In this study, the antioxidative effect and protective potential against oxidative damage of extract and fractions from broccoli were investigated under in vitro and cellular system. The methanol (MeOH) extracts of broccoli flowers and sprouts were partitioned as dichloromethane, n-butanol (BuOH) and aqueous fractions. The comparison of antioxidative effect of broccoli flowers and sprouts showed that broccoli sprouts exerted the more effective protective activity from 2,2'-azobis (2-aminopropane) dihydrochloride (AAPH)-induced oxidative stress in LLC-$PK_1$ porcine renal epithelial cell. In addition, the extract and fractions from broccoli sprouts showed strong scavenging effect of 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical and the BuOH fraction exerted the strongest activity. Therefore, the BuOH fraction was evaluated as the most active fraction with strong radical scavenging activity among the fractions of broccoli flowers and sprouts. The present study suggests the antioxidative potential against free radical-induced oxidative damage of flowers and sprouts of broccoli. In addition, the BuOH fraction of broccoli is considered as the active fraction with antioxidative effect.
SD계 흰쥐를 사용하여 평균적으로 하루에 솔잎 추출물의 BuOH 획분을 25, 50, 100mg/kg BW가 섭취하도록 사료에 첨가하여 45일 동안 투여하였다. BuOH-25 투여그룹을 제외한 BuOH-5- 및 BuOH-100 투여그룹의 mitochondria 및 microsomes은 대조그룹 대비 11.6%, 20.1% 및 10.5%, 13.5%의 매우 유의적인 간장 내 콜레스테롤 침착 억제효과가 인정되었다. BuOH-25, BuOH-50, BuOH-100 투여그룹의 mitochondria에서는 대조그룹 대비 2.9%, 13.3%, 18.5%의 .OH 라디칼 억제효과로서 BuOH-5- 및 Bu-OH-100 투여그룹에서 높은 유의성이 인정되었으며, microsome에서는 대조그룹 대비 15.7%, 20.0%, 20.6%의 매우 효과적인 .OH 라디칼의 생성 억제효과가 인정되었다. 또한 BuOH-25, BuOH-50, BuOH-100 투여그룹의 간장 cytosol 획분에서는 대조그룹 대비 5.2%, 8.0%, 11.1%의 $O_2$라디칼의 생성 억제효과로서 BuOH-50 및 BuOH-100 투여 그룹에서 유의성이 인정되었다. 간장 mitochondria 획분에서 BuOH-25, BuOH-50, BuOH-100 투여그룹의 Cu/Zn-SOD 활성은 대조그룹 대비 각각 4.6%, 10.3%, 15.9%의 Cu/Zn-SOD 활성 증가효과로서 BuOH-50 및 BuOH-100 투여그룹에서 유의성이 인정되었지만, Mn-SOD 활성은 세가지 BuOH 투여그룹의 유의성은 나타나지 않았다. BuOH-25, BuOH-50, BuOH-100 투여그룹의 간장 cytosol 획분에서는 대조그룹 대비 각각 9.0%, 19.4%, 25.6%의 매우 유의적인 GPx 활성 증가효과가 인정되었다. 따라서 솔잎의 BuOH 획분은 조직의 콜레스테롤의 침착을 효과적으로 억제효과할 뿐만 아니라 활성산소의 생성을 유의적으로 억제하고 제거 효소의 활성을 증가시킴으로써 노화과정을 효과적으로 억제할 수 있을 것으로 기대된다.
Several coumarins isolated from Angelica sp. were described to show inhibitory effects against human platelet aggregation. The anti-thrombotic and anti-platelet potential was evaluated, in this paper, with the BuOH soluble fraction of Angelica dahurica root. The BuOH fraction was divided into five subfractions fr. A - E and tested in the mouse model of thrombosis. Survival was enhanced to 35% with fr. A or fr. E treated (500 mg/Kg, p.o.) group of mice compared with 5% survival of the control group. However, none of the 8 coumarin glycosides obtained from fr. A, at the conc. of 0.5 mg/ml, showed inhibitory effects against rat platelet aggregation induced by ADP or collagen.
The potential antioxidant and anticancer activities of Hexane, EtOAc (Ethyl acetate), BuOH (n-Buthanol) and water fractions from methanolic (MeOH) extract of Picrasma quassioides (D. Don) Benn. were evaluated in vitro. Tested fractions showed strong antioxidant activity, especially EtOAc fraction had the highest activity ($IC_{50}\;=\;114.01\;{\mu}g/mL$), containing high total phenolics and total flavonoids contents, showed $67.59\;Tan\;{\mu}g/mg$ and $64.95\;Que\;{\mu}g/mg$ respectively. Anticancer activity of these fractions was tested by MTT assay on HT-29 (the human colon carcinoma cells) cell line. BuOH fraction not only showed very high anticancer activity, but also had no cytotoxic effect on 293 (the human normal kidney cells) cell line. Considering these results, we used BuOH fraction of MeOH crude extract from P. quassioides (D.Don) Benn. to do assessment of apoptosis by flow cytometry and the mRNA expression levels of widely established apoptotic-related genes on HT-29 cell line. All the experiments showed that BuOH fraction can induce apoptosis on HT-29 cell line strongly. Taken together, methanolic extract of P. quassioides has potential for antioxidant and anticancer activities products.
솔잎 추출물의 BuOH획분을 하루 25, 50, 100 mg/kg BW로써 SD계 흰쥐에 45일동안 투여하여 간장 세포막의 유동성(MF), 기초 및 유도산소라디칼(BOR 및 IOR), 산화적 스트레스로서 과산화지질(LPO) 및 산화단백질(OP), 리포푸신(LF)의 축적에 미치는 영향을 평가하였다. MF은 간장의 mitochondria에서 BuOH-50 및 BuOH-100 투여군에서 16∼22%의 유의적인MF의 증가효과가 인정되었지만(p<0.01∼0.001), 간장 microsomes에서는 BuOH획분의 투여에 의한 MF의 유의적인 증가효과를 기대할 수 없었다. BOR 및 IOR의 생성은 간장의 mitochondria에서 BuOH-25, BuOH-50, BUOH-100 투여군은 각각 11∼27% 및 11∼28%의 BOR 및 IOR의 생성 억제효과가 인정되었고(p<0.05∼0.001), microsomes에서 BuOH-50, BuOH-100 투여군 및 BuOH-25, BuOH-50, BuOH-100 투여군은 각각 l1∼24% 및 l5∼24%의 유의적인 IOR의 생성 억제효과가 인정되었다(p<0.05∼0.001, p<0.01∼0.001). LPO의 생성은 간장의 mitochondria에서 BuOH-100투여군과 microsomes에서는 BuOH-50, BuOH-100투여군에서 각각9%, 9∼l3%의 유의적인 LPO의 생성 억제효과가 인정되었고(P<0.05∼0.01), OP의 생성은 간장의 mitochondria에 서 BuOH-50 및 BuOH-100투여군에 서 10∼12%의 유의적인 OP의 생성 억제효과가 인정되었지만(p<0.05), 간장의 microsomes에서는 유의성을 인정할 수 없었다. 그렇지만, 간장의 chloroform층에서 LF의 축적은 BuOH-50, BuOH-100투여군에서 8∼9%의 유의적인 LF의 축적 억제효과가 인정되었다(p<0.05). 따라서 솔잎 추출물의 BuOH 획분의 투여는 간장의 유동성을 촉진하고 산화적 스트레스를 효과적으로 억제하여 생리적 노화를 효과적으로 억제할 수 있을 것으로 기대된다.
SD계 랫트를 사용하여 솔잎 추출물의 BuOH획분을 하루에 각각 25, 50 및 100mg/kg B.W. 이 섭취될 수 있도록 BuOH 획분을 사료에 각각 0.025%, 0.05% 및 0.1% 첨가하여 조제된 사료로싸 45일 동안 투여하였다. 솔잎 BuOH획분의 투여는 체중변화 및 사료 섭취랑에는 유의적인 영향을 주지 못했다. 그렇지만, BuOH-25, BuOH-50 및 BuOH-100 투여군은 대조군 대비 각각 12.8%, 19.1% 및 21.6%의 현저한 항콜레스테롤효과가 인정되었고, 또한 10.2%, 15.6% 및 23.7%의 유의적인 LDL-콜레스테롤의 증가효과가 인정되었다. BuOH-25, BuOH-50 및 BuOH-100 투여군은 대조군 대비 각각 24.8%, 30.4%, 36.2%의 매우 유의적인 동맥경화지수 (AI)의 감소효과가 인정되었다. BuOH-25, BuOH-50 및 BuOH-100 투여군은 대조군 대비 각각 13.3%, 13.3% 및 16.7%의 매우 유의적인 LPO의 억제효과가 인정되는데, 이러한 사실은 9.8%, 19.7% 및 21.2%의 ·OH 라디칼의 생성 억제효과 때문으로 기대된다. 또한 활성산소의 제거효소로서 BuOH-50 및 BuOH-100 투여군에서 SOD의 활성은 대조군 대비 12.1% 및 23.3%의 유의적인 증가효과가 인정되었다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때 솔잎의 BuOH획분의 투여는 성인병을 효과적으로 억제할 수 있을뿐만 아니라 노화도 매우 효과적으로 억제할 수 있을 것으로 기대된다.
대한약학회 2002년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2
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pp.265.1-265.1
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2002
In the previous study. we isolated kalopanaxsaponin A and pictoside A from the EtOAc fraction of Kalopanax pictus extract. In the present study, the BuOH fraction of K pictus extract was hydrolyzed by alkali and antirheumatic effect of the fraction was evaluated. It was found that the hydrolysate of the BuOH fraction showed inhibition of adjuvant-induced arthritis in rats. Of the EtOAc and BuOH fractions of the hydrolysate, only the former exhibited anti-arthritic activity. (omitted)
본 연구는 동백나무(Camellia japonica L.) 유박 추출물 및 분획물의 in vitro 항산화 활성에 대해 조사하였다. 동백나무 유박은 에탄올을 사용하여 추출하였으며, 이 후 부탄올(BuOH), 에틸아세테이트(EtOAc), 클로로포름 및 헥산을 이용하여 분획물을 조제하였다. 동백 유박 추출물 및 분획물의 항산화 활성을 평가하기 위해 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS+), hydroxyl radical, superoxide anion (O2-) radical 소거능을 측정하였다. 동백 유박 추출물 및 분획물은 농도의존적으로 DPPH, ABTS+ 및 O2- radical 소거능을 증가시켜 항산화 활성을 나타내었다. 특히 동백 유박 BuOH 분획물은 다른 추출물 및 분획물에 비해 가장 높은 radical 소거능을 나타내었다. 동백 유박 BuOH 분획물의 총 폴리페놀 및 플라보노이드 함량은 각각 23.26 mg GAE/g 및 32.39 mg QE/g이었으며, 이는 다른 추출물 및 분획물보다 높은 수치임을 알 수 있었다. 동백 유박 BuOH 분획물 및 EtOAc 분획물의 cameliaside B 함량은 각각 102.37, 165.05 ㎍/g임을 확인하여 다른 추출물 및 분획물에 비해 높은 수치를 나타냄을 알 수 있었다. 따라서 동백 유박 추출 및 분획물 중에서 BuOH 분획물 및 EtOA c 분획물은 다른 추출 및 분획물에 비해 radical 소거능이 우수할 뿐 아니라 항산화 물질 함유량이 높아, 항산화 기능성 소재로 활용될 수 있을 것으로 사료된다.
Objectives: In order to investigate the relationship of Radix Trichosanthis components and the melanin synthesis, the author has analyzed the cell viability and tyrosinase activity, melanin content and morphologic changes in n-hexane, EtOAc, n-BuOH, and H2O fraction. Methods: At first, in order to determine the concentration of the Radix Trichosanthis component, the author investigated the viability of B16 melanoma cell. To measure the effects of Trichosanthes kirilowii extracts (n-BuOH, n-Hexane, EtOAc, H2O fractions) on the viability of A549 cells, A549 cells were treated with various concentrations (from 0.5 to $25{\;}\mu\textrm{g}/ml$) of components of Trichosanthes kirilowii. After 24hrs, the cell viability was measured by MTT assay. The EtOAc components of Trichosanthes kirilowii decreased the viability of A549 cells in a dose-dependent manner. H2O and n-BuOH components had no cell toxicity till $25{\;}\mu\textrm{g}/ml$, the n-hexane component showed minor cell toxicity at $25{\;}\mu\textrm{g}/ml$ and the EtOAc component cell toxicity was revealed at $5{\;}\mu\textrm{g}/ml$ concentration. Results: 1. The results of tyrosinase activity and the Radix Trichosanthis component; n-hexane and EtOAc components controlled it effectively; the n-BuOH components were less effective. 2. The results of melanin content analysis showed that the n-hexane and EtOAc components effectively inhibited, the n-BuOH fraction inhibited less, and H2O component didn't inhibit the terminal melanin formation. 3. In the n-BuOH and H2O component there were no changes, but in the n-hexane component the melanin content was effectively inhibited. 4. In the EtOAc fraction, although the melanin content was inhibited, the cell count was evidently suppressed, Of all of the Radix Trichosanthis components, the n-Hexane and EtOAc fractions inhibited the melanin synthesis best, but owing to its toxicity, the EtOAc components inhibited the cell count. Conclusion: The above results demonstrated that Radix Trichosanthis n-hexane fraction efficiently inhibited the tyrosinase activity and melanin synthesis.
Hizikia fusiformis을 80% EtOH 추출물을 용매의 극성에 따라 n-hexane, ethyl acetate, n-BuOH, Aqueous n-BuOH fraction으로 순차적으로 분리하였다. 분리된 4개의 분획물 중에 항산화 활성이 높은 n-BuOH 분획물을 reserve-phase column chromatography를 실시하여 분리된 3개의 BA, BB, BC 분획물에 대한 항산화 활성을 검토하였다. 가장 항산화능이 높은 BB 분획물은 모든 실험에서 농도의존적으로 활성이 증가하는데, 시료의 농도가 1.0 mg/ml일때 DPPH radical scavenging activity와 Reducing power activity는 $45{\pm}0.14%$, $1.34{\pm}0.23$로 가장 높게 나타난다. ${\beta}$-carotene-linoleic acid activity와 Hydrogen peroxide scavenging activity도 $76{\pm}0.12%$와 $82{\pm}0.06%$로 가장 높았으며, ABTS radical scavenging activity도 $65{\pm}0.17%$의 활성을 나타낸다. 이상의 연구 결과에서, 최종 분리된 BB분획물은 높은 항산화능을 가진 물질을 함유하고 있을 것으로 예상되며, 이는 앞으로 새로운 천연 기능성 식품으로서의 이용 가능성을 시사하고 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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