the other is soft hair. The spiky hairs have a disadvantage of pilling out. The soft hairs have promising properties comparable to cashmere goat hairs, which is cheap compared to very expensive cashmere goat hairs. In this study, we investigated the dyeing properties of angora/PET, Nylon blend fabrics to acid dyes and reactive dyes including various series of acid dyes and reactive dyes for the dyeing of the blended super soft angora fabrics and their potential for deep shade dyeing effects. Our focus is to get a relation between various kind of blend and their dyeability.
The roles of melatonin in the control of deiodinase (MD) activity in cashmere goat skin and associated cashmere fibre growth were investigated. Eighteen half-sib Chinese Inner Mongolia cashmere wethers were allocated randomly to two groups (n = 9/group). One group was implanted subcutaneously with melatonin (2 mg/kg BW) at three 2-monthly intervals while the other group served as a control. All goats were maintained under natural photoperiodic conditions and were grazed on natural pasture. The plasma melatonin concentration showed a significant difference (p<0.01) between the implant group (M) and the control group (C) but plasma $T_4$ (or $T_3$) showed no significant difference (p>0.05). The monodeiodinase type II (MDII) activity in skin tended to increase gradually from the summer solstice to November. During July and August, the activity of MDII for the M group was higher (p<0.05) than that of the C group; also during this period, there was a significant positive correlation between MDII activity of skin and cashmere fibre growth rate. The monodeiodinase type III (MDIII) activity and the ratio of MDIII and MDII tended to decrease from the summer solstice to November. The ratio of MDIII and MDII for the M group was lower (p<0.05) than that of the C group in July and August. The cashmere fibre growth rate of the M group was significantly greater than that of the C group in July (p<0.01), August (p<0.001) and September (p<0.05). The cashmere fibre diameter and guard hair and body weight were not influenced (p>0.05) by melatonin implantation. The results demonstrate that melatonin plays an important role in the regulation of skin MD activity. Simultaneously, the cashmere fibre elongation stimulated by melatonin may result from enhanced MDII activity during a period of two months after melatonin treatment.
To detect goat vascular endothelial growth factor (VEGF)-mediated regrowth of hair, full-length VEGF164 cDNA was cloned from Inner Mongolia cashmere goat (Capra hircus) into the pET-his prokaryotic expression vector, and the recombinant plasmid was transferred into E. coli BL21 cells. The expression of recombinant $6{\times}his-gVEGF164$ protein was induced by 0.5 mM isopropyl thio-${\beta}$-D-galactoside at $32^{\circ}C$. Recombinant goat VEGF164 (rgVEGF164) was purified and identified by western blot using monoclonal anti-his and anti-VEGF antibodies. The rgVEGF164 was smeared onto the dorsal area of a shaved mouse, and we noted that hair regrowth in this area was faster than in the control group. Thus, rgVEGF164 increases hair growth in mice.
This experiment was designed to evaluate the effects of source of supplemental zinc (Zn) on performance, nutrient digestibility and plasma mineral profile in Cashmere goats during the cashmere fiber growing period. Twenty-seven Liao Ning Cashmere wether goats (9-10 month of age; initial BW = 19.31${\pm}$0.32 kg) were fed a basal diet (containing 22.3 mg Zn/kg DM) with no supplemental Zn (control) or 20 mg of supplemental Zn/kg of DM from Zn sulfate ($ZnSO_{4}$) or Zn methionine (ZnMet) for 60 days including a 10-day metabolism trial. Average daily gain (ADG) (p<0.05) and gain:feed (G/F) (p<0.05) were increased by Zn supplementation, but no differences were noted between Zn sources (p>0.05). The length and diameter of cashmere fiber did not differ among treatments (p>0.05). Zn supplementation had no influence on digestibility of DM, CP, EE and NDF (p>0.05). However, ADF digestibility in the group supplemented with ZnMet was significantly higher than in other treatments (p<0.05). Plasma Zn was increased (p<0.05) and Cu tended to be decreased (p = 0.057) by Zn supplementation, but no differences were found between Zn sources (p>0.05). Plasma alkaline phosphatase activity (AKP) was improved by Zn supplementation (p<0.05) and was higher in the $ZnSO_{4}$ than the ZnMet group (p<0.05). Zn retention was increased (p<0.05) and apparent absorption rate was decreased (p<0.05) by Zn supplementation. The results indicate that supplementation of 20 mg Zn/kg DM either as $ZnSO_{4}$ or ZnMet in the basal diet containing 22.3 mg Zn/kg DM can improve growth performance in Cashmere goats, and effectiveness of the two sources is similar on performance measurements.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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