Kim, Young Hoe;Park, So Hyeon;Kim, Gyeong Hee;Jeong, Byoung Ryong
Journal of Plant Biotechnology
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제6권1호
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pp.51-54
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2004
This study was conducted to examine differences in shoot regeneration among chrysanthemum cultivars. Leaf explants of chrysanthemum cultivars 'Sulhwa', 'Puma', 'Geummokseo' and 'Sulpoong' were used. Explants cultured on the medium for 2 weeks formed calli at the cut surfaces. Shoots regenerated on MS basal medium supplemented with various concentration combinations of NAA and BAP. Explants were cultured under cool-white fluorescent lamps with a light intensity of $40\mu{Mm}^{-2}$.$s^{-1}$ for 16 $hday^{-1}$, at $25^{\circ}c$ and 70-80% relative humidity. 'Geummokseo' and 'Sulpoong' were the most responsive cultivars in shoot regeneration. Most effective medium for 'Sulhwa' and 'Puma' was MS basal medium supplemented with 10.0 $\mu{M}$ NAA and 5.0 $\mu{M}$ BAP and for 'Geummokseo' MS supplemented with 10.0$\mu{M}$ NAA and 20.0$\mu{M}$ BAP. Regeneration of multiple shoots was observed on MS basal medium supplemented with 1.0$\mu{M}$ or 10.0 $\mu{M}$ NAA and 5.0$\mu{M}$ BAP. High frequency regeneration of adventitious shoots from leaf explants and efficient induction of root from these regenerated shoots were obtained.
Hwang, Ok-Jin;Kim, Yu-Jeong;Sung, Nak-Sul;Ahn, Jun-Cheul;Kim, Sik-Eung;Hwang, Baik
한국약용작물학회지
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제10권4호
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pp.243-248
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2002
The effects of basal media, carbon, nitrogen, phosphate and some major macro elements on growth and shikonin production in Lithospermum erythrorhizon hairy root culture were studied. Among examined media, growth of hairy root cultured in B5 liquid medium was rapid, whereas shikonin production was high in MS liquid medium. Under B5 basal medium, sucrose concentration for optimal growth and shikonin production was 9% and 4% respectively. The growth and shikonin production on pH changes in B5 medium resulted little effect in pH 5.8 to pH 8.8 ranges, whereas growth was decreased dramatically in both above 8.8 and under 5.8. Nitrogen source and concentration effected on the growth and shikonin production. The highest growth rate was in B5 medium (50 mM $KNO_3$ and 1 mM $NaH_2PO_4)$, whereas the highest shikonin production was in the condition supplemented with 5 mM $KNO_3$ and 10 mM $NaH_2PO_4$.
This study was carried out to enhance the production of sisomicin by Micromonospora inyoensis ATCC 276000. The effect of various sugars and organic acids as the supplements to a basal mineral medium was tested for the sisomicin production by fully grown mycelium. Among the substances tested, acetate and citrate greatly increased the production of sisomicin at the sixth day of culture. Especially, in the basal mineral medium containing 0.1M sodium acetate, sisomicin production was 6.7 times more than that in the same medium with glucose. When 0.1M sodium acetate was added in the fermentation medium initially, the cell growth was inhibited by sodium acetate, although specific productivity was higher than that in the same medium without sodium acetate. On the contrary, when sodium acetate was added to the culture after three days, the sisomicin production and specific productivity were 1.6 times higher than those in the same medium without sodium acetate. The results suggested that sodium acetate was a stimulating substance of sisomicin production by M. inyoensis.
An efficient transformation system for high-throughput functional genomic studies of kiwifruit has been developed to overcome the problem of necrosis in Actinidia arguta explants. The system uses Agrobacterium tumefaciens strain EHA105 harbouring the binary vector pART27-10 to inoculate leaf strips. The vector contains neomycin phosphotransferase (nptII) and ${\beta}$-glucuronidase (GUS) (uidA) genes. A range of light intensities and different strengths of Murashige and Skoog (MS) basal salt media was used to overcome the problem of browning and/or necrosis of explants and calli. Callus browning was significantly reduced, resulting in regenerated adventitious shoots when the MS basal salt concentration in the culture medium was reduced to half-strength at low light intensity ($3.4\;{\mu}mol\;m^{-2}\;s^{-1}$) conditions. Inoculated leaf strips produced putative transformed shoots of Actinidia arguta on half-MS basal salt medium supplemented with 3.0 $mg\;l^{-1}$ zeatin, 0.5 $mg\;l^{-1}$ 6-benzyladenine, 0.05 $mg\;l^{-1}$ naphthalene acetic acid, 150 $mg\;l^{-1}$ kanamycin and 300 $mg\;l^{-1}$$Timentin^{(R)}$. All regenerated plantlets were deemed putativ transgenic by histochemical GUS assay and polymerase chain-reaction analysis.
The optimized in vitro culture system was investigated for improvement of regeneration efficiencies by observing the responses of scutella-derived callus of Korean rice (Oryza sativa L.). Large variations of callus induction (43.9-93.9%) and shoot regeneration (0-88.7%) were observed among the rice cultivars depending on medium. However, shoot regeneration was significantly improved by selected utilization of basal medium, growth regulators, and carbon sources. N6 basal medium was more efficient for embryogenic callus induction than MS or LS basal medium, while MS was superior to N6 for shoot regeneration. The calli of highly regenerative cultivars grew faster and showed higher rates of green tissue formation (GT) and shoot regeneration (SR) and lower rate of callus browning (CB) than those of recalcitrant cultivars. Although a higher level of kinetin stimulated the GT and SR in highly regenerative cultivars, $10\textrm{mgL}^{-1}$ kinetin generally suppressed the GT and SR, while CB was accelerated compared to $2\textrm{mgL}^{-1}$ kinetin. Additional benefits of sorbitol combined with maltose (or sucrose) under $5\textrm{mgL}^{-1}$ kinetin were certainly confirmed on regeneration efficiencies compared to sucrose alone as carbon source and osmotic regulator. This combination showed high rate of GT and SR with multiple shoots while low rate of CB. With MSRK5SM-Pr medium ($5\textrm{mgL}^{-1}$ kinetin, 3% sorbitol, 2% maltose, $500\textrm{mgL}^{-1}$ proline), the regeneration efficiencies of total 17 out of 24 cultivars were practically improved 160% on average compared to MSRK2S ($2\textrm{mgL}^{-1}$ kinetin, 3% sucrose) control medium. Especially, the medium was most effective to the cultivars showing a medium level of regenerability such as Daesanbyeo and Dongjinbyeo and Suwon477, enhancing efficiencies more than 300-600% compared to MSRK2S medium.
Park, Ki Moon;Shin, Hyung Tai;Kang, Kook Hee;Lee, Jae Heung
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제18권1호
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pp.61-65
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2005
The objective of this work was to investigate the nutritional requirements for the growth of Actinomyces sp. 9RCC5 isolated from the rumen of a native goat in Korea. The growth of strain 9RCC5 on the basal medium or the medium minus certain ingredients from the basal medium demonstrated that strain 9RCC5 showed absolute requirement of vitamin B complex mixture, while hemin and volatile fatty acids (VFA) were stimulatory to growth to some extent. The 9RCC5 strain grew well with casein hydrolysate as the sole added nitrogen source. However, neither a complex of 18 amino acids nor ammonium sulfate effectively replaced casein hydrolysate. Vitamins such as riboflavin and pantothenate were essential for growth, while thiamin and biotin were stimulatory. With regard to VFA, the growth was stimulated by acetic acid but inhibited by valeric acid. Relatively large quantities of $Na^+$, $K^+$ and $Ca^{2+}$ were absolutely required for growth. Supplementation of clarified rumen fluid to the basal medium in a range of 0-10% (vol/vol) resulted in an increased rate of growth as well as an increased extent of growth.
밀토니아의 기내 대량생산을 위해 PLB의 유도와 증식을 위한 적정 배지 및 배양방법을 찾고자 본 실험을 수행하였다. 적정 배지는 MS 기본배지가 Hyponex 또는 VW배지보다 밀토니아의 PLB 유도가 우수하였다. PLB 증식 및 신초분화는 Hyponex 고체배지(Hyponex +바나나 20 g/L + sucrose $20g{\cdot}L^{-1}$, pH 5.2)가 MS 배지에 비해 더욱 효과적이었다. PLB로부터 신초분화에는 sucrose를 $10{\sim}20g{\cdot}L^{-1}$ 첨가하는 것이 효과적이었으나 30 g 이상의 농도에서는 유도된 신초수가 크게 감소하였다.
줄기기저부절편조직을 이용한 호접란 조직배양묘 생산 체계를 확립하기 위하여 원괴체 유도와 원괴체 증식의 조건을 구명하고자 하였다. 치상조직별 원괴체 유도 성공률을 비교한 결과 줄기기저부절편조직에서 약 45%의 높은 성공률을 나타내었고 다음은 화경액아 배양으로 약 30% 정도의 성공률을 나타낸 반면 근단, 화경절간절편, 화경엽, 성숙엽의 경우에는 성공률이 1% 미만으로 매우 낮았다. 품종별 원괴체의 유도능력에서의 차이를 알아보기 위하여 11개 품종에서 줄기기저부 절편배양을 한 결과 백색계 와 핑크계품종 모두에서 30%이상의 높은 원괴체 성공률을 나타내었다. 줄기기저부배양에서 줄기기저부를 절단하지 않고 천체조직을 치상하였을 경우 거대 원괴체가 유도되었는데 이 거대 원괴체는 진한 녹색으로 보통 원괴체의 3∼5배 정도 이상 큰 것으로 나타났다. 이 거대 원괴체를 증식하기 위해 절단하여 증식배지에 치상하였으나 새로 나온 원괴체는 정상적인 크기의 PLB로 유도되었다. 줄기저부배양에서 얻어낸 원괴체들은 증식과정을 거쳐 정상적인 조직배양묘를 형성하였다 그러므로 이 방법은 호접란 클론묘생산에 쓰일 수 있는 효율적이고 실용적인 방법의 하나라고 판단되었다. 그리고 줄기기저부 절편배양을 이용하여 원괴체를 유도 증식하고 플라스크묘를 만든 뒤 다시 그 묘의 줄기기저부절편을 이용하여 원괴체를 유도 증식하고 플라스크묘를 만들어내는 시스템에 응용함으로써 무한수의 조직배양묘를 연속적으로 생산할 수 있다는 체계가 제시되었다.
Aureobasidium pullulans에 의한 whey배지에서 플루란의 생산에 대한 연구가 수행되었다. Whey배지에서 풀루란의 발효생산에 대한 실험결과, 최종균체농도는 sucrose 기본배지에서와 동일하였으나 풀루란의 생산은 5g/$\ell$로 저조하였다. Whey배지에서 풀루란 생산을 향산시키이 위하여 lactose와 galactose 기본배지에서 적응배양을 시도하였다. 적응배양을 시도하지 않은 경우, lactose를 탄소원으로 한 배지에서 3.4g/$\ell$, galactose를 탄소원으로 한 배지에서 2.5g/$\ell$의 풀루란 생산을 보였으나 적응배양방법을 이용하여 lactose로부터 10~12g/$\ell$, galacrose 기본배지에서 lactose에 적응배양된 균은 13.5g/l의 풀루란을 생산하였고 galactose에 적응배양된 균은 18.6g/l를 생산하였다. Whey배지에 적응배양된 균을 접종한 결과 초기 pH3.0일때 풀루란 생산이 최대값을 보였다.
The study was conducted to determine the optimal basal media and the concentration of plant growth regulator for germination of seeds and growth of plantlet from Dendrobium monile. The results obtained were summarized as follows. Germination was similar in light and dark condition, but the growth of plantlet after germination was better under dark than under light condition in several media. Germination was best in Hyponex and Kyoto solution medium among the 9 media tested. The number of roots/shoot was most in the Hyponex medium containing 0,1ppm NAA and 1.Oppm BA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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