This study prepared functional oyster hydrolysates using two-step enzymatic hydrolysis and investigated their functional properties. To prepare two-step enzymatic hydrolysates (TSEH), oysters were hydrolyzed using 1% Protamex (PR) at $40^{\circ}C$ and pH 6.0 for 1 hr before sequential treatment with one of the following enzymes for 1 hr: Alcalase (AL), Flavourzyme (FL), Neutrase (NE), pepsin (PE), and trypsin (TR). The PRAL, PRNE and PRTR hydrolysates had significantly greater angiotensin I converting enzyme (ACE) inhibitory activity than did PR and the other TSEHs. Only the antioxidant activity of the PRNE hydrolysate was significantly different (p<0.05), while none of the TSEHs had antimicrobial activity. The oyster hydrolysate prepared by sequential treatment with Protamex and Neutrase (PRNE) had the best ACE inhibitory activity and antioxidant activity, with $IC_{50}$ values of 0.40 and 0.94 mg/mL, respectively. The PRNE hydrolysate was processed through an ultrafiltration (UF) series with molecular weight cut-off (MWCO) membranes of 3, 5, 10, and 30 kDa, and the ACE inhibitory, antioxidant, and antimicrobial activities of the permeates were determined. The permeate through the 3-kDa MWCO membrane had greater ACE inhibitory activity and antioxidant activity than did the other PRNE permeates, with $IC_{50}$ values of 0.11 and 0.40 mg/mL, respectively.
본 연구에서는 단메밀과 쓴메밀에 Viscozyme L과 Alcalase 2.4L 효소를 첨가하여 가수분해물을 제조하고, 이들의 항균, 항곰팡이, 항고혈압 활성을 조사하였다. 그 결과 효소를 첨가하지 않은 단메밀과 쓴메밀의 수율은 각각 7.92, 3.17%로 낮은 가수분해율을 보었으며 Viscozyme L을 첨가한 단메밀과 쓴메밀의 경우 18.70, 19.45% 그리고 Alcalase 2.4L을 첨가한 단메밀과 쓴메밀의 경우 24.65, 22.10%로 가장 높은 수율을 보였다. 메밀 가수분해물을 E. coli, S. typhimurium, P. aeruginosa, B. subtilis, S. aureus 및 L. monocytogences 균주에 대해 항균 활성을 조사한 결과, Viscozyme L을 첨가한 단메밀 가수분해물이 L. monocytogences, S. typhimurium에 대해 3-7.2 mm의 clear zone으로 항균 활성을 나타내었으며 쓴메밀 가수분해물이 S. typhimurium에 대해 5.7 mm의 clear zone으로 낮은 항균 활성을 나타내었다. A. niger, M. miehei, P. rugullosum, A. oryzae, T. reesei 균주의 항곰팡이 활성은 Viscozyme L을 첨가한 단메밀 가수분해물이 T. reesei에 대해 3.7-12 mm의 clear zone으로 강한 활성을 나타내었다. ACE 저해 활성은 효소를 첨가하지 않은 단메밀은 45.82%, 쓴메밀은 73.06%으로 나타났다. Viscozyme L을 첨가한 가수분해물의 경우 단메밀은 39.39%, 쓴메밀은 46.83%로 효소를 첨가하지 않은 메밀 가수분해물에 비해 낮은 ACE 저해활성을 보였다. 반면 Alcalase 2.4 L을 첨가한 가수분해물의 경우 단메밀 61.19%, 쓴메밀 94.48%로 가장 높은 ACE 저해활성을 나타내었다.
Our research objective was to examine the in vitro biological activity of deer antler(Nogyong in Korean) extract, including the antioxidative, nitrite scavenging, and tyrosinase inhibitory effects, as well as the antithrombotic, and angiotensin I converting enzyme(ACE) inhibitory activities. The carbohydrate, protein, fat, and mineral contents of the deer antler were 7.6%, 65.3%, 3.2% and 23.9%, respectively. The electron donating ability(EDA) by the reduction of 2,2'-diphenyl-1-picrylhydrazyl(DPPH) was 67.1%, and the inhibition rate of lipid peroxidation by the thiocyanate method using linoleic acid was 92.1% in 100 mg/ml of extract. The nitrite scavenging effects were pH dependent, and were highest at pH 1.2 and lowest at pH 6.0. The sample inhibition rate against tyrosinase was above 64.0%. The platelet aggregation induced by ADP(adenosine-5'diphosphate) was inhibited up to 51.7%, and the inhibitory effect was dependent on the sample concentration. Lastly, the inhibition rate of ACE was 47.5% in 100 mg/ml of deer antler extract.
야생 능이버섯에 함유되어 있는 생리 기능성 물질들을 탐색, 분리하여 이들을 고부가가치의 건강식품 소재로 활용하고자 덕유산 일대에서 채집한 능이버섯의 물 추출물은 제조하여 몇 가지 생리 기능성을 측정하였다. 능이버섯 자실체의 물 추출물은 항고혈압성 엔지오텐신 전환효소(ACE) 저해 활성과 항통풍성 xanthine 산화효소(XOD) 저해활성이 각각 74.3%와 59.6%로 우수하였다. 그러나 tyrosinase 저해 활성과 항산화 활성, SOD 유사활성 등은 매우 낮거나 없었다. 능이버섯 자실체중의 ACE 저해활성은 자실체 분말의 물현탁액을 $30^{\circ}C$에서 24시간, XOD 저해물질은 $50^{\circ}C$에서 24시간 진탕 시켰을 때 가장 높았다. 이들 두 가지 생리활성 물질을 함유한 능이버섯 물 추출물은 앞으로 건강식품이나 대체 의약 소재 개발에 매우 유용하게 활용 할 것으로 사료된다.
단메밀과 콩 등으로부터 생리기능성 물질을 추출하여 건강식품을 개발하고자 먼저 물과 에탄올을 사용하여 extracts를 추출한 후 엔지오텐신 전환효소 (ACE) 저해활성과 항산화활성 및 SOD-유사활성 등을 측정하였다. 단메밀의 ACE저해 활성과 tyrosinase 저해 활성은 물 추출물에서 각각 53%와 58%로 에탄을 추출물보다 더 높았고 전자공여능은 에탄을 추출물에서 제일 높은 72%를 보였다. 검정종 1호와 태광콩의 ACE 저해 활성과 전자공여능은 물 추출물에서 높았으나 SOD-유사활성은 에탄을 추출물에서 가장 높았다. 단메밀 중의 ACE 저해물질과 tyrosinase 저해 물질들은 20배의 증류수로 35$^{\circ}C$에서 각각 24시간, 36시간 처리했을 때 가장 많이 추출되었고 전자공여능을 나타내는 항산화물질은 5$0^{\circ}C$에서 18시간 처리했을 때 가장 많이 추출되었다. 또한 검정콩 1호의 ACE 저해물질은 2$0^{\circ}C$, 24시간에서 가장 많이 추출되었으나 그 밖의 기능성 물질들은 2$0^{\circ}C$에서 18시간 추출하였을 때 가장 많이 추출되었다.
갈색 느티만가닥버섯으로부터 새로운 생리기능성 물질을 개발하기 위하여 갈색 느티만가닥버섯 자실체의 영양 특성과 생리기능성을 조사하였다. 갈색 느티만가닥 버섯의 자실체에는 조단백질 27.3%, 조지방 2.7%, 탄수화물 55.8%을 함유하고 있었고 유리당 중에서는 전화당이 건조 중량 100 g 당 8.6 mg을, 유기산 중에서는 11,109.3 mg의 사과산을 가장 많이 함유하고 있었다. 갈색 느티만가닥버섯 자실체의 물 추출물과 에탄올 추출물을 제조하여 이들의 생리기능성을 측정한 결과 물 추출물이 66.7%의 항고혈압성 안지오텐신 전환효소 저해 활성(ACE)과 37.3%의 항통풍성 잔틴옥시데이즈 저해활성을 보였으나 에탄올 추출물은 대체로 낮은 생리기능성을 보였다. 또한 느티만가닥버섯의 자실체를 증류수에 넣고 $70^{\circ}C$에서 12시간 추출하였을때 가장 많이(저해활성: 84.4%) 추출되었으나 $50^{\circ}C$에서 12시간 동안 추출하여 얻은 추출물에서도 높은 ACE 저해활성(81.4%)을 보여 경제적 생산면에서 더 유리 할 것으로 사료된다.
참취의 활용 및 생리활성을 증가시킬 수 있는 적정 추출방법을 알아보고자 상온교반, 환류냉각, 가압가열, 저온고압 및 초음파 추출법을 이용하여 추출한 두벌 째 수확 참취 추출물의 생리활성을 비교하였다. 추출 수율은 환류냉각추출, 초음파추출, 가압가열추출, 상온추출, 저온고압추출 순으로 높았다. 폴리페놀, 플라보노이드 함량은 저온고압추출에서 유의적으로 높았고, 상압가열, 고온고압, 초음파추출에서는 대등한 함량을 나타내었다. 페놀화합물 정량의 경우 chlorogenic acid 함량은 가압가열추출에서 유의적으로 높았으며 cynarin 함량의 경우 환류냉각, 저온고압 및 초음파 추출에서 유의적으로 높았고, astragalin 함량의 경우 저온고압추출에서 높은 함량이 검출되었다. Xanthine oxidase(XO), angiotensin I-converting enzyme(ACE), HMG-CoA reductase 저해활성의 경우 저온고압추출 및 초음파 추출물에서 우수한 활성을 나타내었으며, 소화효소 저해활성(${\alpha}$-amylase, trypsin, lipase)에서도 유사한 경향을 나타내었다. 이러한 결과를 종합해 볼 때 저온고압 및 초음파 추출물에서 소재 활용가치가 높을 것으로 사료되며 천연 항산화제 및 기능성 증진을 위한 소재로 이용 가능할 것으로 판단된다.
키토산 올리고당이 ACE 저해활성과 SHR의 혈압에 미치는 영향을 검토하였다. 키토산 올리고당은 모두 ACE 저해활성을 나타내었다. ACE 저해활성$(IC_{50})$은 3량체가 $0.9\;{\mu}mole$로 가장 우수하였고 2량체의 경우에는 $2.4\;{\mu}mole$, 그 외의 올리고당은 모두 $>100\;{\mu}mole$였다. 강력한 ACE 저해제인 Captopril(2-D-mercaptopropanoyl-L-proline)의 인체 투여량을 기준으로 3량체 키토산 올리고당 2.14 mg/kg을 SHR에 강제 경구투여한 바, 4시간 경에 8주령 및 21주령 SHR모두 최저혈압을 보였고 이 때의 혈압 강하는 8주령 SHR $27{\pm}4.8\;mmHg$, 21주령 SHR $36{\pm}4.3\;mmHg$로 나타났다. 따라서 3량체 키토산 올리고당은 2량체 키토산 올리고당과 함께 향후 고혈압 치료제로서 응용가능함이 시사되었다.
This study aimed to determine the degree of hydrolysis and angiotensin-I-converting enzyme (ACE)-inhibitory activity of Giant Jellyfish Nemopilema nomurai (jellyfish) hydrolysates. The degree of hydrolysis using six proteolytic enzymes (Alcalase, Flavozyme, Neutrase, papain, Protamex, and trypsin) ranged from 13.1-36.8% and the inhibitory activities from 20.46-79.58%. Using papain hydrolysate, we newly isolated and characterized ACE-inhibitory peptides with a molecular weight of 3,000-5,000 Da that originated from jellyfish collagen. The purified peptide (FII-b) was predicted to be produced from an alpha-2 fragment of the type IV collagen of jellyfish. The N-terminal sequence of FII-b was Asp-Pro-Gly-Leu-Glu-Gly-Ala-His-Gly- and showed 87% identity to the collagen type IV alpha-2 fragment of Rattus norvegicus and a predicted protein from Nematostella vectensis, indicating that the ACE-inhibitory peptide originated from the collagen hydrolysate and had an $IC_{50}$ value of 3.8 ${\mu}g$/mL. The primary structure of the fragment is now being studied; this peptide represents an interesting new type of ACE inhibitor and will provide knowledge of the potential applications of jellyfish components as therapies for hypertension.
버섯으로부터 생리 기능성이 우수한 건강 소재나 대체의약을 개발하기 위하여 백색 느티만가닥버섯의 자실체의 물추출물과 에탄올추출물을 제조한 후 이들의 생리기능성을 측정하였다. 시료 버섯 자실체의 물 추출물의 ACE 저해활성이 60.5%로 에탄올 추출물의 저해활성 보다 높았다. 또한 SOD 유사활성과 Xanthine oxidase 저해 활성도 물추출물에서 각각 24.1%와 23.0%을 보였다. 백색 느티만가닥버섯 자실체에 함유되어있는 ACE 저해 물질은 자실체 분말을 물에 1 : 40으로 현탁 시킨 후 $50^{\circ}C$에서 12시간 추출했을 때 가장 많이 추출되었고 이때 ACE 저해활성은 80.5% 이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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