고지방 식이 유도 비만 흰쥐에 Monascus purpureus균주로 발효시킨 참당귀 추출물을 식이에 첨가하였을 때 나타나는 체중 및 내장지방의 감소, 혈중 및 조직 내 중성지질 및 과산화지질 수준에 미치는 영향을 평가하였다. FAG섭취로 인해 체중증가 및 내장지방 축적 비율을 효과적으로 낮추었으며, 간 기능 지표로 활용되는 혈중 AST, ALT, LDH 및 ALP 활성 변화는 정상 수치와 비슷한 수준으로 감소되었다. FAG를 섭취함으로서 혈중 중성지질 농도가 정상 수준으로 감소하였으며, 혈중 leptin 호르몬 함량 또한 정상 수치와 비슷한 수준으로 증가하였다. 고지방 식이 섭취로 인한 각 조직 과 혈청 내 과산화지질(TBARS)을 측정한 결과 고지방 식이만 섭취한 C군에 비해 각 실험군에서 유의적으로 감소하였으며, 특히 FAG10군에서 가장 낮은 함량을 나타내었다. Hematoxylin과 eosin 염색 및 Oil red O 염색을 통해 FAG를 섭취함에 따라 간장 내 지질침착도의 감소를 확인였으며, 부고환 주변 지방 조직의 hematoxylin과 eosin 염색으로 지방세포의 크기가 감소되었음을 확인하였다.
The internal structures of "Chunho", "Kangwhal" and "Dangui" and their original plants had been compared with each other in the prior report. Coumarin derivatives, khellactone from the roots of Angelica purpuraefolia $C_{HUNG}$ and decursin and decursinol from A. gigas $N_{AKAI}$ were also isolated. In this report, we made a simple and convenient identification method for the powdered drugs of several Angelica genus by using a thin layer chromatogrophic technique. The ehter extract of the powdered drugs were applied to a silica gel plate, and was developed with n-hexane and ethyl acetate (1:1) mixture. The characteristic U.V. absorption patterns of each drug were shown.
Karyotype analysis and chromosomal localization of 5S and 45S rDNAs using multi-color fluorescence in situ hybridization (McFISH) technique were carried out in two Angelica species. The numbers of diploid chromosomes were the same in two same in two species as 2n=22, however the lengths of chromosomes were varied from 4.25 to 6.50 ${\mu}{\textrm}{m}$ in A gigas and 4.95 to 8.50 ${\mu}{\textrm}{m}$ in A acutiloba. The chromosomes of A. gigas were composed of five metacentric and six submetacentric pairs, while those of A. acutiloba were six metacentic, one submetacentric and four subtelocentric paris. In FISH experiments, the numbers and size of 45S rDNA signals were varied between two species, however dach signal of the 5S rDNA was observed in two species.
본 연구는 야생 참당귀의 무균묘 확보, 대량생산체계 확립 및 품종개발을 위해 기내발아와 기관유도에 미치는 PGRs의 영향을 알아보고자 실시하였다. 종자발아 실험은 전처리로 $GA_3$ 침지시간(0, 24h, 48h, 72h) 및 종자의 처리 방법(대조구, 기계적가상 처리, 표면 메탄올 가열 소독법)을 달리하여 실시하였다. 그 결과 $GA_3$에 침지시키지 않고 메탄올 가열법으로 처리한 종자를 0.5 mg/L $GA_3$가 첨가된 배지에서 가장 높은 발아율(15%)을 보였으나 저조하여 발아율 향상을 위해 초음파(frequency 80 KHz) 및 PGRs($GA_3$, BA, TDZ)를 처리하였다. 그 결과 초음파 처리 후 메탄올 가열법으로 처리 한 종자를 0.1 mg/L $GA_3$가 첨가된 배지에 치상하여 발아율(60%)을 증진 시킬 수 있었다. 기내 발아된 식물체로부터 기관유도에 미치는 PGRs(2,4-D, NAA, TDZ, BA)의 영향을 살펴본 결과 캘러스 유도는 줄기, 뿌리, hypocotyl을 1.0 mg/L NAA + 0.5 mg/L BA 처리구에 치상하였을 때 높은 유도율을 보였다. 신초와 뿌리유도는 각각 hypocotyl(PGRs 무첨가)과 뿌리(0.1 mg/L NAA 첨가구)에서 효율적으로 분화되었다. 또한 줄기(1.0 mg/L 2,4-D 처리구)와 hypocotyl(0.1 mg/L NAA 처리구) 조직에서 체세포배가 발생되어 MS 기본배지에 계대배양하여 정상적인 식물체로의 육성이 가능하였다. 본 연구를 통해 무균묘 확보 및 대량생산 체계를 확립하였으며 이를 통해 신품종 개발에 유용할 것으로 판단된다.
골수독성은 항암제에 의한 화학요법이나 벤젠 등의 화학물질에 노출되어 발생하는 부작용이다. 골수독성이 발생하면 백혈구 수가 감소하여 면역기능이 저하되고 감염이나 종양발생 위험이 높아진다. 당귀 추출물(Angelica gigas Nakail extract, AGNEX)과 커피 생두 추출물(green coffee bean, GCBE)은 면역기능에 대한 효과뿐만 아니라 항암, 항산화 등의 많은 효과가 있다. 본 실험에서는 벤젠으로 유도된 골수독성에 대해 AGNEX와 GCBE의 예방 효과를 Sprague Dawley rats (SD rat) in vivo실험에서 확인하였다. SD rat (6주, N=9/group)에 2일 1회 benzene (1 ml/kg에 corn oil 1:1 혼합)을 복강 내 투여 하였으며 AGNEX (12 mg/kg)와 GCBE (6, 12, 24 mg/kg)는 35일 동안 매일 경구 투여 하였다. 예방 효과를 보기 위해 AGNEX (12 mg/kg)와 GCBE (6, 12, 24 mg/kg)를 benzen 투여 전에 경구 투여 하였으며 그 결과, AGNEX 12 mg/kg과 GCBE 12 mg/kg은 백혈구, 림프구 및 과립구 감소에 대한 예방 효과를 입증했다. 또한, 비장, 간 체중 변화와 비장 손상에서도 특이적으로 보호되었다. 이러한 보호 효과를 통해 AGNEX와 GCBE는 면역 기능을 향상시켜 골수 독성을 예방할 수 있는 것으로 확인되었다.
Purpose : To compare the skin damage recovery efficacy of natural Angelicae Gigantis Radix extract (N-AGR) and cultivated A. Gigantis Radix extract (C-AGR). Through this, we confirmed whether the quality standards of herbal medicines recorded in the classic books make a difference in the experimental efficacy using epithelial cells. Methods : The quality standards of medicinal herbs in the classic books and the cultivation and processing conditions of two types of A. gigas were compared. After inducing oxidative stress with H2O2, cytoprotective property of N-AGR and C-AGR were evaluated through cell viability. Additionally, after wound formation of epithelial JB6 cells, N-AGR and C-AGR were treated to evaluate wound healing efficacy. Result : The natural A, gigas met the excellent quality standards of the classic books. N-AGR inhibited cell death by oxidative stress induced by H2O2, and was superior to C-AGR. Both N-AGR and C-AGR showed dose-dependent wound healing efficacy, but N-AGR was significantly superior to C-AGR. Conclusions : Through the oxidative stress of skin and skin wound healing efficacy experiments using epithelial cells, natural A. gigas showed superior efficacy compared to cultivated A. gigas.
This study were carried out to find bolting response of cultivation in different regions and to isolate FLC (FLOWERING LOCUS C) homologs in Angelica gigas Nakai. The mean temperature of different regions, ordering in altitude, were as follows: 100 m > 350 m > 530 m > 700 m. The largest amount of rainfall was occurred in the region of 350 m while the longest time of sunshine was occurred in the region of 100 m. The content of soil chemical properties in regions showed pH 6.2 ~ 7.4, T-N 0.17 ~ 26, organic mater $1{\sim}32gkg^{-1}$, $P_2O_5$${151{\sim}664_{mgkg}}^{-1}$, exchangeable potassium and calcium and magnesium were 0.78 ~ 1.15, 3.9 ~ 10.0, ${0.7{\sim}3.2_{cmol}}^{+kg-1}$. L5 line of A. gigas was occurred in bolting at all regions, but the bolting ratio was 60.0% in 700 m region with non-mulching treatment. Manchu of A. gigas was not occurred in bolting at all regions. The accumulation bolting ratio of L5 line by non-mulching was higher than that of mulching as 90.4% and 72.8% in 100 m region. The MADS-box transcription factor FLC is one of the well-known examples as a strong floral repressor. We decided to isolate FLC homologs from A. gigas as a starting point of flowering mechanism research of this plant. We have isolated two RT-PCR products which showed very high amino acid sequence homology to Arabidopsis FLC.
Monascus purpureus 균주에 의해 발효된 당귀분말을 식이 중에 5% 수준으로 첨가하여 30% 알코올과 함께 4주간 흰쥐에 급여한 후 혈중 지질 농도 및 조직 내 산화 스트레스에 미치는 영향에 대하여 검토하였다. 혈중 중성지질 농도 및 유리 지방산 농도는 알코올 대조군(Alc)에서의 증가가 알코올 실험군에서 모두 감소하였고, 특히 발효당귀군(AFAG)에서 낮은 감소수치를 보였다. 혈중 총 콜레스테롤 농도는 전반적으로 유의적인 차이는 없었으나, HDL-cholesterol 농도에서 발효당귀군(AFAG)이 증가수치를 나타내었다. 간장, 심장, 비장,신장, 고환 및 혈청에서 생체막 과산화지질 생성 정도는 정상군(N)에 비해 알코올 대조군(Alc)에서 유의적으로 증가하였고, 이러한 증가는 발효당귀군(AFAG)과 양성 대조군(ASM)에서 정상 수준으로 회복되었다. 간 조직 내 내인성 항산화 물질인 glutathione 농도는 알코올 대조군(Alc)에서 유의적으로 감소하였고, 발효당귀군(AFAG)에서 유의적으로 증가하여, 과산화 지질 생성정도와 glutathione 농도는 유의적인 차이가 인정되었다. 이상의 실험결과 발효당귀는 알코올 투여 동물실험에서 혈중 지질 개선효과는 물론 조직 내 항산화 활성증가로 산화스트레스를 경감시키는 효능이 있는 것으로 사료되며, 향후 간 독성 개선에 효능을 가지는 건강식품 개발 가능성이 높은 소재로 판단되어진다.
유가식배양을 통한 고농도배양에서 계면활성제와 산소전달물질의 첨가는 세포의 고밀도와 배지의 고점도로 인해 발생하는 nutrient의 물질전달제한과 산소부족현상을 효과적으로 해결하였다. Pluronic 10R-5는 Pluronic F-68과 같은 triblock copolymer 구조이며 세포생장의 저해를 나타내지 않았다. 그러나 diblock copolymer구조이며 소수성 부분이 hydrocarbon block인 Plurafac A-38은 세포의 생장을 저해함을 관찰할 수 있었다. 따라서 장기간의 유가식배양이나 perfusion 배양을 수행할 경우 세포의 생존도를 증대시켜 유용물질의 생산성을 높일 수 있으며 여러 형태의 bioreactor에서 고농도 배양을 가능케 하여 유용물질 생산성을 높일수 있을 것이라고 기대된다.
Angelica gigas Nakai (Korean danggui), a member of the Umbelliferae family, is a Korean traditional medicinal plant whose roots have been used for treating gynecological diseases. Transcriptomics is the study of the transcriptome, which is the complete set of RNA transcripts that are produced by the genome, using high-throughput methods, such as microarray analysis. In this study, transcriptome analysis of A.gigas Nakai was carried out. Transcriptome sequencing and assembly was carried out by using Illumina Hiseq 2500, Velvet and Oases. A total of 109,591,555 clean reads of A. gigas Nakai was obtained after trimming adaptors. The obtained reads were assembled with an average length of 1,154 bp, a maximum length of 13,166 bp, a minimum length of 200 pb, and N50 of 1,635 bp. Functional annotation and classification was performed using NCBI NR, InterprotScan, KOG, KEGG and GO. Candidate genes for phenylpropanoid biosynthesis were obtanied from A.gigas transcriptome and the genes and its proteins were confirmed through the NCBI homology BLAST searches, revealing high identity with other othologous genes and proteins from various plants pecies. In RNA sequencing analysis using an Illumina Next-Seq2500 sequencer, we identified a total 94,930 transcripts and annotated 71,281 transcripts, which provide basic information for further research in A.gigas Nakai. Our transcriptome data reveal that several differentially expressed genes related to flower color in A.gigas Nakai. The results of this research provide comprehensive information on the A.gigas Nakai genome and enhance our understanding of the flower color related gene pathways in this plant.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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