아시아에서 한방약초로 널리 알려진 당귀 추출물의 미백활성을 알아보기 위하여 tyrosinase 저해활성을 측정한 결과 1,000 ${\mu}g/ml$의 농도에서 70% 이상의 활성을 나타내었다. 또한 당귀 추출물에 대한 멜라노마 세포(B16F10)의 세포생존율을 확인한 결과 500 ${\mu}g/ml$의 농도에서 99% 이상의 세포생존율을 확인할 수 있었다. 미백 관련 인자인 MITF, TRP-1, TRP-2 및 tyrosinase의 mRNA 발현량을 측정한 결과 50 ${\mu}g/ml$의 농도에서 각각 85.7%, 123.9%, 68.8%, 208%로 당귀 추출물을 처리하지 않은 군보다 감소하였음을 확인할 수 있었다. 이러한 연구 결과에 따라 당귀 추출물이 melanin 합성과 관련이 있는 유전자 발현의 억제효과가 있음을 확인할 수 있었으며, 미백 화장품 소재로서의 가능성을 확인하였다.
The present study investigated the feasibility of using the ethanolic extract of Hermetia illucens larvae (HIE) as a whitening improvement material. In cell viability assays using B16F1 melanoma cells, no cytotoxicity was recorded up to 200 ㎍·mL-1 of HIE. Moreover, while tyrosinase inhibitory activity increased, melanin content decreased in a dose-dependent manner, indicating that HIE likely inhibited tyrosine-induced intracellular melanin biosynthesis in B16F1 melanoma cells. Therefore, HIE is expected to serve as a potent whitening improvement material.
The desire to be light skinned is universal among women. Asia has a long history of using skincare formulations as whitening agents. There is an imperative need to develop novel cosmetics from herbal sources due to several unpleasant side effects and high costs. As a result, this study aims to investigate the effect of Ceylon black tea extracts on melanogenesis. Five different Ceylon black tea extracts were prepared and examined for total phenolic content (TPC), total flavonoid content (TFC), DPPH radical scavenging activity, and tyrosinase inhibitory activity. Furthermore, B16F10 melanoma cells were treated with these extracts and tested for cytotoxicity and protein suppression levels. According to the results of this study, the highest TPCs were obtained from ethanol and acetone extractions (240.303 ± 1.389 ㎍/g and 240.202 ± 4.700 ㎍/g, respectively), whereas the highest TFC was obtained from acetone extraction (57.484 ± 0.413 ㎍/g). Ceylon black tea extracted with ethanol exhibited the highest inhibitory activity on tyrosinase with an IC50 value of 0.277 ± 0.017 mg/mL and the highest DPPH radical scavenging activity with an EC50 value of 0.009 ± 0.000 mg/mL. Furthermore, western blot results revealed that tyrosinase, TRP-1, TRP-2, and MITF protein expression levels were dose-dependently suppressed, indicating the applicability of Ceylon black tea extract as a novel melanogenesis inhibitor.
So-Yeon Han;Hye-Jeong Park;Jeong-Yong Park;Seo-Hyun Yun;Mi-Ji Noh;Soo-Yeon Kim;Tae-Won Jang;Jae-Ho Park
한국자원식물학회:학술대회논문집
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한국자원식물학회 2021년도 춘계학술대회
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pp.54-54
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2021
The Melanoma Research Coalition reported melanoma affects humans of various races. This study was conducted to confirm the inhibitory effect of melanogenesis in B16 F10 cells of Nypa fruticans Wurmb of ethyl acetate fraction (NEF). Nypa fruticans Wurmb is an important component of the East Asian mangrove vegetation. It belongs to Araceae family. Traditionally, N. fruticans was used to treat various diseases such as asthma, sore throat, liver disease, a pain reliever, and can also be used as sedative and carminative. The present study, the inhibitory effect on melanogenesis was determined by Western blotting and RT-qPCR. The level of expression of tyrosinase, TRP-1, and TRP-2 is regulated by microphthalmia-associated transcription factor (MITF) and cAMP, and cAMP affects the activity of protein kinase A (PKA). Activated PKA stimulates the phosphorylation of cAMP-reactive element-binding protein (CREB) in the nucleus, thereby increasing the amount of MITF expression and enhancing melanogenesis. Western blotting and RT-qPCR analysis showed that NEF treatment decreased the expression of tyrosinase. Similarly, TRP-1 and TRP-2 levels were decreased, which were decreased significantly at compared with the untreated control. Also, NEF attenuated the IBMX mediated increase in the intracellular cAMP level and the phosphorylation of PKA. In conclusion, NEF significantly inhibited the expressions of melanogenesis through cAMP/PKA/CREB signaling pathways.
This study was designed to compare the whitening effects of 60% ethanol extracts of Trigonotis radicans var. sericea (TR) and Lactobacillus brevis-fermented T. radicans var. sericea (FTR). Measurement of cytotoxicity in B16-F10 melanoma cells to confirm the whitening effect, FTR showed higher cell viability than TR. FTR showed inhibitory activity on melanin contents similar to the normal group at concentrations of 50 and 100 ㎍/mL. MITF expression was used to confirm the effect on melanogenesis-related protein expression. TR and FTR showed significant concentration-dependent decrease, and FTR showed lower expressions than the normal group at concentrations of 25, 50, and 100 ㎍/mL. Additionally, the mRNA expression of melanogenesis-related genes (MC1R, Rab27a, TGF-β1 and Myo5a) were measured by RT-qPCR to confirm the whitening effect. In MC1R expression at a concentration of 100 ㎍/mL in FTR showed effective inhibitory activities, and in TGF-β1 expression, TR and FTR both showed effective activities compared to normal groups even at low concentrations. Results of myo5a and Rab27a, a similar pattern was shown, and FTR showed effective inhibitory activities at a concentration of 100 ㎍/mL. As a result, FTR had higher whitening effects through bioconversion and is expected to be a good material for whitening functional cosmetics.
선학초 추출물을 기능성 화장품 소재로 활용하기 위하여 미백효과를 검증하였다. 세포 내 tyrosinase 저해활성 측정결과 선학초 에탄올 추출물 $500{\mu}g/mL$에서 42%의 저해활성을 나타내었다. 이는 선학초 추출물이 세포 내 tyrosinase 발현을 억제시킴으로서 멜라닌 합성 또한 저해 하는 것임을 확인 할 수 있었다. 선학초 추출물의 단백질 발현과 mRNA 발현 억제효과를 검토한 결과 선학초 열수 및 에탄올 추출물을 처리한 B16F10군에서는 tyrosinase protein의 발현이 처리하지 않은 군보다 감소함을 확인할 수 있었다. 결과적으로 선학초 추출물의 미백효능을 확인할 수 있었으며, 식품 및 화장품의 기능성 소재로 이용이 가능할 것으로 판단된다.
본 연구에서는 제주도 자생 감귤 17종에 대하여 탈색소효과(depigment effect)를 연구하였다. B16 멜라닌 생성세포(B16 melanoma cell)를 이용하여 tyrosinase 및 멜라닌 생성억제 효과를 연구한 결과 대조군 대비하여 농도 의존적으로 감소하는 3종의 미성숙 온주밀감(immature Citrus unshue), 팔삭(Citrus hassaku), 진지향(Citrus sinensis ${\times}$ reticulata)을 도출하였다. 또한, 이와 같이 도출된 감귤 추출물을 이용하여 멜라닌 세포 생성(melanogenesis)에 영향을 미치는 tyrosinase, DOPAchrome tautomerase (TRP-2)와 DHICA oxidase (TRP-1) 단백질 발현을 실험한 결과 tyrosinase, TRP-1, TRP-2 단백질 발현이 감소함을 나타내었다. 특히 이들 중 미성숙 온주밀감은 tyrosinase와 TRP-1 단백질 발현에서 유의적으로 감소하는 결과를 보였다. 본 연구 결과로써 미성숙 온주밀감은 모든 실험에서 우수한 효과를 나타내어 UV에 의해서 야기되는 피부 색소 침착을 방지할 수 있는 물질로서 기대할 수 있다.
본 연구에서는 느릅나무버섯의 자실체에서 메탄올과 열수를 이용해 추출한 물질의 항산화, 항염증 및 Melanoma B16/F10 세포에서의 멜라닌 생성 저해 효과를 탐색하였다. DPPH 라디칼 소거능과 환원력을 이용해 항산화 효과를 측정한 결과 양성대조군으로 사용한 BHT에 비해 항산화 효과는 낮았지만 다른 종류의 버섯에 비해 효과가 우수한 것으로 나타났으며, 철 이온 제거 항산화 실험에서 느릅나무버섯의 열수 추출물은 양성대조군인 BHT에 비해 철 이온을 효율적으로 제거하여 항산화 효과가 높게 나타났다. 느릅나무버섯 자실체의 염증 저해 실험에서는 배양 중인 RAW 264.7 대식세포에 자실체의 메탄올과 열수추출물을 각각 처리 한 후 염증 유도 물질인 LPS를 투여하여 추출물의 NO 생성 저해효과를 조사한 결과, 처리한 추출물의 농도 의존적으로 염증 유발의 주요 인자인 NO의 양이 현저하게 감소하는 우수한 소염효과를 보였으며, carrageenan에 의해 흰쥐 뒷발에 유도된 부종을 저해하는 실험에서는 투여한 추출물의 농도가 증가함에 따라 흰쥐의 뒷발에 유도된 부종의 용적도 비례적으로 감소하여 항염증 효과가 높은 것으로 나타났다. Melanoma 세포에 버섯추출물을 처리하고 생합성된 멜라닌의 양을 측정한 결과 농도 의존적으로 melanoma 세포내 멜라닌의 양이 감소하여 멜라닌 저해 효과가 높은 것으로 나타났다. 따라서 느릅나무버섯 자실체의 항산화, 항염증 및 멜라닌 생성 저해 선분은 앞으로 항산화제, 소염제 및 미백제로의 이용이 가능할 것으로 사료된다.
본 연구에서는 초임계 공정에 의해 복령피를 추출하였고, 에탄올 복령피 추출물과 비교하여 항염, 미백, 항산화효과를 측정하였다. 또한 선정된 추출물의 제형과 약물전달 펩티드를 활용하여 효율적인 경피투과 방법을 제시하였다. 복령피의 항암, 항염성분으로 알려진 Pachymic acid를 지표성분으로 HPLC 분석 결과 에탄올 복령피 추출물 보다 초임계 복령피 추출물이 2배 이상 높게 추출되는 것으로 나타났다. 복령피의 항산화효과를 확인하기 위하여 DPPH 소거능과 ABTS 소거능은 복령피 에탄올 추출물이 초임계 복령피 추출물보다 더 낮은 농도에서 $IC_{50}$을 나타내었다. 하지만 RAW 264.7 세포 내 NO(Nitric oxide) 생성량을 측정한 결과에서는, 에탄올 복령피 추출물보다 초임계 복령피 추출물이 동일 농도에서 더 낮은 NO 생성량을 나타냈다. 또한 B16 melanoma 세포에 복령피 추출물을 $20{\mu}g/mL$ 농도를 72시간 처리 후 세포 내외 멜라닌 합성을 확인한 결과에서는, 에탄올 복령피 추출물과 초임계 복령피 추출물 모두 효과가 있었으며 초임계 추출물이 더 낮은 멜라닌 함량을 보였다. NO 생성량 실험에서 활용된 RAW 264.7 세포에서는 $800{\mu}g/mL$농도에서도 독성이 나타나지 않았다. 하지만 B16 melanoma 세포에서는 $50{\mu}g/mL$에서도 에탄올 추출물과 초임계 추출물 모두 60 % 미만의 생존율을 나타냈다. 초임계 복령피 추출물을 대상으로 리포좀 제형과 약물전달 펩티드를 활용하여 Franz diffusion cell 실험 결과에서는, 리포좀 제형과 약물 전달 펩티드가 초임계 복령피 추출물을 경피 투과를 증진시켜 주는 것으로 나타났다. 초임계 복령피 추출물이 다양한 효능의 화장품 소재로서 개발될 가능성이 있다고 판단된다.
The aqueous extract from Asiasari radix (AEAR) was used to investigate the effect of ${\alpha}$-melanocyte stimulating hormone induced melanogenesis in B16F10 mouse melnoma cells. The treatment with AEAR at the 1.0 and 2.0 mg/ml level significantly inhibited the biosynthesis of melanin without changes of cell growth and morphology compared with untreated control. The AEAR-treated cells at the 2.0 mg/ml level were more efficient than commercial arbutin at 0.1 mg/ml. The tyrosinase activity also significantly decreased in AEAR-treated cells at the 1.0 and 2.0 mg/ml level. The Western analyses confirmed the slightly decreased expression of tyrosinase by AEAR treatment. These results indicate that AEAR may contribute to the inhibition of melanin biosynthesis through regulating tyrosinase activity and expression and serve as a new candidate in the design of new skin-whitening or therapeutic agents.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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