본 연구는 돼지 4번 염색체에서 FAT1 좌위의 후보유전자인 Adipocyte Fatty-Acid 결합단백질 (FABP4) 유전자에서 8개의 Single Nucleotide Polymorphisms (SNPs)를 발견하였다. Duroc, Landrace, Berkshire, Yorkshire를 기초 축으로 이용한 800두에 대해 FABP4 유전자의 단일염기 분석과 PCR-RFLP를 이용하여 그 다형성을 조사하고 돼지의 일당증체량, 등지방두께, 사료요구율, 정육율과 그 유전자형간의 연관성을 규명하고자 실시하였다. FABP4 유전자에 대해 각 단일염기에 관한 PCR-RFLP를 이용하여 $400{\sim}800\;bp$ 산물을 증폭한 후 각각의 제한효소로 사용하여, 얻어진 FABP4 유전자의 빈도는 품종별로 다르게 나타났다. 통계적 분석을 통하여 각 유전자형에 대한 경제 형 질과 연관성을 분석한 결과 일당증체량, 등지방두께, 정육율, 사료요구량은 다른 유전자형을 가진 개체들이 유의적으로 우수한 능력을 보였다 (P<0.05). FABP4유전자는 일당증체량, 정육율, 등지방두께에 높은 연관성이 있음을 관찰하였다. 따라서 돼지의 성장과 정육율에 관련된 선발력을 높이기 위해서 FABP4 유전자의 다형성 분석에서 검증된 PCR marker를 우량돼지육종 계획에 있어 분자생물학적 선발 marker로 사용할 수 있을 것으로 사료된다.
본 실험은 지방대사에 영향을 주는 후보 유전자의 발현양상을 조사하기 위하여 bovine mesenchymal stem cell을 이용하여 체외에서 지방분화를 유도하였고, 지방분화 경과에 따른 지방관련 후보유전자의 발현양상을 분석 하였다. Oil red-O 염색법을 이용하여 지방 분화양상을 조사한 결과, 지방 분화 단계별(0, 2, 4 및 6일)로 붉게 염색된 지방적이 증가되었음을 확인하였고, 지방대사의 indicator인 PPAR$\gamma$와 FABP4 유전자는 지방분화 0일과 비교하여 6일에는 각각 3.11배와 3.11배가 증가하였다. 또한 지방대사와 관련이 있다고 추측되는 ICER, NOV, HSPB1 및 SDH 유전자의 발현양상을 조사한 결과, 지방분화 동안 ICER 유전자는 계속적으로 증가하여 6일은 0일에 비해 4.12배의 유의적인 증가를 보인 반면, NOV, HSPB1 및 SDH 유전자의 발현양은 0일 이후 계속적으로 감소하여, 6일에서 각각 2.89배, 3.18배 및 2.36배의 감소를 나타냈다. 본 실험에서, 등심조직에서 근내지방도에서 차이를 나타냈던 ICER, NOV, HSPB1 및 SDH 유전자를 보다 구체적이고 직접적으로 세포에서 지방분화를 통해 연관성을 조사했을 때, 지방분화와 직접적으로 관련되어 있는 것으로 나타났으며, 지방 대사를 조절하는 유전자로 추정된다.
Previously candidate gene approach revealed estrogen receptor (ESR) locus was associated with increased litter size. In this study, PvuII polymorphisms of ESR gene was detected by PCR-RFLP, and ESR locus was evaluated for its association with reproductive tracts components in the Large $White{\times}Meishan$ ($LW{\times}M$) F2 offspring. Ninety seven gilts with reproductive tracts components records and 136 offspring with performance traits records were genotyped and the results were used to estimate allele substitution effects. The results showed that two alleles (A and B) were identified, and 121 bp fragments were observed for the AA genotype and 65 bp and 56 bp fragments for the BB genotype; the length of uterine body (LUB) of BB gilts were significantly shorter than AA gilts', the additive effect was -1.762 cm; the uterine weight (UW) of AB gilts were significantly lighter than AA gilts' with the additive effect -18.058 g; no significant associations of ESR alleles with ovulation rate (OR), length of uterine horn (LUH), length of uterine cervix (LUC), weight of two ovaries (OW), volume of uterine lumen (VUL), length of oviduct (LO) were observed. BB genotypes gilts need significantly less days to 100 kg ($D_{100kg}$) than AA genotypes (p<0.01), the additive effect was per copy of B allele. Allele B is also favorable for average daily gain (ADG), with additive effect 0.015 kg/d (p<0.05). There was no difference between genotypes for backfat thickness at the 13th rib (SF13), loin meat height (ELMH), and loin meat percentage was estimated (ELMP), individual birth weight (IBW) and teat number (TN).
Background: 1-8D gene is a member of human 1-8 interferon inducible gene family and is shown to be overexpressed in fresh colon cancer tissues. Three peptides 1-6, 3-5 and 3-7 derived from 1-8D gene were shown to have immunogenicity against colon cancer. Methods: To study tumor immunotherapy of these peptides we established an adoptive transfer model. $D^{b-/-}{\times}{\beta}2$ microglobulin (${\beta}2m$) null mice transgenic for a chimeric HLA-A2.1/$D^b-{\beta}2m$ single chain (HHD mice) were immunized with irradiated peptide-loaded RMA-S/HHD/B7.1 transfectants. Spleens were removed after last immunization, and splenocytes were re-stimulated in vitro. Lymphocytes from vaccinated HHD mice were transferred together with IL-2 to the tumor bearing nude mice that were challenged S.C. with the HCT/HHD/B7 colon carcinoma cell line that was found to grow in these mice. Results: Peptide 3-5 was found to be highly effective in CTL activity. Adoptively transferred anti-peptide 3-5 cytolytic T lymphocytes caused significant retardation in tumor growth. Conclusion: This study shows that peptide 3-5 can be the most effective candidate for the vaccine of adoptive immunotherapy against colon cancer.
Li, Ning;Yang, Peilong;Wang, Yaru;Luo, Huiying;Meng, Kun;Wu, Nigfeng;Fan, Yunliu;Yao, Bin
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제18권3호
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pp.410-416
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2008
The gene SfXyn10, which encodes a protease-resistant xylanase, was isolated using colony PCR screening from a genomic library of a feather-degrading bacterial strain Streptomyces fradiae var. k11. The full-length gene consists of 1,437bp and encodes 479 amino acids, which includes 41 residues of a putative signal peptide at its N terminus. The amino acid sequence shares the highest similarity (80%) to the endo-1,4-${\beta}$-xylanase from Streptomyces coelicolor A3, which belongs to the glycoside hydrolase family 10. The gene fragment encoding the mature xylanase was expressed in Escherichia coli BL21 (DE3). The recombinant protein was purified to homogeneity by acetone precipitation and anion-exchange chromatography, and subsequently characterized. The optimal pH and temperature for the purified recombinant enzyme were 7.8 and $60^{\circ}C$, respectively. The enzyme showed stability over a pH range of 4.0-10.0. The kinetic values on oat spelt xylan and birchwood xylan substrates were also determined. The enzyme activity was enhanced by $Fe^{2+}$ and strongly inhibited by $Hg^{2+}$ and SDS. The enzyme also showed resistance to neutral and alkaline proteases. Therefore, these characteristics suggest that SfXyn10 could be an important candidate for protease-resistant mechanistic research and has potential applications in the food industry, cotton scouring, and improving animal nutrition.
The bovine lymphocyte antigen (BoLA)-DRB3 gene encodes cell surface glycoproteins that initiate immune responses by presenting processed antigenic peptides to CD4 T helper cells. DRB3 is the most polymorphic bovine MHC class II gene which encodes the peptide-binding groove. Since different alleles favour the binding of different peptides, DRB3 has been extensively evaluated as a candidate marker for associations with various bovine diseases and immunological traits. For that reason, the genetic diversity of the bovine class II DRB3 locus was investigated by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism method (PCR-RFLP). This study describes genetic variability in the BoLA-DRB3 in Iranian Golpayegani Cattle. Iranian Golpayegani Cows (n = 50) were genotyped for bovine lymphocyte antigen (BoLA)-DRB3.2 allele by polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism method. Bovine DNA was isolated from aliquots of whole blood. A two-step polymerase chain reaction followed by digestion with restriction endonucleases RsaI, HaeIII and BstYI was conducted on the DNA from Iranian Golpayegani Cattle. In the Iranian Golpayegani herd studied, we identified 19 alleles.DRB3.2${\times}$16 had the highest allelic frequency (14%), followed by DRB3.2${\times}$7 (11%). Six alleles (DRB3.2${\times}$25, ${\times}$24, ${\times}$22, ${\times}$20, ${\times}$15, ${\times}$3) had frequencies = 2%. Although additional studies are required to confirm the present findings, our results indicate that exon 2 of the BoLA-DRB3 gene is highly polymorphic in Iranian Golpayegani Cattle.
The myostatin (MSTN) gene, as a negative regulator of skeletal muscle growth, has been proposed to be associated with production traits in farm animals. In the present study, a T/C variant at -125 bp (relative to ATG start codon) of 5'regulatory region of rabbit MSTN was identified by direct sequencing. Two hundred and twenty two rabbits, which were randomly sampled from 3 breeds (Ira rabbits, Champagne rabbits and Tianfu black rabbits), were genotyped by high-resolution melting (HRM). Comparing the genotyping results of 47 samples with direct sequencing, the HRM showed high sensitivity (0.96) and high specificity (0.98). In the three rabbit breeds, the allele C was the predominant allele. The polymorphic site showed high heterozygosity (He = 0.48) and high effective number of alleles (Ne = 1.91). The genetic diversity was reasonably informative (0.25
SOHLH2 is a novel germ cell-specific transcription factor that is crucial for folliculogenesis in the ovary and spermatogenesis in the testis. SOHLH2 represents a candidate gene for infertility with premature ovarian failure. We analyzed whether mutations in the SOHLH2 gene in 98 Korean women with premature ovarian failure. The sequence analysis identified six novel SNPs (c.431-41G>C, c.656A>T, c.1000+27C>T, c.1000+33G>T, c1258-106G>A, and c.2094+ 11T>C) from Korean patients with premature ovarian failure. The c.656A>T found in exon 7 results in change of an amino acid, tyrosine to phenylalanine. Functional mutations in SOHLH2 gene are rare in Korean women with premature ovarian failure.
Jeong, Chan Young;Kim, Jun Hyeok;Lee, Won Je;Jin, Joo Yeon;Kim, Jongyun;Hong, Suk-Whan;Lee, Hojoung
Molecules and Cells
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제41권4호
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pp.351-361
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2018
Sucrose is a crucial compound for the growth and development of plants, and the regulation of multiple genes depends on the amount of soluble sugars present. Sucrose acts as a signaling molecule that regulates a proton-sucrose symporter, with its sensor being the sucrose transporter. Flavonoid and anthocyanin biosynthesis are regulated by sucrose, and sucrose signaling can affect flavonoid and anthocyanin accumulation. In the present study, we found a Myb transcription factor affecting accumulation of anthocyanin. AtMyb56 showed an increase in its expression in response to sucrose treatment. Under normal conditions, anthocyanin accumulation was similar between Col-0 (wild type) and atmyb56 mutant seedlings; however, under sucrose treatment, the level of anthocyanin accumulation was lower in the atmyb56 mutant plants than in Col-0 plants. Preliminary microarray analysis led to the investigation of the expression of one candidate gene, AtGPT2, in the atmyb56 mutant. The phosphate translocator, which is a plastidial phosphate antiporter family, catalyzes the import of glucose-6-phosphate (G-6-P) into the chloroplast. AtGPT2 gene expression was altered in atmyb56 seedlings in a sucrose-dependent manner in response to circadian cycle. Furthermore, the lack of AtMyb56 resulted in altered accumulation of maltose in a sucrose-dependent manner. Therefore, the sucrose responsive AtMyb56 regulates AtGPT2 gene expression in a sucrose-dependent manner to modulate maltose and anthocyanin accumulations in response to the circadian cycle.
Purpose: Under different culture conditions, periodontal ligament (PDL) stem cells are capable of differentiating into cementoblast-like cells, adipocytes, and collagen-forming cells. Several previous studies reported that because of the stem cells in the PDL, the PDL have a regenerative capacity which, when appropriately triggered, participates in restoring connective tissues and mineralized tissues. Therefore, this study analyzed the genes involved in mineralization during differentiation of human PDL (hPDL) cells, and searched for candidate genes possibly associated with the mineralization of hPDL cells. Methods: To analyze the gene expression pattern of hPDL cells during differentiation, the hPDL cells were cultured in two conditions, with or without osteogenic cocktails (${\beta}$-glycerophosphate, ascorbic acid and dexamethasone), and a DNA microarray analysis of the cells cultured on days 7 and 14 was performed. Reverse transcription-polymerase chain reaction was performed to validate the DNA microarray data. Results: The up-regulated genes on day 7 by hPDL cells cultured in osteogenic medium were thought to be associated with calcium/iron/metal ion binding or homeostasis (PDE1A, HFE and PCDH9) and cell viability (PCDH9), and the down-regulated genes were thought to be associated with proliferation (PHGDH and PSAT1). Also, the up-regulated genes on day 14 by hPDL cells cultured in osteogenic medium were thought to be associated with apoptosis, angiogenesis (ANGPTL4 and FOXO1A), and adipogenesis (ANGPTL4 and SEC14L2), and the down-regulated genes were thought to be associated with cell migration (SLC16A4). Conclusions: This study suggests that when appropriately triggered, the stem cells in the hPDL differentiate into osteoblasts/cementoblasts, and the genes related to calcium binding (PDE1A and PCDH9), which were strongly expressed at the stage of matrix maturation, may be associated with differentiation of the hPDL cells into osteoblasts/cementoblasts.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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