식품에서 대장균군을 효율적으로 분리하기 위해 대장균군 선택배지 5종: Chromocult Chromocult coliform agar (Merck), Hicrome coliform agar (Sigma), CHROMagar ECC, Brilliance E.coli/coliform medium (OXOID), endo agar (Merck)을 선별하여 식품 분리 대장균군 83종 및 표준균주 21종에 대해서 민감도와 특이도를 분석한 결과 Chromocult coliform agar와 HICrome coliform agar에서 94%도 민감도가 가장 높았으며, Brilliance E.coli/coliform medium는 93%, CHROMagar ECC는 92%, ENDO agar는 74%의 민감도를 나타냈다. Chromocult coliform agar와 HICrome coliform agar는 대장균군의 회수율도 높았다. 그러므로 Chromocult coliform agar와 HICrome coliform agar는 대장균군을 분리하는데 가장 효율적인 배지로 생각된다.
본 연구는 식품으로부터 Shigella spp.를 검출하기 위해서 현재 사용되고 있는 분리배지를 대상으로 분리 성능을 비교하였다. MAC, SSA, DCA, XLD, HEA와 CHROMagar 총 6개의 분리배지를 대상으로 비교하였다. 일반 Shigella spp. 에 대한 성장은 MAC에서 TSA와 비슷한 수준 균수를 보였고 DCA에서 낮은 균수로 측정되었다. 소고기, 돼지고기, 새우를 대상으로 한 회수실험은 S. sonnei가 CHROMagar에서 성장이 유의적으로 높았으며(p<0.05) 양상추와 양배추에서는 S. sonnei가 SSA에서의 성장이 유의적으로 높게 나타났다(p<0.05). 식품 상재균은 소고기, 새우, 양배추에서 전체적으로 낮은 수준으로 측정되었으나 각 배지에서 유의적 차이는 없었다(p>0.05). 열 스트레스를 받은 S. sonnei는 MAC, SSA에서만 성장하였다. Enterobacteriaceae를 대상으로 한 선택성 측정 결과 HEA가 가장 높은 선택성을 나타내었다. Morganella spp.는 각 분리배지에서 Shigella spp.와 구분되지 못하였다. 실험에 사용된 배지는 각각의 조건에 따라 분리되는 특성이 상이하므로 식품에서 분리배지를 이용하여 Shigella spp.를 분리하고자 할 경우 분리 균의 상태에 따라 분리배지를 선택하여 사용하는 것이 바람직할 것으로 생각되었다.
병원균의 조기 차단을 목적으로 본 연구에서는 사용이 간편한 chlorine oxide 기포 발생형 살균세정용 타블렛 정제의 살균효과를 검증하였다. 대한민국 식품의약품안전처 고시 2012-10호의 사용기준에 따른 살균력의 검증결과, 본 연구에서 사용한 살균세정제를 20±1℃에서 5분±10초 처리하였을 때 Escherichia coli ATCC 10536 및 Staphylococcus aureus ATCC 6538의 균에 대하여 초기균수(cfu/ml)를 99.999% 이상 감소하였다. 살균세정제를 희석 농도 0.1%의 경수에 1일 사용한 양말과 상하 내의를 1시간 침지한 후 CHROMagar 배지를 사용하여 살균정도를 조사한 결과 살균세정제가 투여된 처리구에서는 균이 전혀 검출되지 않았으나 무 처리 대조군의 경우 Staphylococcus sp. 등을 포함한 총 6.5×104 cfu/ml의 균체가 자랐다. 또한 1.5×108 cfu/ml의 실험용 E. coli BL21 균주에 살균세정제 0.1% (w/v)을 투여한 결과 투여 5분 내에 모든 균이 사멸하였다. 본 연구에서 검증한 기포발생형 살균세정제는 병원균, 실험용 대장균 및 생활용품에 대하여 뛰어난 살균효과가 있는 것으로 판명되었다.
Noorulhuda Ojaimi Mahdi, Al-Dahlaki;Safaa Al-Deen Ahmed Shanter, Al-Qaysi
한국미생물·생명공학회지
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제50권4호
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pp.488-500
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2022
Most fungal infections by opportunistic yeast pathogens such as Candida spp. are the major causes of morbidity and mortality in patients with lowered immune. Previous studies have reported that some strains of Candida secret secondary metabolites play an important role in the decreasing of immunity in the infected patient. In this study, 110 Candida spp. were isolated from different clinical specimens from Baghdad hospitals. Candida isolates were identified by conventional methods, they were processed for Candida speciation on CHROMagar. The results of identification were confirmed by internal transcribed spacer (ITS) sequencing. Phylogenetic trees were analyzed with reference strains deposited in GenBank. Antifungal susceptibility testing was evaluated by the disc diffusion method and performed as recommended by the Clinical and Laboratory Standard Institute (CLSI) M44-A document. Candida isolates investigated produce secondary metabolites gliotoxin with HPLC technique and quantification. Out of 110 Candida isolates, C. albicans (66.36%) was the most frequent isolate, followed by the isolates of C. tropicalis (10.9%) and C. glabrata (6.36%) respectively. Concerning the antifungal susceptibility test, Candida isolates showed a high level of susceptibility to Miconazole (70.9%), Itraconazole (68.2%), and Nystatine (64.5%). The ability of obtained isolates of Candida spp. to produce gliotoxin on RPMI medium was investigated, only 28 isolates had the ability to secret this toxin in culture filtrates. The highest concentrations were detected in C. albicans (1.048 ㎍/ml). Gliotoxin productivity of other Candida species was significantly lower. The retention time for gliotoxin was approximately 5.08 min.
본 연구는 non-O157 EHEC의 혈청형별 증균 및 선택배지에서의 분리 조건 및 비교 시험을 하여 최적의 검출 방법을 제시하고자 하였다. EC medium with MUG broth, BRILA broth, mTSB broth with novobiocin 3종의 증균배지 성능 및 배양 조건의 비교 결과 EC-MUG 증균배지를 $42^{\circ}C$에서 24시간 배양하면 EHEC의 효율적인 증균이 이루어질 수 있을 것이라 생각된다. ENDO agar, Chromocult agar, TBX agar, CHROMagar$^{TM}$ STEC medium 4종의 선택배지에 가장 효과적인 배지를 확인결과 TBX agar가 검출율이 가장 높았으나 1종의 배지를 사용했을 경우 다양한 EHEC 혈청형 균를 검출 하기는 어렵다고 생각된다. 그러므로 EHEC를 효과적으로 검출하고자 할 경우 TBX agar와 보완이 가능한 그 외의 배지를 사용하여야 효과적인 검출이 가능할 것으로 생각된다. 또한, 각 배지가 혈청형에 따른 분리효율이 다르므로 본 연구 결과를 참조하여 가장 적합한 배지를 선택 해야 할 것으로 보인다. 향후 non-O157 EHEC의 적절한 기질을 사용하여 다양한 혈청형을 모두 검출 할 수 있는 효율적인 배지의 개발이 필요하다고 생각된다.
장염비브리오는 우리나라에서 하절기에 발생하는 식중독의 주요 원인균으로 주로 해수 및 어패류를 통해 인체에 감염된다. 최근 지구 온난화로 해수의 온도가 상승하면서 해양환경 중 세균들의 분포도가 증가하고 또 다양한 항생제에 대한 내성을 보이는 병원균들이 확산되고 있어 국민보건 및 수산양식 등의 분야에 큰 문제로 대두되고 있다. 이에 본 연구에서는 경기, 인천지역 7곳에서 해수 및 어패류 시료를 채취하여 장염비브리오균의 분포도를 모니터링하고 이들의 항생제 내성 양상을 분석하였다. 총 966건의 시료를 $CHROMagar^{TM}$ 및 TCBS 평판배지와 multiplex PCR기법으로 동정했을 때 전체 해수 시료의 61.9%, 어패류 시료의 41.8% 등 총 47.7%의 시료에서 장염비브리오균이 검출되었다. 이들 분리균주들의 항생제 내성을 13종의 항생제에 대해 분석한 결과 97.3%와 87.3%가 각각 vancomycin과 ampicillin에 대해 내성을 보였고 cephalothin (48.8%)과 rifampin (46.1%)에 대한 내성비율도 기타 다른 항생제들에 비해 상대적으로 높은 것으로 나타났다. 분리균주들의 항생제 감수성은 chloramphenicol (91.7%)과 trimethoprim-sulfamethoxazole (91.8%)에 대해 가장 높았고, gentamycin (82.3%), tobramycin (74.8%), nalidixic acid (71.6%), tetracyclin (69.4%), cefotaxime (63.0%) 등의 순서로 감수성 비율이 높았다. 분리균주들의 약 69%가 vancomycin과 ampicillin을 포함하여 3개 이상의 항생제에 대해 다중내성을 보였고 특히 11개 항생제에 대해 내성을 보이는 균주도 2개 검색되었다. 항생제 내성 장염비브리오 분리균주들의 플라스미드 프로파일을 분석한 결과 55.1%가 플라스미드를 보유하고 있었으며, 이들은 총 24가지 유형으로 분류되었으나 플라스미드 프로파일과 항생제 내성 간의 뚜렷한 상관관계는 관찰되지 않았다.
A quantitative detection method for Salmonella in seafood was developed using a SYBR Green-based real-time PCR assay. The assay was developed using pure Salmonella DNA at different dilution levels [i.e., 1,000 to 2 genome equivalents (GE)]. The sensitivity of the real-time assay for Salmonella in seeded seafood samples was determined, and the minimum detection level was 20 CFU/g, whereas a detection level of 2 CFU/ml was obtained for pure culture in water with an efficiency of ${\geq}85%$. The real-time assay was evaluated in repeated experiments with seeded seafood samples and the regression coefficient ($R^2$) values were calculated. The performance of the real-time assay was further assessed with naturally contaminated seafood samples, where 4 out of 9 seafood samples tested positive for Salmonella and harbored cells <100 GE/g, which were not detected by direct plating on Salmonella Chromagar media. Thus, the method developed here will be useful for the rapid quantification of Salmonella in seafood, as the assay can be completed within 2-3 h. In addition, with the ability to detect a low number of Salmonella cells in seafood, this proposed method can be used to generate quantitative data on Salmonella in seafood, facilitating the implementation of control measures for Salmonella contamination in seafood at harvest and post-harvest levels.
Lee, Hai Yen;Chai, Lay Ching;Pui, Chai Fung;Wong, Woan Chwen;Mustafa, Shuhaimi;Cheah, Yoke Kqueen;Issa, Zuraini Mat;Nishibuchi, Mitsuaki;Radu, Son
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제21권9호
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pp.954-959
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2011
There have been a number of studies conducted in order to compare the efficiencies of recovery rates, utilizing different protocols, for the isolation of L. monocytogenes. However, the severity of multiple cell injury has not been included in these studies. In the current study, L. monocytogenes ATCC 19112 was injured by exposure to extreme temperatures ($60^{\circ}C$ and $-20^{\circ}C$) for a one-step injury, and for a two-step injury the cells were transferred directly from a heat treatment to frozen state to induce a severe cell injury (up to 100% injury). The injured cells were then subjected to the US Food and Drug Administration (FDA), the ISO-11290, and the modified United States Department of Agriculture (mUSDA) protocols, and plated on TSAyeast (0.6% yeast), PALCAM agar, and CHROMAgar Listeria for 24 h or 48 h. The evaluation of the total recovery of injured cells was also calculated based on the costs involved in the preparation of media for each protocol. Results indicate that the mUSDA method is best able to aid the recovery of heat-injured, freeze-injured, and heat-freeze-injured cells and was shown to be the most cost effective for heat-freeze-injured cells.
본 연구는 농산물로부터 S. aureus분리에 적합한 배지를 선발하고자 난황첨가 mannitol salt agar (MSA), 난황과 tellurite과 첨가된 Barid-Parker agar (BPA), 토끼혈장이 첨가된 Barid-Parker agar (BPA+RPF), 3M petrifilm Staph Express count plates (Petriflm) 및 CHROMagar Staphylococcus aureus (CSA)의 민감도, 특이도, 손상된 세포에 대한 회복능, 농산물로부터 회수율에 대하여 비교 실험을 하였다. 민감도와 특이도를 조사하기 위하여 S. aureus 21주, Stapylococcus spp. 20주, 그 외 식중독균 33주를 각 선택배지에 접종하였으며 손상된 세포에 대한 회복능은 조사를 위하여 열($60^{\circ}C$, 90초), 산(1% lactic acid, 10분), 저온($-20^{\circ}C$, 1시간) 처리하였다. 또한 양상추, 토마토, 고추에 S. aureus를 4.0 log CFU/g농도로 접종하고 각 선택배지에 도말하였다. 민감도는 BPA+RPF(100%) = CSA(100%)=petrifilm(100%) > MSA(90.5%) > BPA(90.5%), 특이도는 BPA+RPF(100%) = CSA(100%) > MSA(84.6%) > BPA(75.0%) > petrifilm(67.3%) 순으로 나타났다. 한편, 손상된 세포의 회복능과 농산물에서 회수율은 5종의 배지에서 차이가 없었다. 따라서 농산물 중 S. aureus를 분리할 시 BPA+RPF와 CSA를 사용하는 것이 가장 효과적일 것으로 판단된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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