The p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) is involved in various processes, including stress responses, development, and differentiation. However, little information on p38 MAPK in insects is available. In this study, a p38 MAPK gene, $Accp38b$, was isolated from $Apis$$cerana$$cerana$ and characterized. The quantitative real-time PCR (Q-PCR) analysis revealed that $Accp38b$ was induced by multiple stressors. Notably, the expression of $Accp38b$ was relatively higher in the pupae phase than in other developmental phases. During the pupae phase, Accp38b expression was higher in the thorax than in the head and abdomen and higher in the fat body than in the muscle and midgut. Immunohistochemisty showed significant positive staining of Accp38b in sections from the brain, eyes, fat body, and midgut of $A.$$cerana$$cerana$. These results suggest that Accp38b may play a crucial role in stress responses and have multiple aspects function during development.
To determine the nucleotide sequence of the ds RNA segment B containing the RNA dependent RNA polymerase (RdRp) gene of the DRT strain of infectious pancreatic necrosis virus (lPNV), the cDNA of the ds RNA segment B of the DRT strain of IPNV was synthesized using the reverse transcriptase (RT)-polymerase chain reaction (PCR) and its cDNA nucleotide sequence was determined. The DRT segment B was 2, 783 bp long and contained only a single long open reading frame (ORF) of 2, 535 bp in length. This ORF nucleotides encoded the VPl protein, the putative RdRp of IPNV. The VPl protein comsisted of 845 amino acids. The molecular weight of the RdRp, as deduced from the nucleotide sequence, is 94, 426. The nucleotide sequence of the ORF of the DRT showed 89.7% homology to the Jasper strain, but 80.8% to the Sp strain. The amino acid sequence of the ORF of the DRT sho.wed 97.6% homology to the Jasper strain, but 88.7% to the Sp strain. The conserved GTP-binding motif was detected in VPl protein.
대두가공공정 중 발생하는 부산물인 대두배아 및 대두 단백질을 이용하여 Bifidobacterium lactis BL740의 생균수 및 대두 이소플라본 비배당체 생산 최대화를 위한 배지최적화를 수행하였고 이를 위하여 통계적 방법인 fractional factorial design (FFD) 및 central composite design(CCD)를 이용, 대두 유래 성분들이 포함된 배지 (S-medium)의 최적 조성물을 확언하였다. FFD의 경우 glucose, cellobiose, fructooligosaccharidde, soy peptone, soy protein, 대두배아를 이용 총 6가지 요소를 2수준에서 적용하였으며 이 중 soy protein, soy peptone 그리고 대두 배아가 B. lactis BL740의 균성장 혹은 대두 이소플라본 비배당체 전환에 중요 인자로 확인이 되었다. FFD에서 확인된 3가지 인자를 CCD에 적용하였으며 이를 통해 균성장의 경우 최적의 배지조성함량이 soy peptone 29.55 g/L, soy protein 12.73 g/L, 대두 배아 130.67 g/L로 확인되었으며 비배당체 전환의 경우 soy peptone 1.25 g/L, soy protein 2.06 g/L, 대두 배아 60.02 g/L로 최적화 되었다.
Mesenchymal stem cells (MSCs) are known to differentiate into multiple lineages, making neurogenic differentiation an important target in the clinical field. In the present study, we induced the neurogenic differentiation of cells using histone deacetylase (HDAC) inhibitors and studied their mechanisms for further differentiation in vitro. We treated cells with the HDAC inhibitors, MS-275 and NaB; and found that the cells had neuron-like features such as distinct bipolar or multipolar morphologies with branched processes. The mRNA expressions encoding for NEFL, MAP2, TUJ1, OLIG2, and SYT was significantly increased following HDAC inhibitors treatment compared to without HDAC inhibitors; high protein levels of MAP2 and Tuj1 were detected by immunofluorescence staining. We examined the mechanisms of differentiation and found that the Wnt signaling pathway and downstream mitogen-activate protein kinase were involved in neurogenic differentiation of MSCs. Importantly, Wnt4, Wnt5a/b, and Wnt11 protein levels were highly increased after treatment with NaB; signals were activated through the regulation of Dvl2 and Dvl3. Interestingly, NaB treatment increased the levels of JNK and upregulated JNK phosphorylation. After MS-275 treatment, Wnt protein levels were decreased and GSK-3β was phosphorylated. In this cell, HDAC inhibitors controlled the non-canonical Wnt expression by activating JNK phosphorylation and the canonical Wnt signaling by targeting GSK-3β.
Kim, Sung-Jin;Jang, Seon-A;Yang, Kwang-Hee;Kim, Ji-Young;Kim, Cha-Soon;Nam, Seon-Young;Jeong, Mee-Seon;Jin, Young-Woo
대한방사선방어학회:학술대회논문집
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대한방사선방어학회 2011년도 추계 학술발표회 및 심포지엄
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pp.212-213
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2011
The biological effects of low dose ionizing radiation (LDIR) remain insufficiently understood. We examined for the scientific evidence to show the biological effects of LDIR using radiation-sensitive immune cells. We found that Ikaros protein was responsed to low dose-dependent effects of gamma radiation in IM-9 B lymphocytes. Ikaros encodes zinc finger transcription factors that is important regulators of a hematopoietic stem cells (HSCs) progression to the B lymphoid lineage development, differentiation and proliferation. In this study, we observed that cell proliferation was enhanced from 10% to 20% by LDIR (0.05 Gy) in IM-9 B lymphocytes. The Ikaros protein was phosphorylated in its serine/threonine (S/T) region and decreased its DNA binding activity in the cells exposed to LDIR. We found that Ikaros phosphorylation was up-regulated by CK2/AKT pathway and the residues of ser-304 and ser-306 in Ikaros was phosphorylated by LDIR. We also observed that Ikaros protein was localized from the nucleus to the cytoplasm after LDIR and bound with Autotaxin (ENPP2, ATX) protein, stimulating proliferation, migration and survival of immune cells. In addition, we found that the lysoPLD activity of ATX was dependent on Ikaros-ATX binding activity. These results indicate that the Ikaros is an important regulator of immune activation. Therefore, we suggest that low dose ionizing radiation can be considered as a beneficial effects, stimulating the activation of immune cells.
인삼엽소병(leaf-burning disease) 원인과 light-harvesting chlorophyll-protein(LHCP) complex의 solar energy 분배능력과의 상호 연관성을 조사하기 위한 기초 연구로써 인삼 thylakoid의 chlorophyll-protein(CP) complex의 조성 및 특징을 조사하였다. 인삼의 CP-complex는 non-denaturing SDS-PAGE 방법에 의해 4개 bands로 분리되었으며 각 band는 Bassi와 Dunahay의 결과에 따라 CPI(PSI의 reaction center와 LHCP I antennae), CP I(PSI reaction center), LHCP II(LHCP II)의 oligoform), 그리고 LHCP II(PS II antennae; CP29, CP26)로 확인되었다. 인삼의 LHCP II 는 양지식물인 spinach, soybean과 비교해 볼 때 오히려 인삼의 band intensity가 더 높았으며, CP I band는 인삼에서만 분리되었다. 인삼 CP-complex band의 absorption 및 fluorescence spectra, chlorophyll a.b ratio 에서도 비교식물과 차이를 나타내었다. Thylakoid membrane의 polypeptide 함량은 인삼에서 비교식물에 비해 현저히 낮은 polypeptide 함량은을 나타내었다. SDS-PAGE에 의한 polypeptide pattern은 band의 수나 band intensity에서 비교식물과 차이를 나타내었으며, 특히 29-35 kD, 55 kD과 60 kD 근치에서 현저한 band intensity 차이를 확인하였다. Specific $^1O_2$에 의해 chl. a가 60%, chl.b는 90%, 그리고 carotenoid는 70%가 파괴되는 것으로 확인되었다.
A gene encoding the major secreted fibrinolytic protein of Bacillus amyloliquefaciens CH86-1 was cloned from genomic DNAs. DNA sequencing showed that the gene, aprE86-1, could direct the synthesis of a mature protein 275 amino acids in length after processing. When aprE86-1 was introduced into B. subtilis, a mature 27-kDa protein was produced as expected. The fibrinolytic activity of the B. subtilis transformant (TF) was higher than that of B. amyloliquefaciens CH86-1, showing the possibility of increasing the fibrinolytic activity of Bacillus strains through genetic engineering.
Bacilli with fibrinolytic activities were isolated from traditionally-prepared Meju and some of these strains showed strong antifungal activities. One isolate, MJ1-4, showed the strongest antifungal activity. MJ1-4 and other isolates were identified as B. amyloliquefaciens strains by recA gene sequencing and RAPD-PCR results. B. amyloliqufaciens MJ1-4 efficiently inhibited an Aspergillus spp.-producing aflatoxin B1 ($AFB_1$) and a Penicillium spp.-producing ochratoxin (OTA) in addition to other fungi. Antifungal activity of B. amyloliquefaciens MJ1-4 culture reached its maximum (40 AU/mg protein) in LB or TSB medium around 48 hr at $37^{\circ}C$. Antifungal activity of the concentrated culture supernatant was not decreased significantly by protease treatments, implying that the antifungal substance might not be a simple peptide or protein. Considering its antifungal and fibrinolytic activities together, B. amyloliquefaciens MJ1-4 can serve as a starter for fermented soyfoods such as Cheonggukjang and Doenjang.
Bradykinin receptor B2, a GPCR protein, binds with the inflammatory mediator hormone bradkynin. It plays an important role in cross-talk between the renin-angiotensin system (RAS) and the kinin-kallikrein system (KKS). Also, it is involved in many processes including vasodilation, edema, smooth muscle spasm and pain fiber stimulation. Hence, studuying the structural features of the receptor becomes important. But the unavailability of the three dimensional structure of the protein makes the analysis difficult. Hence we have performed the homology modelling of Bradykinin receptor B2 with 5 different templates. 25 different homology models were constructed. Two best models were selected based on the model validation. The developed models could be helpful in analysing the structural features of Bradykinin receptor B2 and in pathophysiology of various disorders related to them.
Human rhinoviruses (HRV) are one of the major causes of common cold in humans and are also associated with acute asthma and bronchial illness. Heat-shock protein 90 (Hsp90), a molecular chaperone, is an important host factor for the replication of single-strand RNA viruses. In the current study, we examined the effect of the Hsp90 inhibitor pochonin D, in vitro and in vivo, using a murine model of human rhinovirus type 1B (HRV1B) infection. Our data suggested that Hsp90 inhibition significantly reduced the inflammatory cytokine production and lung damage caused by HRV1B infection. The viral titer was significantly lowered in HRV1B-infected lungs and in Hela cells upon treatment with pochonin D. Infiltration of innate immune cells including granulocytes and monocytes was also reduced in the bronchoalveolar lavage (BAL) by pochonin D treatment after HRV1B infection. Histological analysis of the lung and respiratory tract showed that pochonin D protected the mice from HRV1B infection. Collectively, our results suggest that the Hsp90 inhibitor, pochonin D, could be an attractive antiviral therapeutic for treating HRV infection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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