• 한국식품영양학회지
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• 제28권5호
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• pp.918-925
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• 2015

An investigation was conducted to evaluate the hygienic status of 33 high school foodservice systems in Yongin city by using hygiene management guide checklist, ATP bioluminescence assay and microbe inspection petrifilm (APC, coliform group, Staphylococcus aureus) of food utensils during use. The 22 hygiene management guide checklist items about facilities, personal hygiene, food control, distribution, washing and disinfection had good grade but there were some inadequate behaviors on observation. The inspection results showed their sanitary condition met the level B of the recommendation of Korea method, it means sanitary management system get settled but more practical CCP system was needed. ATP bioluminescence assay was conducted on surface of food facilities, ATP ranged 425~2,552 RLU on gloves, 541~70,251 RLU on apron, 1,596~88,490 RLU on working desk, 1,177~263,813 RLU on sterilizer grip, 715~32,814 RLU on sterilizer shelf, 114~619,725 RLU on refrigerator grip, 677~319,007 RLU on refrigerator shelf, 71~196,725 RLU on freezer grip, 1,535~233,375 RLU on freezer shelf. APC ranged $66.7{\pm}29.0CFU$ on freezer grip, $102.1{\pm}35.9CFU$ on refrigerator grip, $45.4{\pm}28.2CFU$ on heating cabinet grip, $58.8{\pm}40.4CFU$ on sterilizer grip, the number of coliform group ranged $5.6{\pm}4.9CFU$ on freezer grip, $9.1{\pm}8.7CFU$ on refrigerator grip, $1.2{\pm}1.1CFU$ on heating cabinet grip, $4.5{\pm}4.4CFU$ on sterilizer grip. S. aureus ranged $8.0{\pm}5.6CFU$ on freezer grip, $12.2{\pm}9.6CFU$ on refrigerator grip, $2.1{\pm}1.6CFU$ on heating cabinet grip, $11.6{\pm}6.4CFU$ on sterilizer grip.

• 한국축산식품학회지
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• 제33권5호
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• pp.655-663
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• 2013

본 연구에서는 Salmonella invA 유전자를 마커로 Salmonella 특이 LAMP primer를 제작하였고, inclusivity 및 exclusivity 실험 결과는 각각 100%로 관찰되었다. 순수 배양된 Salmonella 희석액에서의 검출한계는 18.17분에서 $3.2{\times}10^3$ CFU/mL ($R^2$ = 0.9446)으로 관찰되어 신속 간단하고 민감도가 높아 Salmonella 검출을 위한 방법으로 효과적일 뿐만 아니라 간접적인 정량기법으로서도 활용 가능함을 알 수 있었다. 1차 증균 배지인 BPW에 S. Enteritidis 접종 후 0시간 및 12시간 배양 후 LAMP의 검출한계는 각각 $3.2{\times}10^3$ CFU/mL 및 $3.2{\times}10^0$ CFU/mL으로 관찰되었고, 오리도체 시료가 포함된 BPW에 S. Enteritidis 접종 후 0시간 및 12시간 증균액에서의 LAMP 검출한계는 각각 $3.2{\times}10^3$ CFU/mL 및 $3.2{\times}10^0$ CFU/mL으로 관찰되어 PCR과 비교하였을 때 오리도체시료 성분에 의한 영향이 비교적 낮았음을 알 수 있었다. 또한, 실제 도압장에서 채취한 오리도체시료를 BPW에 6시간 배양한 1차 증균액에 개발한 LAMP기법을 적용한 결과, 96%의 민감도 및 84%의 특이도를 보여 오리도체에서의 Salmonella 신속 스크리닝 기법으로서 효과적으로 활용될 수 있음을 알 수 있었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제24권6호
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• pp.862-868
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• 2014

Certain Escherichia coli (E. coli) strains have the ability to cause diarrheal disease. Five types of diarrheagenic E. coli have been identified, including EHEC, ETEC, EPEC, EAEC, and EIEC. To detect these five diarrheagenic types rapidly, we developed a one-step multiplex PCR (MP-PCR) assay using nine primer pairs to amplify nine virulence genes specific to the different virotypes, with each group being represented (i.e., stx1 and stx2 for EHEC, lt, sth, and stp for ETEC, eaeA and bfpA for EPEC, aggR for EAEC, and ipaH for EIEC). The PCR primers were constructed using MultAlin. The sensitivity and specificity of the constructed multiplex PCR primers were measured using DNA isolated from diarrheagenic E. coli strains representing each group. The limits of detection were as follows: $5{\times}10^1CFU/ml$ for EHEC, $5{\times}10^3CFU/ml$ for ETEC expressing lt and sth, $5{\times}10^4CFU/ml$ for ETEC expressing stp, $5{\times}10^2CFU/ml$ for EPEC, $5{\times}10^4CFU/ml$ for EAEC, and $5{\times}10^2CFU/ml$ for EIEC. To confirm the specificity, C. jejuni, C. perfringens, S. Typhimurium, V. parahaemolyticus, L. monocytogenes, Y. enterocolitica, B. cereus, and S. aureus were used as negative controls, and no amplification was obtained for these. Moreover, this kit was validated using 100 fecal samples from patients with diarrhea and 150 diarrheagenic E. coli strains isolated in Korea. In conclusion, the multiplex PCR assay developed in this study is very useful for the rapid and specific detection of five diarrheagenic E. coli types. This single-step assay will be useful as a rapid and economical method, as it reduces the cost and time required for the identification of diarrheagenic E. coli.

• 대한수의학회지
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• 제45권2호
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• pp.191-197
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• 2005

An immunochromatographic (IC) strip for the rapid detection of Salmonella spp. in the enriched sample was developed. Affinity purified Salmonella polyclonal antibody was conjugated with 40 nm colloidal gold particles which were prepared by citrate method in our laboratory. The antigen-antibody-gold complex was captured by Salmonella antibody attached to test line of nitrocellulose membrane during the capillary migration of sample. Specificity of the IC strip was calculated to be 100% (12/12) and sensitivity was 97.6% (41/42) in the test with pure cultured bacteria. Salmonella was artificially inoculated into raw pork macerated with enrichment broth. And then it was 10-fold diluted from $5.2{\times}10^{8}CFU/ml$ to 5.2 CFU/ml. The IC strip could detect $5.2{\times}10^{6}CFU/ml$ before enrichment. However, the lowest limit of detection was 5.2 CFU/ml after overnight incubation. The results indicated that the IC assay was a rapid, economical and simple method with high specificity and sensitivity for the detection of Salmonella spp. without using any equipment.

• BioChip Journal
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• 제12권4호
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• pp.287-293
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• 2018

Bacillus cereus can cause blood infections (i.e., sepsis). Its early detection is very important for treating patients. However, an antibody with high binding affinity to B. cereus is not currently available. Bacteriophage cell wall-binding domain (CBD) has strong and specific binding affinity to B. cereus. Here, we report the improvement in the sensitivity of an ATP bioluminescence assay for B. cereus detection using CBD-conjugated magnetic nanoparticles (CBD-MNPs). The assay was able to detect as few as 10 colony forming units (CFU) per mL and $10^3CFU\;per\;mL$ in buffer and blood. CBD-MNPs did not show any cross-reactivity with other microorganisms. These results demonstrate the feasibility of the ATP assay for the detection of B. cereus.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제20권3호
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• pp.569-573
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• 2010

A quantitative detection method for Salmonella in seafood was developed using a SYBR Green-based real-time PCR assay. The assay was developed using pure Salmonella DNA at different dilution levels [i.e., 1,000 to 2 genome equivalents (GE)]. The sensitivity of the real-time assay for Salmonella in seeded seafood samples was determined, and the minimum detection level was 20 CFU/g, whereas a detection level of 2 CFU/ml was obtained for pure culture in water with an efficiency of ${\geq}85%$. The real-time assay was evaluated in repeated experiments with seeded seafood samples and the regression coefficient ($R^2$) values were calculated. The performance of the real-time assay was further assessed with naturally contaminated seafood samples, where 4 out of 9 seafood samples tested positive for Salmonella and harbored cells <100 GE/g, which were not detected by direct plating on Salmonella Chromagar media. Thus, the method developed here will be useful for the rapid quantification of Salmonella in seafood, as the assay can be completed within 2-3 h. In addition, with the ability to detect a low number of Salmonella cells in seafood, this proposed method can be used to generate quantitative data on Salmonella in seafood, facilitating the implementation of control measures for Salmonella contamination in seafood at harvest and post-harvest levels.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제34권3호
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• pp.290-295
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• 2019

최근 한국에서 발생한 Salmonella로 인한 식중독 사고는 2018년 9월 학교급식에서 제공된 초콜릿 무스 케이크가 원인이 되었다. 이 연구의 목적은 Salmonella Typhimurium이 인위적으로 접종된 무스케이크와 티라미수에서 3M Molecular Detection Assay 2 - Salmonella와 식품공전에 등재된 방법인 분리배지와 real-time PCR을 비교하는 것이었다. 무스케이크 2종과 티라미수 2종 25 g에 225 mL BPW를 넣고 $37^{\circ}C$에서 24시간 동안 증균 배양하였다. 배양 후, 3M Molecular Detection Assay 2 - Salmonella, 분리배지 그리고 real-time PCR로 분석하였다. 초콜릿 무스 케이크를 제외하고 3가지 방법은 유사한 결과를 보였다. 초콜릿 무스 케이크에서 분리배지와 3M Molecular Detection Assay 2 - Salmonella는 모든 접종수준에서 동일한 결과를 나타낸 반면 real-time PCR은 $10^4CFU/25g$ 수준에서 1번의 양성결과를 제외하고 모두 검출되지 않았다. 초콜릿 무스에 S. Typhimurium을 $10^2CFU/25g$ 수준으로 접종하였을때, real-time PCR를 이용한 검출은 15%에서는 부분적인 음성을 나타냈고, 20-100% 함량의 초콜릿 무스에서는 모두 음성이었다. Real-time PCR로는 chocolate이 15% 이상 함유된 식품에서의 Salmonella균 검출이 불가능하였지만, LMAP 기반의 3M Molecular Detection Assay 2으로는 chocolate 농도에 관계없이 검출이 가능하였다.

• 한국양식학회지
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• 제21권1호
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• pp.1-6
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• 2008

조피볼락 Sebastes schlegeli 치어의 성장률 향상을 도모하고 적용할 만한 생균제로서의 그 가능성을 보고자, 평균 체중 0.7 g의 조피볼락 치어에 2종의 유산균을 사료에 첨가하여 본 실험을 수행하였다. 각각의 첨가구는 Lactobacillus brevis 및 Lactobacillus plantarum을 농도별로 실험사료 1 g 중량당 유산균 첨가수준을 $10^4,\;10^6$ 및 $10^8$ cfu 수준으로 처리한 첨가구로 하였다. 성장효과에서 L. plantarum을 농도별로 실험사료 1g 중량당 유산균 첨가수준을 $10^8$ cfu 수준으로 처리한 Lp-8 실험구에서 중량 증가 효과가 있었으며, L. brevis의 경우는 첨가효과가 없었다. 실험종료 후, 혈액분석 결과는 hematocrit 28.5-32.5%, hemoglobin 8.3-8.6 g/dl으로 차이는 없었으나, 혈장 내 총 단백질 함량은 Lp-8 실험구에서 높았다. 혈장 내 총 콜레스테롤 함량은 유산균 2종에서 높은 첨가농도 일수록 그 수치가 낮아지는 경향을 보였다. 상기 실험결과로 미루어 볼 때, 수중환경에 서식하는 어류의 장내 정상적인 균주가 아닌 유산균은 개별적 종에 따라 다른 효과를 얻을 수는 있으나, 조피볼락 치어는 L. plantarum을 $10^8$ cfu/g 수준으로 사료 내 첨가하여 성장효과를 거둘 수 있었다.

• 한국축산식품학회지
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• 제20권3호
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• pp.231-235
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• 2000

원유에 존재하는 Ps. fluorescens의 균수를 신속하게 측정하기 위한 Inhibition Enzyme Linked Immunosorbant Assay (ELSIA)를 개발하기 위해 Ps, fluorescens(KCTC 2344)을 산란계에 접종하여 Ps.fluorescens에 대한 anti-Ps. fluorescens IgY 항체를 생산하고 그 항체의 역기를 ELISA로 측정한 결과 32일까지 항체 역가가 증가하였으며, 분리된 IgY 항체의 titer는 1:128,000으로 나타났다. Anti-Ps.fluorescens IgY 항체에대한 교차반응을 조사한 결과 그람양성균 Lactococcus faecalis, Staphylococcus aureus 뿐만 아니라 그람음성 균인 Achrombacter sal-monisida, Escherichia coil와도 교차반응을 거의 하지 않는 것으로 나타났다. Anti-Ps. fluo-rescens IgY 항체를 가지고 Inhibition ELISA 방법으로 Ps. fluorescens 균수를 신속한 측정할 수 있는 표준곡선을 작성한 결과 Ps. fluorescens균을 5.0$\times$$10^4$cfu/ml부터 5.0$\times$$10^{8}$cfu/ml 측정할 수 있는 것으로 나타났다.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2001년도 추계학술발표대회
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• pp.775-778
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• 2001

Pichia pastoris에서 생산된 rtLkn-1 은 농도에 따라 CFU의 colony 형성을 억제하였으며, 마우스와 인간 골수 세포에서 항암제에 의한 stem cell 및 progenitor cell의 사멸을 억제하였고 이것은 항암제가 작용하는 동안 세포 주기를 일시적으로 휴지기로 유도하였기 때문으로 사료된다.