Studying the bacteria of hazardous insects allows the opportunity to find potentially better biological control agents. Therefore, in this study, bacteria from summer chafer (Amphimallon solstitiale L., Coleoptera: Scarabaeidae) we isolated and identified the insecticidal effects of bacteria isolated from A. solstitiale and Melolontha melolontha L. (common cockchafer, Coleoptera: Scarabaeidae) and the mixtures of these bacterial isolates were investigated on A. solstitiale larvae. Crystals from Bacillus sp. isolated from M. melolontha were also purified, and tested against the second and third-stage larvae of A. solstitiale. The bacterial isolates of A. solstitiale were identified as Pseudomonas sp., Pseudomonas sp., Bacillus cereus and Micrococcus luteus, based on their morphology, spore formation, nutritional features, and physiological and biochemical characteristics. The insecticidal effects of the bacterial isolates determined on the larvae of A. solstitiale were $90\%$ with B. cereus isolated from A. solstitiale, and $75\%$ with B. cereus, B. sphaericus and B. thuringiensis isolated from M. melolontha within ten days. The highest insecticidal effects of the mixed infections on the larvae of A. solstitiale were $100\%$ both with B. cereus+B. sphaericus and with B. cereus+B. thuringiensis. In the crystal protein bioassays, the highest insecticidal effect was $65\%$ with crystals of B. thuringiensis and B. sphaericus isolated from M. melolontha within seven days. Finally, our results showed that the mixed infections could be utilized as microbial control agents, as they have a $100\%$ insecticidal effect on the larvae of A. solstitiale.
A chitosanase-producing bacteria was isolated on chitosan agar plate from soil samples. The strain was spore-forming gram positive bacteria, catalase positive, and rod shape. The strain was identified as Bacillus cereus. The strain did not need an inducer for the synthesis of chitosanase. Chitosanase from Bacillus sp. HW-002 was constitutive enzyme. The optimal medium for the production of the enzyme was composed of 0.5$\%$ sucrose and $1.5\%$ yeast extract-tryptone (1:1 w/w) mixture at pH 6.5. After Bacillus sp. HW-002 was cultivated at $32^{\circ}C$ for 32 h, maximal productivity was gained to be about 27, 200 U/l. Chitosanase from Bacillus sp. HW-002 was a mixed growth-linked metabolite.
Kim, Hyoun-Wook;Kim, Hye-Jung;Kim, Cheon-Jei;Paik, Hyun-Dong
Food Science and Biotechnology
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제17권6호
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pp.1337-1340
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2008
The objective of this study was to evaluate the microbial safety of raw beef used to produce Korean beef jerky, The raw beef samples harbored large populations of microorganisms. In particular, psychrophilic bacteria were found to be most numerous ($9.2{\times}10^3-1.0{\times}10^5\;CFU/g$) in the samples. Mesophilic bacteria and anaerobic bacteria were present in average numbers ($10^3-10^5\;CFU/g$). Spore-forming bacteria and coliforms were not detected below detection limit. Yeast and molds were detected at $2.2{\times}10^1-7.8{\times}10^2\;CFU/g$ in the raw beef. Ten samples of raw beef were analyzed for the presence of pathogenic bacteria. Bacillus cereus was isolated from sample B, G, and H. The B. cereus isolates from raw beef samples were identified with 99.8% agreement according to the API CHB 50 kit.
본 연구에서 사용한 전처리 나물류 중 고사리 경우 $13^{\circ}C$에서 B. cereus 영양세포 및 포자가, $8^{\circ}C$에서 S. aureus는 성장하지 않았다. 전처리 나물류 및 구근류에서 B. cereus 영양세포 및 포자의 성장특성을 비교한 결과, 도라지와 취나물에서 LT, SGR 및 MPD는 B. cereus 영양세포와 포자사이에 유의적인 차이를 보이지 않았다. 반면 우엉은 $13^{\circ}C$에 저장한 경우 B. cereus 영양세포와 포자의 유도기는 유의적인 차이를 보였으며 고사리의 경우, 17, 24, $35^{\circ}C$ 온도에서 B. cereus 포자의 유도기는 영양세포의 유도기 값보다 2배 연장된 것으로 유의적인 차이를 나타내었다(P<0.05). $24^{\circ}C$와 $35^{\circ}C$의 상온에서는 모든 나물류 및 구근류에서 B. cereus 포자 유도기는 영양세포의 유도기보다 연장되었고, SGR 값은 포자가 빠른 것으로 나타났다. 한편, $13^{\circ}C$와 $17^{\circ}C$에서는 B. cereus 영양세포와 포자의 유도기가 고온에 비하여 연장되어 B. cereus 영양세포와 포자의 성장을 억제하기 위해서는 $13^{\circ}C$ 이하의 온도 관리가 중요하다. 또한 B. cereus와 S. aureus 영양세포의 성장특성 비교 결과, $13^{\circ}C$ 이하에서는 B. cereus 성장이 관찰되지 않았으나 S. aureus는 $8^{\circ}C$에서도 성장하였다. 전반적으로 $13^{\circ}C$에서 모든 나물류 및 구근류는 B. cereus의 유도기가 S. aureus 의 유도기보다 3배 이상 연장되었다. 전처리 나물류 및 구근류에서 개발된 설사형 B. cereus 영양세포 및 포자 성장예측모델을 구토형 B. cereus 영양세포 및 포자의 실험값으로 검증한 결과, 도라지와 고사리의 LT 모델과 고사리의 SGR 모델을 제외한 모든 모델에서 Bf 값이 허용범위(0.07~1.15)에 속하여 설사형 B. cereus 영양세포, 포자 성장모델이 구토형 B. cereus 영양세포, 포자의 성장을 예측하는데 적합한 것으로 나타났다. 또한 전처리 나물류 및 구근류에서 $8{\sim}35^{\circ}C$ 사이에 개발된 S. aureus의 성장예측 모델을 실험에 사용하지 않은 온도(18, $30^{\circ}C$)로 적합성을 검증한 결과, 도라지의 SGR 모델을 제외한 모든 모델에서 Bf와 Af 값이 가장 이상적인 1에 가까운 값으로 나타나 실험값과 예측값 사이의 일치성을 보였다. 본 연구 결과 개발된 전처리 나물류 및 구근류의 성장예측 모델은 병원성 미생물의 증식을 억제하는 기준과 규격 설정 시 활용 가능할 것이며, 전처리 나물류의 HACCP 공정의 CCP(critical control point) 및 CL(critical limit)을 설정하는데 유용한 자료로 활용될 수 있을 것으로 사료된다.
통조림 식품의 가열살균 공정은 에너지 소비와 제품의 미생물학적 안전성, 영양적 및 기호적 품질을 감안하여 최적화되어야 한다. 본 연구에서는 일차적으로 가열살균에 따른 에너지 소비와 제품의 미생물학적 안전성과의 관계를 최적화하고자 하였다. 참치 기름담금 통조림을 서로 다른 살균조건 즉, $F_0$-값을 달리하여 열처리하고, 마이크로 컴퓨터를 이용하여 자체 개발한 $F_0$-값 측정 씨스템을 사용하여 측정한 $F_0$-값과 미생물학적 안전성과의 관계를 조사하여 적정 $F_0$-값을 제시하였다. 참치 기름담금 통조림의 냉점은 시험대상 통조림의 기하학적 중심이 아니라 내용물의 무게 중심이었으며, 시험대상 통조림들을 레토르트에 무작위하게 넣는 경우에 레토르트 내의 통조림의 위치는 F0-값에 영향을 미치지 않았다. 또한 미생물에 의한 원료의 오염방지를 위하여서는 가열살균 이전의 공정을 가능한 한 단축시켜야 함을 확인하였다. 원료 및 자숙한 참치에서 분리된 내열성 박테리아는 S. subtilis, B. cereus 및 B. pasteurii였고 이 중 내열성이 가장 큰 것은 B. subtilis였으나, $F^0$-값 6분 이상의 제품에서는 저장 중에도 미생물이 전혀 검출되지 않았으며, 상업적 살균에 의해 생산되는 참치 기름담금 통조림의 가열살균 기준으로는 $F_0$-값 6분이 적당한 것으로 판단되었다.
Park, Tae-Jung;Park, Jong-Pil;Seo, Gwi-Moon;Chai, Young-Gyu;Lee, Sang-Yup
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제16권11호
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pp.1713-1719
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2006
A method for the simple, rapid, specific, and accurate detection of Bacillus anthracis spores was developed by employing specific capture peptides conjugated with fluorescent quantum dots (QDs). It was possible to distinguish B. anthracis spores from the spores of B. thuringiensis and B. cereus using these peptide-QD conjugates by flow cytometric and confocal laser scanning microscopic analyses. For more convenient high-throughput detection of B. anthracis spores, spectrofluorometric analysis of spore-peptide-QD conjugates was performed. B. anthracis spores could be detected in less than 1 h using this method. In order to avoid any minor yet false-positive signal caused by the presence of B. thuringiensis spores, the B-Negative peptide, which can only bind to B. thuringiensis, conjugated with another type of QD that fluoresces at different wavelength was also developed. In the presence of mixed B. anthracis and B. thuringiensis spores, the BABA peptide conjugated with QD525 and the B-Negative peptide conjugated with QD585 were able to bind to the former and the latter, specifically and respectively, thus allowing the clear detection of B. anthracis spores against B. thuringiensis spores by using two QD-labeling systems. This capture peptide-conjugated QD system should be useful for the detection of B. anthracis spores.
시금치를 한국 식단의 식자재로 사용하기 위해 cook-chill 가공과 sous vide 기술을 사용하였다. 시금치는 500 g 단위로 차단성 필름을 사용하여 진공포장하고 Listeria monocytogenes의 6D 사멸조건에서 저온살균하고 $3^{\circ}C$에서 급속히 냉각한 다음 $3^{\circ}C$와 $10^{\circ}C$에서 저장하면서 품질을 측정하였다. 오염지표균은 중온성세균, 저온성세균, 혐기성세균, 내열성세균, 대장균군, 효모 및 곰팡이, Enterobacteriacea 및 분원성연쇄상구균을 측정하였다. 원료 시금치에서는 $2.2{\times}10^8\;cfu/g$로 높은 분포를 보였고, cook-chill 가공 후에는 $6.0{\times}10^3\;cfu/g$로 감소하였으며 저장기간 동안 서서히 증가하였다. 저온성세균과 혐기성세균은 거의 같은 양상을 보였으며, 효모 및 곰팡이, 대장균군, 분원성연쇄상구균 및 Enterobacteriacea는 cook-chill 가공 후에는 검출되지 않았다. 그람음성의 병원성세균은 Aeromonas hydrophila, Escherichia coli O157:H7, Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella spp., Shigella spp., Yersinia enterocolitica, 그람양성균은 Bacillus cereus, Campylococcus spp., Clostridium perfringens, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus을 분리시험하였다. A. hydrophila는 수세한 시금치에서 분리되었으나, 원료 시금치와 cook-chill한 시금치에서는 분리되지 않았다. B. cereus와 C. perfringens는 원료 시금치, 수세한 시금치와 cook-chill 가공한 시금치에서 분리된 반면 S. aureus는 원료 시금치와 수세한 시금치에서만 분리되었다. 그 외의 다른 병원성세균은 cook-chill 과정에서 분리되지 않았다.
A small amount of milk is sold as 'untreated' or raw in the US; the two most commonly used heat-treatments for milk sold in retail markets are pasteurization (LTLT, low-temperature long time; HTST, high-temperature short time) and sterilization (UHT, ultra-high temperature). These treatments extend the shelf life of milk. The main purpose of heat treatment is to reduce pathogenic and perishable microbial populations, inactivate enzymes, and minimize chemical reactions and physical changes. Milk UHT processing combined with aseptic packaging has been introduced to produce shelf-stable products with less chemical damage than sterile milk in containers. Two basic principles of UHT treatment distinguish this method from in-container sterilization. First, for the same germicidal effect, HTST treatments (as in UHT) use less chemicals than cold-long treatment (as in in-container sterilization). This is because Q10, the relative change in the reaction rate with a temperature change of $10^{\circ}C$, is lower than the chemical change during bacterial killing. Based on Q10 values of 3 and 10, the chemical change at $145^{\circ}C$ for the same germicidal effect is only 2.7% at $115^{\circ}C$. The second principle is that the need to inactivate thermophilic bacterial spores (Bacillus cereus and Clostridium perfringens, etc.) determines the minimum time and temperature, while determining the maximum time and temperature at which undesirable chemical changes such as undesirable flavors, color changes, and vitamin breakdown should be minimized.
Biocontrol microbes have mainly been screened among large collections of microorganisms $via.$ nutrient-rich $in$$vitro$ assays to identify novel and effective isolates. However, thus far, isolates from only a few genera, mainly spore-forming bacilli, have been commercially developed. In order to isolate field-effective biocontrol microbes, we screened for more than 200 oligotrophic bacterial strains, isolated from rhizospheres of various soil samples in Korea, which induced systemic resistance against the soft-rot disease caused by $Pectobacterium$$carotovorum$ SCC1; we subsequently conducted in $planta$ bioassay screening. Two oligotrophic bacterial strains were selected for induced systemic disease resistance against the $Tobacco$$Mosaic$$Virus$ and the gray mold disease caused by $Botrytis$$cinerea$. The oligotrophic bacterial strains were identified as $Pseudomonas$$manteilii$ B001 and $Bacillus$$cereus$ C003 by biochemical analysis and the phylogenetic analysis of the 16S rRNA sequence. These bacterial strains did not exhibit any antifungal activities against plant pathogenic fungi but evidenced several other beneficial biocontrol traits, including phosphate solubilization and gelatin utilization. Collectively, our results indicate that the isolated oligotrophic bacterial strains possessing induced systemic disease resistance could provide useful tools as effective biopesticides and might be successfully used as cost-effective and preventive biocontrol agents in the field.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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