Two biopolymers, silk fibroin (SF) and chitosan, were conjugated by tyrosinase (EC 1.14.18.1), a polyphenolic oxidase, to improve their physicochemical properties, such as their thermal properties and morphological stabilities in organic solvents. The crosslinking between SF and chitosan took place mainly through Michael addition reactions. A main reaction between the amino groups in chitosan and o-quinone, the oxidation product of the tyrosyl residue in SF, was confirmed by UV spectroscopy. Measurements of viscosity and light scattering indicated that the crosslinked SF/chitosan conjugate was compact: it had a smaller particle size because of tight bonding forces between the SF and chitosan molecular chains. Thermal decomposition of SF/chitosan conjugates crosslinked by tyrosinase occurred at higher temperatures. The adhesiveness of the SF/chitosan conjugates decreased steadily as the crosslinking reaction progressed. We propose that this new crosslinking method be used for the preparation of silk fibroin/chitosan conjugates using tyrosinase. We expect that SF/chitosan conjugates crosslinked by tyrosinase can be used preferentially in biomedical applications because of its unique properties and non-toxicity.
Polymers have been developed and applied in many biomedical areas as well as engineering and industrial fields. The first essential to achieve successful development and applications is that properties of such polymer materials would be investigated. In many cases, such investigations are accomplished by observing polymeric behavior arising from the environmental changes such as pH, temperature, and ionic concentration. It has long been known that NMR is extremely sensitive to many biochemical and physical changes occurring in the polymer samples. In the present study we focus our study on NMR Microimaging, which is one of the important NMR applications, to characterize the swelling effect by observing the time dependent spatial variations of polymer specimens. For the samples three kinds of polyvinyl alcohol (PVA) specimens are prepared with different degrees of cross linking density. $^1H$ NMR microimages are acquired as a function of time to visualize the swelling behavior as well as volumetric changes occurring in the specimens. From the acquired time dependent images, the swelling process is exploited.
The present study describes medium-chain-length polyhydroxyalkanoates (mcl-PHAs) production by the Pseudomonas Gl01 strain isolated from mixed microbial communities utilized for PHAs synthesis. A two-step fed-batch fermentation was conducted with glucose and waste rapeseed oil as the main carbon source for obtaining cell growth and mcl-PHAs accumulation, respectively. The results show that the Pseudomonas Gl01 strain is capable of growing and accumulating mcl-PHAs using a waste oily carbon source. The biomass value reached 3.0 g/l of CDW with 20% of PHAs content within 48 h of cultivation. The polymer was purified from lyophilized cells and analyzed by gas chromatography (GC). The results revealed that the monomeric composition of the obtained polyesters depended on the available substrate. When glucose was used in the growth phase, 3-hydroxyundecanoate and 3-hydroxydodecanoate were found in the polymer composition, whereas in the PHAs-accumulating stage, the Pseudomonas Gl01 strain synthesized mcl-PHAs consisting mainly of 3-hydroxyoctanoate and 3-hydroxydecanoate. The transcriptional analysis using reverse-transcription real-time PCR reaction revealed that the phaC1 gene could be transcribed simultaneously to the phaZ gene.
High substrate costs decrease the profitability of polyhydroxyalkanoates (PHAs) production, and thus low-cost carbon substrates coming from agricultural and industrial residuals are tested for the production of these biopolymers. Among them, crude glycerol, formed as a by-product during biodiesel production, seems to be the most promising source of carbon. The object of this study was to characterize the mixed population responsible for the conversion of crude glycerol into PHAs by cultivation-dependent and -independent methods. Enrichment of the microbial community was monitored by applying the Ribosomal Intergenic Spacer Analysis (RISA), and the identification of community members was based on 16S rRNA gene sequencing of cultivable species. Molecular analysis revealed that mixed populations consisted of microorganisms affiliated with four bacterial lineages: ${\alpha}$, ${\gamma}$-Proteobacteria, Actinobacteria, and Bacteroides. Among these, three Pseudomonas strains and Rhodobacter sp. possessed genes coding for polyhydroxyalkanoates synthase. Comparative analysis revealed that most of the microorganisms detected by direct molecular analysis were obtained by the traditional culturing method.
Exopolysaccharide produced by the yeast Papiliotrema flavescens, isolated from wine grape berries of Champagne vineyard, was investigated for both chemical and functional characterization. SECMALLS and colorimetric assay analyses showed that the EPS is a high MW heteropolymer (2.37 × 106 g/mol) majorily consisting of mannose, glucose, xylose and glucuronic acid as monosaccharide constituents, with two substituents (sulphate and phosphate groups), and a minor protein moiety. Structural enchainment of these carbohydrates based on methylation, GC-MS and NMR analyses revealed a linear main backbone built up of α-(1 → 3)-D-mannopyranosyl residues on which are branched side chains consisting of a single β-D-glucopyranosyluronic acid residue and β-(1 → 2)-xylopyranoses (2-5 residues). Suggestion of some xylopyranose side chains containing a mannose residue at the nonreducing terminal end was also proposed. This is first report on EPSs from the grape P. flavescens yeast with such structural characteristics. Furthermore, investigations for valuating the application performance of these EPS in relation with their structural features were carried out in 8% alcohol experiment solutions. Very exceptional viscosifying and foaming properties were reported by comparison with commercial biopolymers such as Arabic, gellan and xanthan gums. The intrinsic properties of the natural biopolymer from this wild grape-associated P. flavescens yeast make it a potential candidate for use in various biotechnology applications.
생물고분자 생산 균주를 분리하여 동정한 결과, 분리균주는 Gram 음성의 간균으로 내생포자를 형성하지 않았으며, nitrate 환원과 catalase 반응에서 양성이고, oxidase 반응에서 음성인 통성 혐기성의 한 균주로 분류학상의 위치를 검토한 결과, Enterobacter sp.로 판단하였다 이 균주가 생성하는 생물고분자는 정색반응, CPC 침전, IR 분석 등에 의해 우론산을 함유한 산성의 다당인 것으로 추정되었다. TLC 및 GC에 의해 조사한 결과, mannose, galactose 및 galacturonic acid로 구성된 hetero 다당이었으며, 분자량은 약 3.7$\times$$10^{5}$이었다. 이다당의 수용액(0.5-2.0%, w/v)은 비뉴우톤 유체로 항복응력을 갖는 의가소성 유체로서 거동하였으며, 1.5% 농도 이상의 낮은 농도에서 겔 형성능을 나타내었다.다.
본 연구에서는 식품첨가물로 승인되어 있는 생물고분자 물질을 이용하여 신속팽윤성과 고흡수성을 갖는 하이드로젤을 제조하고 팽윤특성을 분석하였다. 하이드로젤을 제조하는 과정에서 기포발생제를 이용하여 기공을 형성시켜 기존 하이드로젤의 팽윤성 향상을 시도하였고 각 하이드로젤의 평형 팽윤도, 팽윤속도 및 세포독성을 비교하였다. Alginate hydrogel에서는 digital microscope 관찰을 통해 수백 ${\mu}m$ 크기의 열린 채널로 다공성 구조를 관찰하였으며 제조된 모든 하이드로젤들은 poly(acrylic acid)에 비해 높은 세포생존율을 보였다.
The diffusion effect of simulated gastric juices into the various alginate vessel containing each biopolymer such as 0.3% soluble starch, whey, corn starch, agar, locust bean gum, guar gum, gum arabic, pectin, gelatin and 0.15% xanthan gum was tested by measuring the change of pH in the vessel. The degree of viability of bifidobacteria entrapped in each bead containing biopolymers was corresponded with the degree of diffusion inhibition of hydrogen into the each vessel. Therefore, The determination of diffusion inhibition of simulated gastric juices into the various vessel by measuring the change of pH in the vessel may be effectively used as the simple method to select the optimal entrapment lattice for the improvement of bifidobacteria viability. Bifidobacteria entrapped in alginate bead containing 0.15% xanthan gum whose lattice showed the lowest hydrogen diffusion were more significantly tolerant against bile salts and hydrogen peroxide than untrapped bifidobacteria. It was also observed that the viability of bifidobacteria entrapped in bead was nto nearly changed in milk adjusted pH 4.5 with organic adids at $4^{\circ}C$ for 10 days. Therefore, use of alginate containing 0.15% xanthan gum as a cell matrix for entrapping bifidobacteria was expected to improve the viability of bididobacteria in fermented milk products and develop the high value-added products.
이 연구에서는 PacBio RS II 플랫폼을 사용하여 동해에서 분리된 해양 미생물 Pseudoalteromonas donghaensis $HJ51^T$의 전체 유전체 서열화를 수행하였다. 그 결과, 크기 3,646,857 bp, G + C 함량 41.8%인 염색체와 함께 크기 842,855 bp, G + C 함량 41.3% 및 크기 244,204 bp, G + C 함량 40.4%인 두 개의 플라스미드로 구성된 3개의 유전체 서열을 획득하였다. 이 유전체는 4,083개의 단백질 암호화 유전자와 127개의 RNA 유전자를 포함하고 있다. 다양한 생체 고분자 분해효소의 유전자원과 대장균과 유사한 세포외 단백질 분비 숙주로서의 개발에 이용될 수 있을 것으로 생각된다.
A highly viscous biopolymer from Bacillus coagulans CE-74 was purified and its rheological properties were studied The rheological properties of biopolymers produced by Bacillus coagulans CE-74 were studied at the temperature ranges with 20~8$0^{\circ}C$, at the concentration of 0.5~4.0%, at the pH ranges from 3 to 1 and at the shear rate fo 7.34~73.38 sec-1. The apparent viscosity of biopolymer was decreased with increasing shear rate, and thereby biopolymer showed pseudoplastic characteristics. Biopolymer solution showed a characteristic of non-Newtonian fluid properties. At the concentration of 1%, the consistency index and the flow behavior index were shown at 2.64 poise. sec11 and 0.8571, respectively. All dispersions were pseudoplastic fluids described accurately by Herschel-Bulkley model. The change of the biopolymer viscosity on pH showed the highest value at the pH 7.0 and it showed lower at acidic conditon that at alkaline condition comparatively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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