Park, Seong-Hyun;Yu, Kyung-Lee;Jung, Yu-Mi;Lee, Seong-Deok;Kim, Min-Jeong;You, Ji-Chang
BMB Reports
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v.51
no.7
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pp.338-343
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2018
Transcription termination factor-1 (TTF-I) is an RNA polymerase 1-mediated transcription terminator and consisting of a C-terminal DNA-binding domain, central domain, and N-terminal regulatory domain. This protein binds to a so-called 'Sal box' composed of an 11-base pair motif. The interaction of TTF-I with the 'Sal box' is important for many cellular events, including efficient termination of RNA polymerase-1 activity involved in pre-rRNA synthesis and formation of a chromatin loop. To further understand the role of TTF-I in human immunodeficiency virus (HIV)-I virus production, we generated various TTF-I mutant forms. Through a series of studies of the over-expression of TTF-I and its derivatives along with co-transfection with either proviral DNA or HIV-I long terminal repeat (LTR)-driven reporter vectors, we determined that wild-type TTF-I downregulates HIV-I LTR activity and virus production, while the TTF-I Myb-like domain alone upregulated virus production, suggesting that wild-type TTF-I inhibits virus production and trans-activation of the LTR sequence; the Myb-like domain of TTF-I increased virus production and trans-activated LTR activity.
Recently, consumers' evaluation and purchase of online design has been increasing due to the popularization of designing through personal computers, but there has not been enough studies on consumers' brain wave responses depending on the change of PC monitor's color. Therefore, this study investigated how brain waves changed when different background colors with gray patterns were presented through PC monitors. Six background colors with same tone of slightly low saturation were selected, including ivory, yellow, pink, green, blue and pure white as a base color. The brightness and characteristics of color used were analyzed using the luminance meter and color scales. Brain wave was measured by EEG measurement equipment. Brain wave measurement was carried out with 9 subjects at 6 points: F3, F4, T3, T4, O1, and O2. Stimuli were shown for 15 seconds each and black screens were displayed for 15 seconds between each stimulus. As results, the brain waves at O1 responded sensitively by different background colors, followed by F4 and T4. Brain index such as 'RT', 'RA', 'RG', 'RSA', and 'RAHB' showed significant differences depending on the background color at O1, whereas 'RST' differed at F4. Yellow and blue backgrounds pair was the only stimuli that showed significant differences in six brain indices mentioned. Yellow background had higher value of 'RG' at O1 and higher 'RST' at F4, indicating yellow background enhanced concentration. Blue background activated 'RT', 'RA', 'RSA', 'RAHB' at O1, meaning blue background induced calm and stable state.
To examine the microenvironmental effect of DNA on the photosensitized reaction, the electron-donor-connecting porphyrin, meso-(9-phenanthryl)-tris(N-methyl-p-pyridinio) porphyrin (Phen-TMPyP), was synthesized. Phen-TMPyP can bind to oligonucleotides with two binding modes, depending on the DNA concentration. The fluorescence lifetime measurement of Phen-TMPyP shows a shorter component than that of the reference porphyrin without the phenanthryl moiety. However, the observed value is much longer than those of previously reported similar types of electron-donor-connecting porphyrins, suggesting that electron-transfer quenching by the phenanthryl moiety is not sufficient. The fluorescence quantum yield of Phen-TMPyP ($5{\mu}M$) decreased with an increase in DNA concentration of up to $5{\mu}M$ base pair (bp), possibly due to self-quenching through an aggregation along the DNA strand, increased with an increase in DNA concentration of more than $5{\mu}M$ bp and reached a plateau. The fluorescence quantum yield of Phen-TMPyP with a sufficient concentration of DNA was larger than that of the reference porphyrin. The singlet oxygen ($^1O_2$) generating activity of Phen-TMPyP was confirmed by the near-infrared emission spectrum measurement. The quantum yield of $^1O_2$ generation was decreased by a relatively small concentration of DNA, possibly due to the aggregation of Phen-TMPyP, and recovered with a sufficient concentration of DNA. The recovered quantum yield was rather smaller than that without DNA, indicating the quenching of $^1O_2$ by DNA. These results show that a DNA strand can stabilize the photoexcited state of a photosensitizer and, in a certain case, suppresses the $^1O_2$ generation.
The HIS5 gene of Saccharomyces cerevisiae host was encoded histidinol phosphate aminotransferase(E.C.: 2.6. 1.9). The HIS5 gene of Saccharomyces cerevisiae was cloned on plasmid pSH 530. This gene mighted be transcripted from a promoter of yeast gene both in E. coli and yeast hosts. We have determined the nucleotide sequence of the yeast HIS5 gene and its 5' and 3' flanking sequences. There are no large differences between the relative levels of HIS5 mRNA molecules with different 5' termini in represent and derepressed cell. In the DNA sequence upstream from the 5' termini of HIS5 mRNA we have found live closely related copies of a 9 base pair sequence. The sequence is also repeated in the 5' noncoding regions of HIS1, HIS3, HIS4, HIS5 and TRP5. Closely related sequence are not found flanking repeat sequence plays a role in the regulation of amino acid biosynthetic genes subject to the general amino acid control.
The chromosomal DNA fragment from Phaffia rhodozyma CBS 6938 which is able to autonomously replicate in the yeast Saccharomyces cerevisiae was cloned on an integrative URA3 plasmid. Its minimal fragment exhibiting autonomously replicating activiy in the S. cerevisiae gave a higher frequency transformation efficiency than that found for centromere-based plasmid, and enabled extrachromosoma1ly stable transmission of the plasmids in one copy per yeast cell under non-selective culture condition. The 836-bp DNA element lacked an ORF and did not contain any acceptable match to an ARS core consensus. Sequence analysis, however, displayed a cluster of three hairpin-Ioop-sequences with individual $\triangle {G_{25}}^{\circ}C$ free energy value of -10.0, -17.5, and -17.0 kcal. $mor^{-l}$as well as a 9-bp sequence with two base pair mismatches to the S. cerevisiae/E. coli gyrase-binding site. This 836-bp sequence also included one 7-bp sequence analogous to the core consensus of centromeric DNA element III (CDEIII) of S. cerevisiae, but CDEIII-like 7 bp sequence alone did not give a replicative function in this yeast.
Oceanobacillus kimchii is a member of the genus Oceanobacillus within the family Bacillaceae. Species of the Oceanobacillus possess moderate haloalkaliphilic features and originate from various alkali or salty environments. The haloalkaliphilic characteristics of Oceanobacillus advocate they may have possible uses in biotechnological and industrial applications, such as alkaline enzyme production and biodegradation. This study presents the draft genome sequence of O. kimchii X50T and its annotation. Furthermore, comparative genomic analysis of O. kimchii X50T was performed with two previously reported Oceanobacillus genome sequences. The 3,822,411 base-pair genome contains 3,792 protein-coding genes and 80 RNA genes with an average G+C content of 35.18 mol%. The strain carried 67 and 13 predicted genes annotated with transport system and osmoregulation, respectively, which support the tolerance phenotype of the strain in high-alkali and high-salt environments.
Genomic analysis of Thermococcus sp. NA1 revealed the presence of a 3,927-base-pair (bp) family B-type DNA polymerase gene, TNA1_pol. TNA1_pol, without its intein, was overexpressed in Escherichia coli, purified using metal affinity chromatography, and characterized. TNA1_pol activity was optimal at pH 7.5 and $75^{\circ}C$. TNA1_pol was highly thermostable, with a half-life of 3.5h at $100^{\circ}C$ and 12.5h at $95^{\circ}C$. Polymerase chain reaction parameters of TNA1_pol such as error-rate, processivity, and extension rate were measured in comparison with rTaq, Pfu, and KOD DNA polymerases. TNA1_pol averaged one incorrect bp every 4.45 kilobases (kb), and had a processivity of 150 nucleotides (nt) and an extension rate of 60 bases/s. Thus, TNA1_pol has a much faster elongation rate than Pfu DNA polymerase with 7-fold higher fidelity than that of rTaq.
DNA structure studies attract many interests in pharmaceutical, biochemical and medical disciplines. Among them, base pairs play a vital role in biological information transfer. Therefore, they need to be analyzed in various ways and the pair of guaninine and cytosine is the present analytical object. Separation of guanine and cytosine was researched by Aspen chromatography simulator and HPLC(High Performance Liquid Chromatography) experiments. Aspen chromatography simulation resulted in various chromatograms with changes of sample concentration, eluent flow rate and number of plate. The resolutions and yields of guanine and cytosine were calculated to obtain a best separation condition. $C_{18}$ HPLC column and water/methanol/acetic acid mixture(90/10/0.2) were used for separation of guanine and cytosine. HPLC parameters(resolution and number of theoretical plate) were calculated under different flow rates and sample concentrations. Aspen chromatography simulation and HPLC experimental results were compared with fair agreement.
In this paper, it is developed simulator system of 3 D.O.F parallel robot for educate of expertness. This simulator system is composed of three parts ? 3 D.O.F parallel robot, controller (hardware) and software. First, basic structure of the robot is 3 active rotary actuator that small geared step motor with fixed base. An input-link is connected to this actuator, and this input-link can connect two ball joints. Thus, two couplers can be connected to the input-link as a pair. An end-plate, which is jointed by a ball joint, can be connected to the opposite side of the coupler. A sub-link is produced and installed to the internal spring, and then this sub-link is connected to the upper and bottom side of the coupler in order to prevent a certain bending or deformation of the two couplers. The robot has the maximum diameter of 230 mm, 10 kg of weight (include the table), and maximum height of 300 mm. Hardware for control of the robot is composed of computer, micro controller, pulse generator, and motor driver. The PC used in the controller sends commands to the controller, and transform signals input by the user to the coordinate value of the robot by substituting it into equations of kinematics and inverse kinematics. A controller transfer the coordinate value calculated in the PC to a pulse generator by transforming it into signals. A pulse generator analyzes commands, which include the information received from the micro controller. A motor driver transfer the pulse received from the pulse generator to a step motor, and protects against the over-load of the motor Finally, software is a learning purposed control program, which presents the principle of a robot operation and actual implementation. The benefit of this program is that easy for a novice to use. Developed robot simulator system can be practically applied to understand the principle of parallel mechanism, motors, sensor, and various other parts.
Background: Missense and frame-shift mutations within the dimer forming domain of the caspase 8 gene have been identified in several cancers. However, the genetic status of this region in precancerous lesions, like oral submucous fibrosis (OSMF), and well differentiated oral squamous cell carcinomas (OSCCs) in patients from southern region of India is not known, and hence the present study was designed to address this issue. Materials and Methods: Genomic DNA isolated from biopsy tissues of thirty one oral submucous fibrosis and twenty five OSCC samples were subjected to PCR amplification with intronic primers flanking exon 7 of the caspase 8 gene. The PCR amplicons were subsequently subjected to direct sequencing to elucidate the status of mutation. Results: Sequence analysis identified a frame-shift and a novel missense mutation in two out of twenty five OSCC samples. The frame-shift mutation was due to a two base pair deletion (c.1225_1226delTG), while the missense mutation was due to substitution of wild type cysteine residue with phenylalanine at codon 426 (C426F). The missense mutation, however, was found to be heterozygous as the wild type C426C codon was also present. None of the OSMF samples carried mutations. Conclusions: The identification of mutations in OSCC lesions but not OSMF suggests that dimer forming domain mutations in caspase 8 may be limited to malignant lesions. The absence of mutations in OSMF also suggests that the samples analyzed in the present study may not have acquired transforming potential. To the best of our knowledge this is the first study to have explored and identified frame-shift and novel missense mutations in OSCC tissue samples.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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