Differences in DNA banding patterns, obtained by ribosomal intergenic spacer analysis (RISA), and nitrification were followed in a moving-bed biofilm reactor (MBBR) receiving municipal landfill leachate. Complete nitrification (>99%) to nitrate was obtained in the two-stage MBBR system with an ammonium load of 1.09 g N-$NH_4/m^2{\cdot}d$. Increasing the ammonium load to 2.03 g N-$NH_4/m^2{\cdot}d$or more caused a decline in process efficiency to 70-86%. Moreover, at the highest ammonium load (3.76 g N-$NH_4/m^2{\cdot}d$), nitrite was the predominant product of nitrification. Community succession was evident in both compartments in response to changes in ammonium load. Nonmetric multidimensional scaling (NMDS) supported by similarity analysis (ANOSIM) showed that microbial biofilm communities differed between compartments. The microbial biofilm was composed mainly of ammonia-oxidizing bacteria (AOB), with Nitrosomonas europeae and N. eutropha being most abundant. These results suggest that high ammonium concentrations suit particular AOB strains.
Polyphenon 60 refers to the mixture of catechins present in green tea. The aim of this study was to investigate the antimicrobial activities of polyphenon 60 against 4 strains of Streptococcus mutans and 2 strains of Streptococcus sorbrinus, which are the major causative bacteria of dental caries. The minimum bactericidal concentration (MBC) values of polyphenon 60 for S. mutans and S. sobrinus were determined and the effect of biofilm formation inhibition of that was evaluated. The MBC value of polyphenon 60 against the bacterial strains was 2.5 mg/ml except for one particular strain, S. mutans KCOM 1128 for which the value was 1.25 mg/ml. The results of biofilm formation inhibition assay revealed that polyphenon 60 inhibited biofilm formation more than 90% at a concentration of 2.5 mg/ml. It was apparent that polyphenon exhibited biofilm formation inhibition activity along with bactericidal effect against S. mutans and S. sobrinus. Therefore, it is proposed that polyphenon 60 as one of the components of bactericidal agents could be useful in developing oral hygiene products, toothpaste or gargling solution.
Epifluorescence microscopy with image analysis was evaluated as a biofilm quantification method (i.e., quantification of surface area colonized by biofilms), in comparison with crystal violet (CV) staining. We performed different experiments to generate multispecies biofilms with natural and artificial bacterial assemblages. First, four species were inoculated daily in 16 different sequences to form biofilms (surface colonization, 0.1%-56.6%). Second, a 9-species assemblage was allowed to form biofilms under 10 acylase treatment episodes (33.8%-55.6%). The two methods comparably measured the quantitative variation in biofilms, exhibiting a strong positive relationship (R2 ≥ 0.7). Moreover, the two methods exhibited similar levels of variation coefficients. Finally, six synthetic and two natural consortia were allowed to form biofilms for 14 days, and their temporal dynamics were monitored. The two methods were comparable in quantifying four biofilms colonizing ≥18.7% (R2 ≥ 0.64), but not for the other biofilms colonizing ≤ 3.7% (R2 ≤ 0.25). In addition, the two methods exhibited comparable coefficients of variation in the four biofilms. Microscopy and CV staining comparably measured the quantitative variation of biofilms, exhibiting a strongly positive relationship, although microscopy cannot appropriately quantify the biofilms below the threshold colonization. Microscopy with image analysis is a promising approach for easily and rapidly estimating absolute quantity of multispecies biofilms.
Importance: Staphylococcus aureus and Escherichia coli contribute to global health challenges by forming biofilms, a key virulence element implicated in the pathogenesis of several infections. Objective: The study examined the efficacy of various generations of cephalosporins against biofilms developed by pathogenic S. aureus and E. coli. Methods: The development of biofilms by both bacteria was assessed using petri-plate and microplate methods. Biofilm hydrolysis and inhibition were tested using first to fourth generations of cephalosporins, and the effects were analyzed by crystal violet staining and phase contrast microscopy. Results: Both bacterial strains exhibited well-developed biofilms in petri-plate and microplate assays. Cefradine (first generation) showed 76.78% hydrolysis of S. aureus biofilm, while significant hydrolysis (59.86%) of E. coli biofilm was observed by cefipime (fourth generation). Similarly, cefuroxime, cefadroxil, cefepime, and cefradine caused 78.8%, 71.63%, 70.63%, and 70.51% inhibition of the S. aureus biofilms, respectively. In the case of E. coli, maximum biofilm inhibition (66.47%) was again shown by cefepime. All generations of cephalosporins were more effective against S. aureus than E. coli, which was confirmed by phase contrast microscopy. Conclusions and Relevance: Cephalosporins exhibit dual capabilities of hydrolyzing and inhibiting S. aureus and E. coli biofilms. First-generation cephalosporins exhibited the highest inhibitory activity against S. aureus, while the third and fourth generations significantly inhibited E. coli biofilms. This study highlights the importance of tailored antibiotic strategies based on the biofilm characteristics of specific bacterial strains.
Park, Jong Hew;Kim, Yong-Gun;Um, Heung-Sik;Lee, Si Young;Lee, Jae-Kwan;Chang, Beom-Seok
Journal of Dental Rehabilitation and Applied Science
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v.35
no.3
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pp.160-169
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2019
Purpose: The purpose of this study was to evaluate the antimicrobial effects of a toothbrush with light-emitting diodes (LEDs) on periodontitis-associated dental biofilm attached to a zirconia surface by static and dynamic methods. Materials and Methods: Zirconia disks (12 mm diameter, 2.5 mm thickness) were inserted into a 24-well plate (static method) or inside a Center for Disease Control and Prevention (CDC) biofilm reactor (dynamic method) to form dental biofilms using Streptococcus gordonii and Fusobacterium nucleatum. The disks with biofilm were subdivided into five treatment groups-control, commercial photodynamic therapy (PDT), toothbrush alone (B), brush with LED (BL), and brush with LED+erythrosine (BLE). After treatment, the disks were agitated to detach the bacteria, and the resulting solutions were spread directly on selective agar. The number of viable bacteria and percentage of bacterial reduction were determined from colony counts. Scanning electron microscopy (SEM) was performed to visualize alterations in bacterial morphology. Results: No significant difference in biofilm formation was observed between dynamic and static methods. A significant difference was observed in the number of viable bacteria between the control and all experimental groups (P < 0.05). The percentage of bacterial reduction in the BLE group was significantly higher than in the other treated groups (P < 0.05). SEM revealed damaged bacterial cell walls in the PDT, BL, and BLE groups, but intact cell walls in the control and B groups. Conclusion: The findings suggest that an LED toothbrush with erythrosine is more effective than other treatments in reducing the viability of periodontitis-associated bacteria attached to zirconia in vitro.
The biofilms on pipe walls in water distribution systems are of interest since they can lead to chlorine demand, coliform growth, pipe corrosion, and water taste and odor problems. As such, the study described in this paper is part of an AWWARF and Tampa Bay Water tailored collaboration project to determine the effect of blending different source waters on the water quality in various distribution systems. The project was based on 18 independent pilot distribution systems (PDS), each being fed by a different water blend (7 finished waters blended in different proportions). The source waters compared were groundwater, surface water, and brackish water, which were treated in a variety of pilot distribution systems, including reverse osmosis (RO) (desalination), both membrane and chemical softening, and ozonation-biological activated carbon (BAC), resulting in a total of 7 different finished waters. The observations from this study consistently demonstrated that unlined ductile iron was more heavily colonized by a biomass than galvanized steel, lined ductile iron, and PVC (in that order) and that the fixed biomass accumulation was more influenced by the nature of the supporting material than by the water quality (including the secondary residual levels). However, although the bulk liquid water cultivable bacterial counts (i.e. heterotrophic plate counts or HPCs) did not increase with a greater biofilm accumulation, the results also suggested that high HPCs corresponded to a low disinfectant residual more than a high biofilm inventory. Furthermore, temperature was found to affect the biofilms, plus the AOC was important when the residual was between 0.6 and 2.0 mg $Cl_2/l$. An additional aspect of the current study was that the potential of the exoproteolytic activity (PEPA) technique was used along with a traditional so-called destructive technique in which the biofilm was scrapped off the coupon surface, resuspended, and cultivated on an R2A agar. Both techniques indicated similar trends and relative comparisons among the PDSs, yet the culturable biofilm values for the traditional method were several orders of magnitude lower than the PEPA values.
Biofilm formation on the membrane surface results in the loss of permeability in membrane bioreactors (MBRs) for wastewater treatment. Studies have revealed that cellulose is not only produced by a number of bacterial species but also plays a key role during formation of their biofilm. Hence, in this study, cellulase was introduced to a MBR as a cellulose-induced biofilm control strategy. For practical application of cellulase to MBR, a cellulolytic (i.e., cellulase-producing) bacterium, Undibacterium sp. DM-1, was isolated from a lab-scale MBR for wastewater treatment. Prior to its application to MBR, it was confirmed that the cell-free supernatant of DM-1 was capable of inhibiting biofilm formation and of detaching the mature biofilm of activated sludge and cellulose-producing bacteria. This suggested that cellulase could be an effective anti-biofouling agent for MBRs used in wastewater treatment. Undibacterium sp. DM-1-entrapping beads (i.e., cellulolytic-beads) were applied to a continuous MBR to mitigate membrane biofouling 2.2-fold, compared with an MBR with vacant-beads as a control. Subsequent analysis of the cellulose content in the biofilm formed on the membrane surface revealed that this mitigation was associated with an approximately 30% reduction in cellulose by cellulolytic-beads in MBR.
Quorum sensing is a process of cell-to-cell communication in which bacteria produce autoinducers as signaling molecules to sense cell density and coordinate gene expression. In the present study, a LuxI-type synthase, AnoI, and a LuxR-type regulator, AnoR, were identified in Acinetobacter nosocomialis, an important nosocomial pathogen, by sequence analysis of the bacterial genome. We found that N-(3-hydroxy-dodecanoyl)- L -homoserine lactone (OH-dDHL) is a quorum-sensing signal in A. nosocomialis. The anoI gene deletion was responsible for the impairment in the production of OH-dDHL. The expression of anoI was almost abolished in the anoR mutant. These results indicate that AnoI is essential for the production of OH-dDHL in A. nosocomialis, and its expression is positively regulated by AnoR. Moreover, the anoR mutant exhibited deficiency in biofilm formation. In particular, motility of the anoR mutant was consistently and significantly abolished compared with that of the wild type. The deficiency in the biofilm formation and motility of the anoR mutant was significantly restored by a functional anoR, indicating that AnoR plays important roles in the biofilm formation and motility. Furthermore, the present study showed that virstatin exerts its effects on the reduction of biofilm formation and motility by inhibiting the expression of anoR. Consequently, the combined results suggest that AnoIR is a quorum-sensing system that plays important roles in the biofilm formation and motility of A. nosocomialis, and virstatin is an inhibitor of the expression of anoR.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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