LRP15 is a novel gene cloned from lymphocytic cells, and its function is still unknown. Bioinformatic data showed that LRP15 might be regulated by DNA methylation and had an important role in DNA repair. In this study, we investigate whether the expression of LRP15 is regulated by DNA methylation, and whether overexpression of LRP15 increases efficiency of DNA repair of UV-induced DNA damage in HeLa cells. The results showed (1) the promoter of LRP15 was hypermethylated in HeLa cells, resulting a silence of its expression. Gene expression was restored by a demethylating agent, 5-aza-2'-deoxycytidine, but not by a histone deacetylase inhibitor, trichostatin A; (2) overexpression of LRP15 inhibited HeLa cell proliferation, and the numbers of cells in the G2/M phase of the cell cycle in cells transfected with LRP15 increased about 10% compared with controls; (3) cyclin B1 level was much lower in cells overexpressing LRP15 than in control cells; and (4) after exposure to UV radiation, the LRP15-positive cells showed shorter comet tails compared with the LRP15-negative cells. From these results we conclude that the expression of LRP15 is controlled by methylation in its promoter in HeLa cells, and LRP15 confers resistance to UV damage and accelerates the DNA repair rate.
자료의 수집과 저장이 수월해 지면서 대용량의 자료들이 존재하고 특히 개체 보다 변수가 더 많은 자료들이 생산되고 있다. 변수들이 증가하면서 다중공선성 같은 문제들이 발생하여 분석의 어려움에 봉착하게 된다. 이러한 문제를 해결하는 방법들이 많이 연구되었지만 다소간의 정보의 손실을 감내하고 연속형 자료를 범주형 자료로 변환하면 나름 유용한 분석이 가능하다고 본다. 대용량 범주형 자료의 대표적인 사례로 유전자 염기 서열 자료가 있고 이를 분석하기 위한 많은 기술들이 발달되어 있다. 본 논문에서는 국내 은행들이 생산해 낸 다양한 지표들을 분석하기 위해 유전자 염기 서열 분석 기법을 적용하여 분석하였고 나름 유용한 정보를 얻을 수 있음을 보였다. 본 논문에서 사용한 자료는 11개의 은행과 5개의 저축은행과 관련된 78개 재정 지표를 갖는 자료로서 심각한 다중 공선성이 존재하여 자료를 범주화하고 분석한 결과 몇 가지 유용한 결과를 도출하였다.
SSR은 병렬적으로 반복되는 작은 DNA서열을 말하며, 다양한 마커 기반 연구에 활용되고 있다. 국내의 주요 느타리품종인 '흑타리'와 '미소'의 유전체를 Pacbio를 이용하여 해독하였고 이 서열 정보에서 생물정보학을 이용하여 SSR을 분리하여 특성구명을 하였다. '흑타리'와 '미소' 유래 단핵균사의 유전체의 크기는 각각 40.8 Mbp와 40.3 Mbp로 밝혀졌고, 이는 사철느타리의 단핵균사 PC9과 PC15보다 컸으나, 큰느타리보다는 작았다. 총 949개와 968개의 SSR이 '흑타리'와 '미소'의 유전체 분석을 통하여 각각 검출되었다. 5개의 느타리류 유전체의 SSR 분포와 특징을 비교분석한 결과 흑타리와 미소의 SSR 갯수가 가장 많았으며, 이들의 반복서열의 분포는 다른 느타리류와 비슷한 경향을 보였다. 3-mers, 6-mers와 8-mers가 가장 발견빈도가 높은 패턴이었다.
Magnaporthe oryzae, the causal agent of the rice blast disease, poses a worldwide threat to stable rice production. The large-scale functional characterization of genes controlling the pathogenicity of M. oryzae is currently under way, but little is known about heat shock protein 40 (Hsp40) function in the rice blast fungus or any other filamentous plant pathogen. We identified 25 genes encoding putative Hsp40s in the genome of M. oryzae using a bioinformatic approach, which we designated M. oryzae heat shock protein forty (MHF 1-25). To elucidate the roles of these genes, we characterized the functions of MHF16 and MHF21, which encode type ill and type n Hsp40 proteins, respectively. MHF16 and MHF21 expression was not significantly induced by heat shock, but it was down-regulated by cold shock. Knockout mutants of these genes $({\Delta}$mhf16 and ${\Delta}$mhf21) were viable, but conidiation was severely reduced. Moreover, sectoring was observed in the ${\Delta}mhf16$ mutant when it was grown on oatmeal agar medium. Conidial germination, appressorium formation, and pathogenicity in rice were not significantly affected in the mutants. The defects in conidiation and colony morphology were fully complemented by reintroduction of wild type MHF16 and MHF21 alleles, respectively. These data indicate that MHF16 and MHF21 play important roles in conidiation in the rice blast fungus.
New proteomic techniques have been pioneered extensively in recent years, enabling the high-throughput and systematic analyses of cellular proteins in combination with bioinformatic tools. Furthermore, the development of such novel proteomic techniques facilitates the elucidation of the functions of proteins under stress or disease conditions, resulting in the discovery of biomarkers for responses to environmental stimuli. The ultimate objective of proteomics is targeted toward the entire proteome of life, subcellular localization biochemical activities, and the regulation thereof. Comprehensive analysis strategies of proteomics can be classified into three categories: (i) protein separation via 2-dimensional gel electrophoresis (2-DE) or liquid chromatography (LC), (ii) protein identification via either Edman sequencing or mass spectrometry (MS), and (iii) proteome quantitation. Currently, MS-based proteomics techniques have shifted from qualitative proteome analysis via 2-DE or 2D-LC coupled with off-line matrix assisted laser desorption ionization (MALDI) and on-line electrospray ionization (ESI) MS, respectively, toward quantitative proteome analysis. In vitro quantitative proteomic techniques include differential gel electrophoresis with fluorescence dyes. protein-labeling tagging with isotope-coded affinity tags, and peptide-labeling tagging with isobaric tags for relative and absolute quantitation. In addition, stable isotope-labeled amino acids can be in vivo labeled into live culture cells via metabolic incorporation. MS-based proteomics techniques extend to the detection of the phosphopeptide mapping of biologically crucial proteins, which ale associated with post-translational modification. These complementary proteomic techniques contribute to our current understanding of the manner in which life responds to differing environment.
Concerns over drug-resistant bacteria have stimulated interest in developing alternative methods to control bacterial infections. Endolysin, a phage-encoded enzyme that breaks down bacterial peptidoglycan at the terminal stage of the phage reproduction cycle, is reported to be effective for the control of bacterial pathogenic bacteria. Bioinformatic analysis of the SPN9CC bacteriophage genome revealed a gene that encodes an endolysin with a domain structure similar to those of the endolysins produced by the P1 and P22 coliphages. The SPN9CC endolysin was purified with a C-terminal oligo-histidine tag. The endolysin was relatively stable and active over a broad temperature range (from $24^{\circ}C$ to $65^{\circ}C$). It showed maximal activity at $50^{\circ}C$, and its optimum pH range was from pH 7.5 to 8.5. The SPN9CC endolysin showed antimicrobial activity against only gram-negative bacteria and functioned by cutting the glycosidic bond of peptidoglycan. Interestingly, the SPN9CC endolysin could lyse intact gram-negative bacteria in the absence of EDTA as an outer membrane permeabilizer. The exogenous lytic activity of the SPN9CC endolysin makes it a potential therapeutic agent against gram-negative bacteria.
Background: Fascin, an actin-bundling protein forming actin bundles including filopodia and stress fibers, is overexpressed in multiple human epithelial cancers including esophageal squamous cell carcinoma (ESCC). Previously we conducted a microarray experiment to analyze fascin knockdown by RNAi in ESCC. Method: In this study, the differentially expressed genes from mRNA expression profilomg of fascin knockdown were analyzed by multiple bioinformatics methods for a comprehensive understanding of the role of fascin. Results: Gene Ontology enrichment found terms associated with cytoskeleton organization, including cell adhesion, actin filament binding and actin cytoskeleton, which might be related to fascin function. Except GO categories, the differentially expressed genes were annotated by 45 functional categories from the Functional Annotation Chart of DAVID. Subpathway analysis showed thirty-nine pathways were disturbed by the differentially expressed genes, providing more detailed information than traditional pathway enrichment analysis. Two subpathways derivated from regulation of the actin cytoskeleton were shown. Promoter analysis results indicated distinguishing sequence patterns and transcription factors in response to the co-expression of downregulated or upregulated differentially expressed genes. MNB1A, c-ETS, GATA2 and Prrx2 potentially regulate the transcription of the downregulated gene set, while Arnt-Ahr, ZNF42, Ubx and TCF11-MafG might co-regulate the upregulated genes. Conclusions: This multiple bioinformatic analysis helps provide a comprehensive understanding of the roles of fascin after its knockdown in ESCC.
Zebrafish (Danio rerio)의 microsomal epoxide hydrolase(mEH)로 추정되는 유전자를 클로닝하고 그 특성을 연구하였다. D. rerio의 mEH 추정단백질은 포유동물의 mEH 및 세균의 EH들과 아미노산서열 상동성을 보였으므로 결정분자구조(1qo7 및 1ehy)를 template로 하여 homology modelling을 행하였다. 클로된 단백질은 $Asp^{233}$, $Glu^{413}$ 및 $His^{440}$으로 구성된 catalytic triad와 2개의 tyrosine 잔기 및 oxyanion hole이 보존되어 있었다. 생물정보학적인 분석 및 EH 활성시험은 추정단백질이 D. rerio의 mEH라는 것을 보여주었다. Racemic styrene oxide를 기질로 하여 활성시험을 행한 결과, 재조합 D. rerio mEH는 (R)-styrene oxide을 입체선택적으로 가수분해하였으며 45분 반응시간에 99%ee의 광학순도를 가진 (S)-styrene oxide를 33.5% 얻을 수 있었다.
이 논문은 효율적인 차량 이동 궤적 관리를 지원하는 e-logistics 시스템을 제안한다. 최근의 무선통신의 발전은 물류 차량의 추적, 휴대폰 사용자 위치 서비스, 위치기반 상거래를 포함한 위치기반서비스들이 등장하게 하였다. 물류 시스템은 물류 센터에서 차량과 배송품의 위치를 계속적으로 파악해야 하므로 차량 추적을 필수적으로 수반하게 된다. 좀 더 나아가서, 계속적으로 이동하는 차량과 배송품의 위치 궤적을 저장하고 관리하는 것은 효율적인 물류 계획과 배송을 지원하기 위해 필수 불가결한 요소이다. 제안된 시스템은 실세계 모바일 환경에서 물류 배송 정보의 효과적인 관리뿐만 아니라, 기존의 공간 데이터베이스가 갖는 공간객체 관리 기능을 포함한다. 또한 효과적인 물류 이동 경로 관리 및 검색을 수행하기 위하여 기존의 TB 트리의 데이터 갱신 성능을 개선하고, 다중버전 기법을 도입한 색인을 사용하였다. 제안된 시스템은 소포관제와 유사한 차량 추적 시스템, 위치기반서비스 등과 같이 실시간 모바일 환경에서 연속적으로 위치를 변경하는 이동객체 관련 분야에 적용 가능하다.
벼의 생산에 있어 가장 큰 문제 요인 중 하나인 벼도열병의 발생 원인균인 벼도열병균은 다양한 기작에 의해 방제 약제에 대한 내성을 가지는 것으로 알려져 있다. 막 운반단백질인 ABC transporter의 경우 환경으로부터의 다양한 독성 물질들을 배출하는 것으로 알려져 있다. 이미 알려진 벼도열병균의 게놈 서열로부터 생물정보학적 분석을 통하여 ABC transporter 단백질의 도메인 특성을 보이는 33개의 유전자군 서열을 예측하였다. 이중 3개의 경우는 이미 알려진 유전자로 판명되었다. Southern Hybridization 분석에 적용한 20개의 유전자들이 모두 게놈상에 단일 copy로 존재함을 확인하였다. 새로 예측된 30개의 유전자중 11개는 RT-PCR을 통하여 전사단계에서의 유전자 발현이 확인되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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