• 제목/요약/키워드: Ames Test

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Genetic Toxicity Test of 1,2-Dibromoethane by Ames, Micronucleus, Comet Assays and Microarray Analysis

  • Kim, Ki-Y.;Kim, Ji-H.;Kwon, Kyoung-J.;Go, Seo-Y.;Min, Kyung-N.;Lee, Woo-S.;Park, Sue-N.;Shee, Yhun-Y.
    • Biomolecules & Therapeutics
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    • 제14권4호
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    • pp.246-252
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    • 2006
  • 1,2-Dibromoethane(DBE) has been widely used as a soil fumigant, an additive to leaded gasoline and an industrial solvent. In this study, we have carried out in vitro genetic toxicity test of 1,2-dibromoethane and microarray analysis of differentially expressed genes in response to 1,2-dibromoethane. 1,2-Dibromoethane showed mutations in base substitution strain TA1535 both with and without exogenous metabolic activation. 1,2-Dibromoethane showed mutations in frame shift TA98 both with and without exogenous metabolic activation. 1,2-Dibromoethane showed DNA damage based on single cell gel/comet assay in L5178Y cells both with and without exogenous metabolic activation. 1,2-Dibromoethane increased micronuclei in CRO cells both with and without exogenous metabolic activation. Microarray analysis of gene expression profiles in L5178Y cells in response to 1,2-dibromoethane selected differentially expressed 241 genes that would be candidate biomarkers of genetic toxic action of 1,2-dibromoethane.

한국산 현미 및 율무 추출물에 의한 돌연변이 및 인체 암세포주 증식 억제 효과 (Inhibitory Effects of Methanol Extracts from Korean Orysa sartiva and Coix lachryma-jobi var. ma-yuen on Mutagenicity and Growth of Human Cancer Cells)

  • 임선영
    • 생명과학회지
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    • 제18권10호
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    • pp.1415-1419
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    • 2008
  • 본 연구에서는 비교적 양질의 영양소를 가진 현미 및 율무 메탄올 추출물의 항돌연변이 및 인체 암세포 증식억제 효과에 대하여 알아보고자 하였다. Ames test를 이용한 돌연변이 억제 실험에서 $AFB_1$ (0.6 mg/plate)에 대해 현미 메탄올 추출물은 농도의 증가와 더불어 돌연변이 억제 효과가 증가하여 첨가농도 2.5 및 5 mg/plate일 때 각각 70% 및 76%의 억제 효과를 나타내었다. 율무 메탄올 추출물의 경우도 첨가농도 2.5 및 5 mg/plate일 때 각각 60% 및 76%의 항돌연변이 효과를 관찰 할 수가 있었다. 직접돌연변이원인 MNNG에 대해서도 현미 및 율무 메탄올 추출물들은 첨가농도 5 mg/plate에서 각각 79% 및 69%의 항돌연변이 효과를 나타내었다. 인체 위암세포(AGS)에 현미 메탄올 추출물을 5, 10, 20 mg/ml의 농도별로 처리했을 때 농도 의존적으로 암세포 증식 억제 효과가 증가하였다. 율무 메탄올 추출물의 경우도 현미 메탄올 추출물과 유사하게 농도 의존적으로 암세포의 증식을 억제시켰으며 첨가농도 20 mg/ml일 때 77%의 증식 억제효과를 살펴 볼 수가 있었다. 인체 결장암세포(HT-29)의 경우에서도 이들 현미 및 율무추출물은 낮은 농도에서부터 그 억제효과가 나타나 농도 의존적으로 암세포의 증식을 억제시켰다.

물 및 소금 종류를 달리한 된장의 메탄올 추출물에서의 항돌연변이 효과 (Antimutagenic Effects on Methanol Extracts of Doenjang Made with Various Kinds of Water or Salt)

  • 이수진;이경임;문숙희;박건영
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제37권6호
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    • pp.691-695
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    • 2008
  • 물 종류를 달리한 된장의 메탄올 추출물로 돌연변이유발 억제효과를 관찰한 결과 일반 수돗물로 담근 된장보다 게르마늄수와 고로쇠나무 수액으로 담근 된장이 Ames test와 SOS chromotest에서 높은 항돌연변이 효과를 나타내었다. 즉 Ames 실험에서 일반 재래식된장의 메탄올 추출물을 1 mg/plate 농도로 사용하였을 때 S. Typhimurium TA100에서 $AFB_1$의 돌연변이유발 억제작용을 나타내지 않았으나 게르마늄수 된장과 고로쇠나무 수액을 첨가한 된장의 메탄올 추출물은 $56{\sim}62%$ 억제되었으며 5 mg/plate 농도에서도 일반 된장보다 억제효과가 높았다. 또한 E. coli PQ37에서 MNNG의 돌연변이유발 억제효과도 일반 된장보다 게르마늄수 된장과 고로쇠나무 수액된장에서 더 높게 나타났다. S. Typhimurium TA100에서 MNNG를 돌연변이원으로 사용한 Ames test에서 천일염을 사용한 된장보다 구운 소금과 죽염을 사용한 것이 억제효과가 컸으며 1 mg/plate와 5 mg/plate 농도에서 1회 구운 죽염이 9회 구운 죽염을 첨가한 된장 추출물보다 항돌연변이 효과가 크게 나타났다. SOS chromotest에서도 1회 구운 죽염 된장은 다른 소금 된장 추출물에 비하여 MNNG의 돌연변이를 가장 크게 억제하였다. 이상의 결과에서 된장을 담글 때 사용하는 물과 소금의 종류에 따라 항돌연변이 효과는 차이가 있는 것을 알 수 있었으며 향후 된장에 물과 소금이 미치는 다양한 생리적 기능에 대한 더 많은 연구가 필요할 것으로 사료된다.

Temporal and Spatial Distribution of Particulate Carcinogens and Mutagens in Bangkok, Thailand

  • Pongpiachan, Siwatt;Choochuay, C.;Hattayanone, M.;Kositanont, C.
    • Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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    • 제14권3호
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    • pp.1879-1887
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    • 2013
  • To investigate the level of genotoxicity over Bangkok atmosphere, $PM_{10}$ samples were collected at the Klongchan Housing Authority (KHA), Nonsree High School (NHS), Watsing High School (WHS), Electricity Generating Authority of Thailand (EGAT), Chokchai 4 Police Station (CPS), Dindaeng Housing Authority (DHA) and Badindecha High School (BHS). For all monitoring stations, each sample covered a period of 24 hours taken at a normal weekday every month from January-December 2006 forming a database of 84 individual air samples (i.e. $12{\times}7=84$). Atmospheric concentrations of low molecular weight PAHs (i.e. phenanthrene, anthracene, pyrene and fluoranthene) were measured in $PM_{10}$ at seven observatory sites operated by the pollution control department of Thailand (PCD). The mutagenicity of extracts of the samples was compared in Salmonella according to standard Ames test method. The dependence of the effects on sampling time and on sampling location was investigated with the aid of a calculation of mutagenic index (MI). This MI was used to estimate the increase in mutagenicity above background levels (i.e. negative control) at the seven monitoring sites in urban area of Bangkok due to anthropogenic emissions within that area. Applications of the AMES method showed that the average MI of $PM_{10}$ collected at all sampling sites were $1.37{\pm}0.10$ (TA98; +S9), $1.24{\pm}0.08$ (TA98; -S9), $1.45{\pm}0.10$ (TA100; +S9) and $1.30{\pm}0.09$ (TA100; -S9) with relatively less variations. Analytical results reconfirm that the particulate PAH concentrations measured at PCD air quality monitoring stations are moderately low in comparison with previous results observed in other countries. In addition, the concept of incremental lifetime particulate matter exposure (ILPE) was employed to investigate the potential risks of exposure to particulate PAHs in Bangkok atmosphere.

Trp-P-1과 2-AF에 대한 산채류 생즙의 항돌연변이 효과 (Antimutagenic Effects of the Edible Mountain Herb Juices Against Trp-P-1 and 2-AF)

  • 한규석;함승시;정의호;이해금
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제7권4호
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    • pp.161-168
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    • 1992
  • Salmonella Typhimurium TA98과 TA100 두 균주를 이용한 Ames Assay를 실시하여 신채류 생즙의 돌연변이원성과 돌연변이 억제효과를 검토하였다. 돌연변이 유발물질로는 Trp-P-1과 2-AF가 사용되었다. 쑥, 들미나라, 두릅, 돌나물 및 도라지의 생즙은 돌연변이원성을 나타내지 않았다. 산채류 생즙의 항돌연변이원성 효과는 쑥, 들미나리, 두릅이 가장 강하였으며 다음은 돌나물이었고, 도라지는 거의 항돌연변이효과를 나타내지 않았다. 이와 같은 결과는 TA98과 TA100을 이용한 실험에서 유사한 결과를 보였으며, 돌연변이 물질로 Trp-P-1을 사용하여 실험한 결과가 2-AF를 사용한 실험결과에 비하여 돌연변이 억제효과가 강하게 나타났다.

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General and Genetic Toxicology of Enzyme-Treated Ginseng Extract - Toxicology of Ginseng Rh2+ -

  • Jeong, Mi-Kyung;Cho, Chong-Kwan;Yoo, Hwa-Seung
    • 대한약침학회지
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    • 제19권3호
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    • pp.213-224
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    • 2016
  • Objectives: Ginseng Rh2+ is enzyme-treated ginseng extract containing high amounts of converted ginsenosides, such as compound k, Rh2, Rg3, which have potent anticancer activity. We conducted general and genetic toxicity tests to evaluate the safety of ginseng Rh2+. Methods: An acute oral toxicity test was performed at a high-level dose of 4,000 mg/kg/day in Sprague-Dawley (SD) rats. A 14-day range-finding study was also conducted to set dose levels for the 90-day study. A subchronic 90-day toxicity study was performed at dose levels of 1,000 and 2,000 mg/kg/day to investigate the no-observed-adverse-effect level (NOAEL) of ginseng Rh2+ and target organs. To identify the mutagenic potential of ginseng Rh2+, we conducted a bacterial reverse mutation test (Ames test) using amino-acid-requiring strains of Salmonella typhimurium and Escherichia coli (E. coli), a chromosome aberration test with Chinese hamster lung (CHL) cells, and an in vivo micronucleus test using ICR mice bone marrow as recommended by the Korean Ministry of Food and Drug Safety. Results: According to the results of the acute oral toxicity study, the approximate lethal dose (ALD) of ginseng Rh2+ was estimated to be higher than 4,000 mg/kg. For the 90-day study, no toxicological effect of ginseng Rh2+ was observed in body-weight changes, food consumption, clinical signs, organ weights, histopathology, ophthalmology, and clinical pathology. The NOAEL of ginseng Rh2+ was established to be 2,000 mg/kg/day, and no target organ was found in this test. In addition, no evidence of mutagenicity was found either on the in vitro genotoxicity tests, including the Ames test and the chromosome aberration test, or on the in vivo in mice bone marrow micronucleus test. Conclusion: On the basis of our findings, ginseng Rh2+ is a non-toxic material with no genotoxicity. We expect that ginseng Rh2+ may be used as a novel adjuvant anticancer agent that is safe for long-term administration.

감마선 조사 황기, 백출 및 승마 열수 추출물의 in vitro 유전독성학적 안전성 평가 (Genotoxicological Safety of Hot Water Extracts of the γ-Irradiated Astragali Radix, Atractylodes Rhizoma, and Cimicifugae Rhizoma in Vitro)

  • 박혜란;함연호;정우희;정일윤;조성기
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제31권5호
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    • pp.910-916
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    • 2002
  • 생약재의 식품ㆍ생물 산업적 이용증대에 따라 생약재의 안전한 위생화 기술이 요구되고 있다 본 연구에서는 생약재의 위생화 기술로서 방사선 조사기법의 활용 가능성을 검토하기 위하여, 감마선을 조사한 생약재 3종에 대한 유전독성학적 안전성을 평가하고자 하였다. 공시 재료는 오염유기체 완전 구제선량인 10 kGy의 감마선을 조사시킨 황기, 백출 및 승마로 하였으며, 각각의 열수 추출물의 유전독성을 in vitro 시험으로 평가하였다. 유전독성 평가는 Salmonella typhimurium TA98 및 TA100 균주를 이용한 복귀 돌연변이 시험(Ames test)과 Chiilese hamster ovary(CHO) 세포를 이용한 in vitro 소핵 유발 시험으로 시행하였다. 각각의 시험은 59 nix를 첨가한 대사 활성화 시스템과 첨 가하지 않은 비활성화 시스템으로 구분하여 실시하였으며, 시료의 최고 처리 농도는 복귀돌연변이 시험에서는 5mg/plate로, 소핵유발시험에서는 50%의 세포증식 억제를 나타내는 농도(1 mg/mL)로 하였다. 복귀 돌연변이 시험 결과 대사 활성화 및 비활성화의 경우 모두에서 각 시료에 의한 복귀변이 집락수의 증가를 인정할 수 없었으며, 각 용량단계에서 감마선 조사군과 비조사군 간의 차이도 볼 수 없었으므로 음성으로 판정하였다. 소핵 유발시험에서도 음성 대조군 및 감마선 조사군과 비조사군 모두 각 용량 단계에서 세포 내에 생성된 소핵의 빈도가 3% 이하로 나타남에 따라, 시료에 의한 소핵의 유발을 인정할 수 없었으므로 음성으로 판정하였다 따라서 감마선이 조사된 각각의 시료는 직접 및 간접 돌연변이원으로 작용하지 않으며 세포유전 독성을 나타내지 않음을 확인할 수 있었다. 향후, 생체내 유전독성 시험, 만성독성 시험 및 생식독성 시험 등의 추가적인 in vivo실험이 행하여진다면 감마선 조사 생약재의 안전성을 보다 명확히 밝힐 수 있을 것으로 생각된다.

MUTAGENIC EVALUATION OF PRANOPROFEN, A NEW ANTI-INFLAMMATORY AGENT

  • Moon, Hwa-Hwey;Kim, Pu-Young;Yun, Tai-Bo;Jo, Dae-Hyun;Park, Han-Soo;Heo, Ok-Soon;Kim, Soon-Han;Choi, Suk-Hee
    • Toxicological Research
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    • 제3권1호
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    • pp.15-26
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    • 1987
  • The mutagenicity of pranoprofen, a new antiinflammatory agent primarily used in Japan, was evaluated by employing several different methods such as the Ames test, micronucleus test, and the sister chromatid exchange test. For the Ames test, various doses of pranoprofen (5 and 1 mg, 100, 10, and 1 ${\mu}$g per plate) were applied, with or without the mammalian liver S-9 fraction, to the S. typhimurium LT2. For the micronucleus test, 24 hours after administering the various doses of pranoprofen (200, 100, and 50 mg/kg) to male mice by aral intubation, the femura of each group were isolated and the bone marrow samples were prepared. The micronucleated red cells and the ratio of the polychromatic versus the normochroomatic cells were counted. For the sister chromatid exchange test, the maximal non-cytotoxic concentrations (10 to 0.1 mM pranoprofen) were applied to the culture media of the Chinese Hamster Ovary (CHO) cells for 24 hrs. The numbers of revertant colonies did not increase with the increasing doses of pranoprofen when teseted with various strains of S. typhimurium. In the micronucleus test employing mice, the pranoprofen was identkfied to be a non-clastogen and a non-spindle poison. In the sister chromatid exchange test employing the cultured CHO cells, the pranoprofen did not increase the incidences of chromosomal abnormality. Based on these results, pranoprofen was found to have no mutagenic activity.

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Assessment of genotoxicity of Ssanghwa-tang, an herbal formula, by using bacterial reverse mutation, chromosome aberration, and in vivo micronucleus tests

  • Jang, Ji-Hye;Seo, Chang-Seob;Lee, Mee-Young;Shin, Hyeun-Kyoo;Han, Su-Cheol;Ha, Hyekyung
    • 대한한의학회지
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    • 제42권4호
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    • pp.25-39
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    • 2021
  • Objectives: Ssanghwa-tang (SHT) is a traditional herbal formula comprising nine medicinal herbs, and it is used for reducing fatigue in Korea. SHT exerts various effects such as anti-inflammatory, antioxidant, and anti-aging activities, and protection against acute hepatotoxicity. However, the genotoxicity of SHT has not yet been established. Methods: Ten components were identified in SHT water extract by using high-performance liquid chromatography analysis. We assessed the genotoxicity of SHT by using bacterial reverse mutation (Ames test), chromosome aberration, and in vivo micronucleus tests. Results: The contents of paeoniflorin, glycyrrhizin, and liquiritin apioside in SHT were 15.57, 6.94, and 3.48 mg/g extract, respectively. SHT did not increase the revertant colonies of Salmonella typhimurium and Escherichia coli strains in the presence or absence of metabolic activity. Although SHT did not induce structurally abnormal chromosomes in Chinese hamster lung (CHL) cells in the presence of metabolic activity, the number of structurally aberrated chromosomes increased dose-dependently in the absence of metabolic activity. In the in vivo micronucleus test, SHT did not affect the formation of micronuclei compared with the vehicle control. Conclusions: Genotoxicity of SHT was not observed in the Ames test and in vivo micronucleus test. However, based on the results of chromosome aberration test, it can be presumed that SHT has the potential to induce genotoxicity because it induced structurally abnormal chromosomes in the absence of metabolic activity.