2011년 경북 영주의 여러 농가에서 이병율과 치사율이 높은 소 바이러스성 설사 바이러스(BVDV)가 발생하였다. 유전자 분석 결과 두 개의 유전자형 BVDV-1b (n = 21)와 BVDV-2a (n = 7)이 확인되었다. 검사결과, 이 지역의 농가에서는 BVDV-1b 유전자형이 가장 많이 검출되었고, 또한 몇 농가에서 BVDV-2a 유전자형도 검출되었다. 이들 농가에서 발생한 BVDV-1b 감염은 BVDV-2 감염과 유사한 중증의 급성 임상증상을 보여 주었다. 이 결과는 한우 송아지에서 급성이면서 치명적인 BVDV-1b 발생을 보고한다.
소 바이러스성 설사 바이러스는 전세계 축산업에서 중요한 질병이다. 대한민국의 최대 소 사육지역인 경북지방에서 유행하고 있는 소 바이러스 설사 바이러스를 조사하기 위해, 소 바이러스성 설사 바이러스의 임상증상을 보이는 한우 송아지로부터 365개의 분변을 채취하였다. 가검물을 채취한 365 마리 송아지 가운데 50 마리가 소 바이러스성 설사 바이러스에 양성반응을 보였다. 5'-UTR을 이용한 계통발생 분석에서 48두 송아지가 BDVD-2a에 속했고, 2두에서만 각각 BVDV-1a와 BVDV-1b로 분류되었다. 이들 결과는 BVDV-2a가 경북지역의 한우 송아지에서 유행하고 있음을 제시하고 있다.
소의 혈액, 세포, 조직, 기관 등 소 유래 물질을 원료로 사용한 생물의약품, 조직공학제제, 세포치료제의 경우 소 유래원료 물질에 다양한 바이러스가 오염된 사례가 있기 때문에 바이러스 안전성 검증이 필수적이다. BVDV는 동물세포주, 우혈청 등에 가장 흔하게 오염되는 바이러스이다. 소 유래물질을 원료로 하는 생물의약품, 조직공학제제, 세포치료제 등에서 BVDV안전성을 확보하기 위해, 원료물질, 제조공정, 완제품에서 BVDV를 정량적으로 검출하고, 제조공정에서 BVDV제거 검증을 위한 시험법으로 활용이 가능한 BVDV real-time RT-PCR시험법을 확립하였다. BVDV에 특이적인 primer를 선별하였으며, 형광염료 SYBR Green I을 사용하여 BVDV RNA 정량 검출 시험법을 최적화하였다. 세포배양법에 의한 감염역가와 비교한 결과 real-time RT-PCR 민감도는 $1TCID_{50}/mL$이었다. 확립된 시험법의 신뢰성(reliability)을 보증하기 위해 시험법 검증을 실시한 결과 특이성 (specificity)과 재현성(reproducibility)이 우수함을 확인하였다. 확립된 real-time RT-PCR을 생물의약품 제조공정 검증에 적용할 수 있는지 확인하기 위하여 인위적으로 BVDV를 오염시킨 CHO 세포주와 소 유래콜라겐에서 BVDV검출 시험을 실시하였다. BVDV를 감염시킨 CHO 세포와 세포배양 상청액에서 BVDV를 정량적으로 검출할 수 있었다. 소 유래 콜라겐에서도 $10TCID_{50}/mL$까지 정량적으로 검출할 수 있었다.
Bovine viral diarrhea (BVD) is one of the problematic wasting diseases in cattle leading to huge economic losses. This study was conducted to investigate the prevalence of BVD including transient and persistent infection from cattle farms in Gyeongsangnam-do. A total of 2,667 blood samples from 24 farms were collected and the sera were subjected to ELISA to detect BVD virus (BVDV) antigen, Erns. 5' untranslated region (5'-UTR) of BVDV-positive samples was sequenced to identify the genotype, and compared with isolates previously reported elsewhere. There were fourteen BVDV-positive calves from 2,667 samples (positive rate: 0.52%) from first ELISA testing followed by eight persistently infected out of eleven BVDV-positive samples (72.73%) in secondary ELISA that was conducted in at least four weeks suggesting the circulation of BVDV in the area. Sequencing analysis exhibited that thirteen BVDV-positive samples were identified as BVDV-1b and one sample was BVDV-2a. Phylogenetic analysis revealed that the BVDV-1b-positive samples showed the highest homology in nucleotide sequence to Korean isolates collected from Sancheong, Gyeongsangnam-do, while the BVDV-2a-positive sample (21GN7) was more similar to reference strains collected outside South Korea. This study will provide the recent fundamental data on BVD prevalence in Gyeongsangnam-do to be referred in developing strategies to prevent BVDV in South Korea.
경북지역에서 설사증상을 보이는 한우송아지를 대상으로 소 바이러스성 설사 바이러스의 유병률이 조사되었다. 75두의 송아지가 소 바이러스성 설사 바이러스에 양성 반응을 나타내는 것으로 확인되었다. 계통발생 분석시 양성반응을 보이는 75두 송아지가 BVDV-2a로 분류되었다. BVDV-2a로 분류된 대부분은 수양성 설사의 임상증상을 나타내는 송아지로부터 채취한 것이었다. 우리의 결과에 따르면 모든 BVDV-2 감염이 심각한 임상증상을 보이지 않는 것으로 나타났다. 이 연구는 경북지역에서 BVDV-2 감염의 높은 발생률을 보여준 것으로, 이 연구 결과는 백신개발 및 예방 전략이 대한민국에서 BVDV 감염의 효과적인 근절을 위해 필요한 것으로 사료된다.
Since the 1980's, several kinds of inactivated bovine viral diarrhea virus (BVDV) vaccines have been used to immunize domestic animals such as cattle and goat in Korea. Immunogenicity of the BVDV vaccines has been checked by the Korean Veterinary Authority using laboratory animals. In this study, we applied a molecular method to investigate the genetic characterization of the BVDV genes in six commercial inactivated BVDV vaccines, and determined the efficiency of two extraction reagents (i.e., sodium citrate or isopropyl myristate) to separate the vaccine antigens from the antigen/adjuvant complexes. Six partial non-coding regions (288 bp) were successfully amplified with specific primer sets, which demonstrated that sodium citrate is more efficient in extracting viral RNA from inactivated gel vaccines than isopropyl myristae. In addition, we identified the virus strains from the vaccines by analyzing the nucleotide sequences of the 5' non-coding region (NCR) of BVDV. The nucleotide similarity of the partial 5' NCR ranged from 95.1 to 100% among BVDV vaccine strains, respectively, indicating that a few manufacturers used different BVDV strains to produce their vaccines.
Bovine viral diarrhea virus (BVDV) is distributed in cattle worldwide and causes significant economic losses to the livestock industry. Identification and remove of BVDV persistently infected (PI) cattle is very important to control BVDV infection in cattle herd. The objective of this study is to investigate the infection status of BVDV infection in Korean native cattle (Bos taurus coreanae) farms located in Jeonbuk State. From 2021 to 2022, a total of 1,497 samples were collected from 17 cattle farms and tested for BVDV antigen using a commercial ELISA kit. By the first ELISA testing, 24 cattle from six farms were positive for BVDV antigen, showing the farm-level or cattle-level prevalence of 35.3% or 1.6%, respectively. By the second ELISA testing which carried out with the first ELISA-positive samples after three-weeks, 12 cattle (0.8%) from five farms (29.4%) were positive for BVDV antigen, indicating these cattle were PI cattle. Genotypes of BVDV were determined with 12 BVDV-positive samples using a previously described RT-PCR assay and the results showed that 3 (25.0%) and 9 (75.0%) were confirmed to be type 1 and type 2, respectively. These results will be helpful to establish the effective control strategy for BVDV in cattle farms in Jeonbuk State.
The aim of this study was to detect bovine viral diarrhea virus (BVDV) from calves in Chonbuk province. Blood samples were taken from ninety-two dairy calves. Capture enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was used to detect BVDV. BVDV were detected in eight out of ninety-two (8.6%) dairy calves. BVDV were detected in one of twenty five of female calves and one of twenty three of male calves of 4 months old, whereas in the 5 months age group, BVDV were detected in low of twenty three of female calves and two of twenty one of male calves. There were no significant differences (p>0.05) in the detection rate of BVDV on the basis of sex. On the other hand, ages of calves had significant differences (p<0.05) on the prevalence of BVDV.
25일령의 한우송아지가 10일 간의 호흡기질환과 출혈성 설사의 병역을 나타내다가 폐사하였다. 이 송아지는 다른 송아지들과 비교해보았을 때 극도로 위축되어 있었다. 꼬리와 회음부의 분변 흔적은 만성설사가 지속되었음을 말해주었다. 부검시 다양한 기관(조직)에서 반상출혈이 관찰되었다. 역전사 중합효소연쇄반응에 의하여 소 바이러스성 설사병 바이러스가 진단되었다. 이 증례는 계통발생분석에서 BVDV-2a 그룹에 속하는데, 이것은 고병원성인 미국 균주890 (U18059)과 유사하다. 본 증례는 BVDV-2가 한국에서 유행하고 있다는 증거를 제공한다. 이를 통해 우리는 BVDV-2의 발생을 재확인하였다.
계통발생 및 염기서열분석시 한우 송아지에서 중증의 급성 소 바이러스성 설사 바이러스 발생은 BVDV-2a에 속한 것으로 나타났고, BVDV-2 균주 890과는 독성 마커가 동일하였으며, 독성이 높은 것으로 분류되었다. 이들 BVDV 발생은 어린 송아지(20-40일령)에 주로 감염되었고, 임상증상으로 출혈성 설사, 침울, 식욕감퇴, 허약을 특징으로 하였다. 한우 송아지에서 고독성 BVDV-2의 발견은 역학조사, 진단 및 예방접종 전략에 중요한 영향을 내포한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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