To protect the watermelon against soil-borne pathogens, we are currently producing disease-resistant transgenic root stock for the growth of watermelon, A defensin gene (J1-1) from Capsicum annum, a ACC deaminase gene from Pseudomonas syringae, a galactinol synthase (CsGolS) gene from Cucumis sativus, and a WRKY (CvWRKY2) gene from Citullus vulgaris were used as transgenes for disease resistance. The gene were transformed into a inbred line (6-2-2) of watermelon, Kong-dae watermelon and a inbred line (GO702S) of gourd, respectively, by Agrobacterium-mediated transformation. Putative transgenic plants were selected in medium containing 100mg/L kanamycin, and then integration of the genes into the genomic DNA were demonstrated by PCR analysis. Successful integration of the gene in regenerated plants was also confirmed by PCR (Figf 1), genomic Southern blot (Fig 2), RT-PCR (Fig 3), and Northern blot analysis(Fig 4). Several T1 lines having different transgene were produced, and disease resistance of the T1 lines are under estimation.
농업유전자원센터에 보존하고 있는 고추 유전자원 1,941점을 240H02sp6 SNP 마커를 이용하여 Cucumber mosaic virus 저항성 정도를 평가하였다. 1941점의 고추 유전자원에서 89점이 저항성, 162점이 이형접합성, 1270점이 이병성으로 분석되었다. 고추 종별로는 C. annuum은 총 839자원 중 38점이 저항성으로 나타났으며, C. baccatum은 277점 중 23%에 해당하는 자원만 분석이 되었고 분석된 자원 중 20점이 저항성을 나타났다. C. chinense는 21점이 저항성, C. frutescens는 8점이 저항성을 보였다. C. pubescens는 K157779 자원만 이병성을 나타내었으며, Capsicum sp. 자원들 중에는 저항성 자원이 없었다. 야생근연종인 C. chacoense는 15점이 분석되어 1점이 저항성, 4점이 이형접합성, 6점이 이병성을 보였고, C. galapagoense, C. tovarii는 각 한 점씩 분석되었고 모두 이병성으로 나타났다.
Obesity, an intractable metabolic disease, currently has no medical treatment without side effects, so studies have been actively carried out to find natural compounds that have anti-obesity activity with minimum side effects. In this study, the anti-obesity effects of water extracts of seven Capsicum annuum L. varieties being Putgochu (Pca), Oyee gochu (Oca), Kwari putgochu (Kca), Green pepper (Gca), Yellow paprika (Yca), Red paprika (Rca) and Cheongyang gochu (Cca), were examined through the evaluation of lipoprotein lipase (LPL) mRNA expression level in 3T3-L1 cells (mouse pre-adipocytes). After capsaicin elimination by chloroform defatting, freeze-dried powder of Cca was treated to 3T3-L1 cells and anti-obesity effects were examined by determining the LPL mRNA level using the RT-PCR method. Of the primary fractions, only proven fractions underwent secondary and tertiary refractionating to determine anti-obesity effects. From seven different Capsicum annuum L., there was a significant decrease of the LPL mRNA expression level of 50.9% in Cca treatment compared to the control group. A significant decrease of the LPL mRNA expression level was shown in primary fractions (Fr) 5 (36.2% decrease) and 6 (30.5% decrease) of the Cca water extracts. Due to the impurities checked by UPLC chromatography, Fr 5 and 6 were refractionated to determine the LPL mRNA expression level. Treatment of Fr 6-6 (35.8% decrease) and Fr 5-6 (35.3% decrease) showed a significant decrease in the LPL mRNA expression level. When analyzed using UPLC, major compounds of Fr 6-6 and Fr 5-6 were very similar. Subsequently, we refractionated Fr 6-6 and Fr 5-6 to isolate the major peak for structure elucidation. Treatment of Fr 5-6-1 (26.6% decrease) and Fr 6-6-1 (29.7% decrease) showed a significant decrease in the LPL mRNA expression level. Consequently, the fractions may have a possibility to ameliorate obesity through the decrease of the LPL mRNA expression level.
2000년도에 검정에서 역병에 살아남은 개체들로부터 채종하여 육성한 Capsicum chinense 31계통에 대하여 역병 저항성을 검정한 결과 고도의 저항성을 나타내는 것은 발견되지 않았다. 2001년도의 검정에서 역병에 살아남은 개체로부터 채종한 재래종 26계통에 대하여 다시 역병 저항성 검정을 실시한 결과 KC180, KC230, KC195, KC194에서 다수의 개체가 살아남아 저항성을 나타내었다 그러나 KC180과 KC230은 각각 AC2258과 CM334와 혼종된 것으로 관찰되었다. KC195와 KC194는 재래종의 형질을 유지하고 있는 것으로 관찰되었다. CM334의 보존 증식과정에 자연교잡이 일어난 것으로 보여 이의 순도향상을 위하여 채종년도별로 시료를 꺼내어 역병 저항성 검정을 실시한 결과 가장 오래된 1992년도 채종종자에서부터 약간의 이형주가 관찰되기 시작하여 1995년부터 2001년도까지 시간이 경과함에 따라 많이 변형되어 있는 것을 알 수 있었다. 1992년도 종자에서 이형주를 제거하고 원형의 개체로부터 자식종자를 대량 채종하였다. 함께 공시한 AC2258은 순수한 것으로 확인되었다. 1995년도 채종 CM334 종자에서는 비록 혼종은 되었으나 측지발생이 적은 개체들이 발견되어 이들을 개체 선발하여 역병에 저항성이며 측지발생이 적은 계통으로 육성하고 있다.
고추 탄저병은 국내외에서 고추 생산에 있어 많은 피해를 주는 병중의 하나로서, $Colletotrichum$ spp.에 의해 발생하며 현재 가장 많은 빈도를 나타내는 종은 $C.$$acutatum$으로 보고되고 있다. 살균제에 대한 내성이 있는 것으로 보고되어 저항성 품종의 육성이 요구되어지고 있다. 본 연구의 목적은 $Capsicum$$baccatum$ 종내 교잡을 통해 고추 탄저병 저항성 육종을 위한 MAS(marker assisted selection) 체계를 개발하는 기초연구로서 저항성과 관련한 QTL분석을 수행하였다. 저항성 검정결과 고추 탄저병저항성은 85%의 높은 광의의 유전력을 보였다. 양적형질 유전자좌 분석 결과 신뢰수준 이상의 LOD 수준을 보인 2개의 QTL($An8.1$, $An9.1$)이 탐색되었고, $R^2$가 2.04%와 14.36%이었다. 유전적인 효과는 $An8.1$은 상가적 효과가 0.46으로, $An9.1$은 상가적 효과가 -4.52로 나타났다. $An8.1$과 $An9.1$은 상처접종에 의해 나타나는 저항성 반응과 관련이 있는 것으로 생각되었다. 포장검정(08NR)과 관련한 QTL들은 신뢰수준이상의 LOD수준을 보이는 QTL은 탐색할 수 없었으나, $R^2$가 19.9%인 $An3.1$와 30.8%인 $An3.1$을 포함한 5개 QTL의 전체 $R^2$가 60.73%로 나타나 고추 탄저병저항성 유전과 관련한 인자가 다수 존재하는 것을 확인하였다. 따라서 이들 QTL은 더욱 정밀한 집단과 종간교잡 후대에서 적용성을 검정하여 고추 탄저병저항성 품종육성을 위한 MAS체계를 확립할 것이다.
$CO_2$의 상승은 식물 병원성 미생물의 발병력과 기주 식물의 저항성에 영향을 미칠 것이며, 기주와 병원체의 상호 작용에도 영향을 미칠 것으로 예상된다. 본 연구는 $CO_2$ 상승 환경에서 기주와 병원체간의 상호 작용을 연구하기 위하여 고추(Capsicum annuum)와 세균점무늬병을 유발하는 X. euvesicatoria를 이용하였다. 고추 식물체의 병저항성 관련 유전자인 CaLRR1, CaWRKY1, CaPIK1 그리고 CaPR10 유전자를 quantitative RT-PCR로 분석한 결과 800 ppm에서 CaLRR1, CaPIK1 그리고 PR10 유전자의 발현이 감소하였으며, negative regulator인 CaWRKY1 유전자는 발현이 증가하였다. 400 ppm과 800 ppm의 $CO_2$ 농도에서 이병엽률과 발병도를 확인 한 결과 800 ppm에서 발병도가 증가된 것을 확인하였다. 이들 결과는 미래의 $CO_2$ 농도가 증가 된 환경에서 고추와 고추의 주요 피해 병원균인 X. euvesicatoria에 의한 고추 세균점무늬병의 발병 양상을 이해하는 기초 자료로 활용할 수 있을 것이다.
Shin, Jong-Hwan;Park, Byung-Seoung;Kim, Hee-Yeong;Lee, Kwang-Ho;Kim, Kyoung Su
The Plant Pathology Journal
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제37권3호
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pp.307-314
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2021
Pepper (Capsicum annuum L.) is an important agricultural crop worldwide. Recently, Colletotrichum scovillei, a member of the C. acutatum species complex, was reported to be the dominant pathogen causing pepper anthracnose disease in South Korea. In the present study, we isolated bacterial strains from rhizosphere soil in a pepper field in Gangwon Province, Korea, and assessed their antifungal ability against C. scovillei strain KC05. Among these strains, a strain named BS1 significantly inhibited mycelial growth, appressorium formation, and disease development of C. scovillei. By combined sequence analysis using 16S rRNA and partial gyrA sequences, strain BS1 was identified as Bacillus velezensis, a member of the B. subtilis species complex. BS1 produced hydrolytic enzymes (cellulase and protease) and iron-chelating siderophores. It also promoted chili pepper (cv. Nockwang) seedling growth compared with untreated plants. The study concluded that B. velezensis BS1 has good potential as a biocontrol agent of anthracnose disease in chili pepper caused by C. scovillei.
Kim, Sang-Gyu;Kim, Yn-Hee;Kim, Heung-Tae;Kim, Young-Ho
The Plant Pathology Journal
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제24권4호
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pp.392-399
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2008
Detached chili pepper fruits were inoculated with the conidial suspension of Colletotrichum acutatum JC-24 simultaneously (simultaneous inoculation, SI) and at delayed time (delayed inoculation, DI) after wounding with (delayed wound inoculation, DWI) or without additional wounding (delayed non-wound inoculation, DNI) at the inoculation time. Disease severity was significantly lowered by DNI, compared to SI. By DNI, the disease reduction rates were proportional with the length of delayed time, and greater at the high temperature range (18, 23 and $28^{\circ}$) than at the low temperature ($13^{\circ}$) tested. DWI was also effective in reducing the disease severity especially at 18oC; however, its effectiveness was lower than for DNI. In light microscopy, parenchyma cells at the wounding sites were modified structurally, initially forming new cell walls crossing cytoplasm, enlarged with multiple periclinal cell divisions, and finally layered like wound periderms. In DWI, the above structural modifications occurred, showing the restriction of the fungal invasion by the cell walls in enlarged modified cells, while no definite cellular modifications were found with proliferation of fungal hyphae in SI. Sclerenchyma-like cells with thickened cell walls were proliferated around the wounding sites, which were partially dissolved by DWI, probably leading to some disease development. All of these results suggest that the decline of the anthracnose disease in pepper fruit by the delayed inoculations may be derived from the structural modifications related to the healing processes of the previous wound inflicted on the tissues.
Pyraclostrobin은 광범위한 스펙트럼의 항진균 활성이 있는 퀴논외부저해제(Quinone outside inhibitor, QoI)로 작용하는 살균제이다. 기존 보고에 의하면 pyraclostrobin이 일부 세균병과 바이러스병에 대해 병 저항성을 유도한다고 알려져 있다. 본 연구는 pyraclostrobin 항진균제를 활용하여 고추 세균점무늬병(Xanthomonas euvesicatoria)의 예방 가능성을 검토하였다. Pyraclostrobin은 in vitro 상에서 X. euvesicatoria에 대해 항균활성이 없었지만, 고추에 pyraclostrobin 단독(방제가 69%) 또는 streptomycin과 혼합 살포(방제가 90%) 하였을 때, 고추 세균점무늬병 예방 효과를 나타냈다. Pyraclostrobin의 고추 세균점무늬병 예방 효과는 병원균 접종 1-3일전이 효과적이었다. 이상의 결과로 pyraclostrobin 살진균제를 활용하여 고추 세균점무늬병을 효과적으로 예방할 수 있을 것을 사료된다.
Colletotrichum gloeosporioides forms an appressorium, a specialized infection structure, to infect its hosts. Among 400 and 600 culture filtrates from fungi and class Actinomycetes, six methanol extracts (A5005, A5314, A5387, A5560, A5597, and A5598) from the class Actinomycetes significantly inhibited appressorium formation in C. gloeosporioides infecting pepper fruits in a dose-dependent manner, while conidial germination was slightly enhanced. Two (A5005 and A5560) of them also exhibited distinctive inhibitory effect on the disease progress of pepper anthracnose. Water fractions of both culture filtrates also specifically inhibited appressorium formation in C. gloeosporioides and pepper anthracnose disease. Inhibition of appressorium formation by culture filtrate of A5005 was partially restored by the exogenous calcium. This results suggests that chemicals within A5005 extents its biological activity through disturbance of intracellular $Ca^{2+}$ regulation during prepenetration morphogenesis by C. gloeosporioides. Together, cell-based and target-oriented screening system used in this study should be applicable for other plant pathogenic fungi prerequisite appressorium formation to infect their hosts.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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