Lipids of Job's tears (Yullmoo) were extracted by the mixture of chloroform: methanol (2:1, v/v) and from these lipids, triglycerides were separated by column chromatography (Sephadex G-25 column) and then confirmed by thin layer chromatography (TLC) and reconfirmed by gas chromatography (GC). The triglycerides were fractionated into 6 groups on the basis of their partition numbers (PN) by reverse phase high performance liquid chromatography (HPLC) on a column Shimpack CLC-ODS using tetrahydrofuran-acetonitril (25:75) mixture as a solvent. Each of these collected fractions gave one to two peaks in the GC chromatograms according to the acyl carbon number (CN) of the triglyceride and fatty acid composition of the triglycerides were also analyzed by GC. From the results, the major triglycerides of Job's tears lipids were estimated to be C18:1 C18:2 C18:2 (OLL, 38.2%), C16:0 C18:2 C18:3 (PLLn, 15.7%), C18:1 C18:1 C18:2 (OOL, 12.6%).
This study aimed to enhance ethanol productivity of Saccharomyces cerevisiae through genome editing using CRISPR/CAS9. To increase ethanol productivity, ACC1, ELO1, and OLE1 were overexpressed in S. cerevisiae using the CRISPR/CAS9 system. The strains overexpressing ACC1, ELO1, and OLE1 survived up to 24 h in YPD medium supplemented with 18% ethanol. Moreover, the ethanol yields in strains overexpressing ACC1 (428.18 mg ethanol/g glucose), ELO1 (416.15 mg ethanol/g glucose), and OLE1 (430.55 mg ethanol/g glucose) were higher than those in the control strains (400.26 mg ethanol/g glucose). In conclusion, the overexpression of these genes increased the viability of S. cerevisiae at high ethanol concentrations and the ethanol productivity without suppressing glucose consumption.
Lymphoma is one of the most curable types of cancer. However, drug resistance is the main challenge faced in lymphoma treatment. Peroxisomal acyl-CoA oxidase 1 (ACOX1) is the rate-limiting enzyme in fatty acid ${\beta}$-oxidation. Deregulation of ACOX1 has been linked to peroxisomal disorders and carcinogenesis in the liver. Currently, there is no information about the function of ACOX1 in lymphoma. In this study, we found that upregulation of ACOX1 promoted proliferation in lymphoma cells, while downregulation of ACOX1 inhibited proliferation and induced apoptosis. Additionally, overexpression of ACOX1 increased resistance to doxorubicin, while suppression of ACOX1 expression markedly potentiated doxorubicin-induced apoptosis. Interestingly, downregulation of ACOX1 promoted mitochondrial location of Bad, reduced mitochondrial membrane potential and provoked apoptosis by activating caspase-9 and caspase-3 related apoptotic pathway. Overexpression of ACOX1 alleviated doxorubicin-induced activation of caspase-9 and caspase-3 and decrease of mitochondrial membrane potential. Importantly, downregulation of ACOX1 increased p73, but not p53, expression. p73 expression was critical for apoptosis induction induced by ACOX1 downregulation. Also, overexpression of ACOX1 significantly reduced stability of p73 protein thereby reducing p73 expression. Thus, our study indicated that suppression of ACOX1 could be a novel and effective approach for treatment of lymphoma.
Seo, Dong-Joo;Kim, Jeong-Mi;Kim, Tae-Hyuk;Baek, Jong-Mi;Kim, Tae-Woo;Kim, Hyun-Sook;Choe, Myeon
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.39
no.11
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pp.1604-1610
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2010
We investigated the anti-obesity effects of Foeniculum fructus water extract on body weight, epididymal adipocyte size, plasma lipid levels and activities of key enzymes such as lipoprotein lipase (LPL), acyl-CoA synthetase (ACS) in high fat diet-induced obese mice. Experimental groups were normal diet group (ND), high fat diet group (HFD), high fat diet with 0.05% orlistat group (HFDO), and high fat diet with 0.5% Foeniculum fructus group (HFDF). Eleven-weeks feeding with HFD resulted in significant increase in lipid levels, body weight, liver and epididymal adipose tissue weight, compared with the ND group. Diet containing Foeniculum fructus water extract significantly reduced plasma total cholesterol, triglyceride and glucose concentrations as well as body weight, liver and epididymal adipose tissue weights. Plasma LDL cholesterol levels were significantly lower in the HFDF group than those in HFDO group. LPL activities elevated by a high fat diet were significantly decreased by Foeniculum fructus water extract administration. ACS activities decreased in the high fat diet group and markedly increased in the Foeniculum fructus water extract administered group. All things considered, Foeniculum fructus water extract efficiently inhibits the inflow of fatty acid into the cell, and activates metabolic process that uses fatty acids flowing as an energy source. Thus, Foeniculum fructus water extract may have great potential as a novel anti-obesity agent.
Ahn, Seok Min;Shin, Woo Chul;Jeong, Han Bin;Seo, Young Jun;Jeong, Hwal Rim;Yoon, Jong Hyung;Bae, Eun Ju;Lee, Hong Jin
Journal of The Korean Society of Inherited Metabolic disease
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v.18
no.1
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pp.1-12
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2018
Purpose: Disorders of organic acid metabolism have various clinical manifestations and it may be life-threatening. The prognoses of affected children are dependent on early diagnosis and treatment. We report this study to find out detection rate of referred samples, clinical manifestations and age distribution after introduction of neonatal screening test using tandem mass spectrometry in Hallym University Chuncheon Sacred Heart Hospital during 8 years and 9 months. Methods: The 2,794 patients referred from Jan. 2007 to Sep. 2015 were divided into four groups according to age. We conducted organic acid analysis of urine samples of patients and analyzed clinical manifestations and distributions of age at the diagnosis. For patients with ambiguous results, reanalysis of urine organic acid after diet restriction, protein loading and restriction, has been done. Results: A total of 626 patients with 20 disorders were diagnosed. Mitochondrial disorders (482 patients) were the most common diagnosis, followed by ketolytic defects (67), 3-hydroxyisobutyric aciduria (32), EPEMA syndrome (8), 3-methylcrotonyl glycinuria (7), glutaric aciduria type II (6) and type I (4), methylmalonic aciduria (3), isovaleric aciduria (3) and medium chain acyl-CoA dehydrogenase deficiency (3). Conclusion: As neonatal screening test using tandem mass spectrometry is increasingly common and medical environment is changed, detection rate of disorders of organic acid metabolism in this study has decreased compared to previous report. Because the deterioration can be prevented by early diagnosis and treatment, many pediatricians have to pay special attention to possibility of the disorders and make an effort for early diagnosis in clinical setting.
Complete oxidation of fatty acid in the liver of ketotic cows was investigated. Serum non-esterified fatty acid (NEFA), beta-hydroxybutyric acid (BHBA) and glucose concentrations were measured using biochemical techniques. Carnitine palmitoyl transferase II (CPT II), 3-hydroxy acyl-CoA dehydrogenase (HAD) and oxaloacetic acid (OAA) concentrations in the liver were detected by ELISA. Serum glucose was lower in ketotic cows than controls (p<0.05). Serum BHBA and NEFA concentrations were higher in ketotic cows than controls (p<0.05). OAA, CPT II, and HAD contents in the liver of ketotic cows were lower than in controls (p<0.05). There were negative correlations between serum NEFA concentration and OAA, CPT II and HAD, but no correlation between serum BHBA concentration and capacity for complete oxidation of fatty acid. Overall, the capacity for complete fatty acid oxidation in the liver of ketotic cows might have been decreased. High serum NEFA concentrations may be unfavorable factors for the pathway of complete oxidation of fatty acid in the liver.
Objectives : By examining the effects of Jwa Kum-Whan composed of Coptidis Rhizoma and Evodiae Fructus by the ratio of 6:1 the effects of Soo Ryeon-Whan and composed of Coptidis Rhizoma and Evodiae Fructus by the ratio of 1:1 on hyperlipidemia, the present study attempted to reveal the change of effects based on the ratio of combination. Methods : Jwa Kum-Whan and Soo Ryeon-Whan were injected to rats suffered from induced hyperlipidemia, and then its influence on lipid. During the cultivation of hepatocytes, Jwa Kum-Whan and Soo Ryeon-Whan were added to culture media, and the expression of the enzymes relevant to fat metabolism of hepatocytes was examined. Results : 1. Jwa Kum-Whan significantly decreased total cholesterol(Tc), triglyceride(TG), and LDL-cholesterol(LDLc) of rats suffering from hyperlipidemia induced by high cholesterol diet. Soo Ryeon-Whan decreased LDLc, but had no significant on Tc and TG. 2. Jwa Kum-Whan increased the expression of cholesterol esterase, LDL-receptor, diacylglycerol acyltransferase (DGAT), acylCoA-cholesterol-acyltransferase (ACAT), peroxisome proliferator activated receptor gamma $(PPAR{\gamma})$, peroxisome proliferator activated receptor alpha $(PPAR{\alpha})$ of cultivated hepatocytes. In addition, Soo Ryeon-Whan increased the expression of cholesterol esterase, LDL-Receptor, DGAT, $PPAR{\gamma},\;PPAR{\alpha}$ of cultivated hepatocytes, but had no significant effects on the expression of ACAT. Conclusion : Both Jwa Kum-Whan and Soo Ryeon-Whan were composed of Coptidis Rhizoma and Evodiae Fructus, but the fonner is more effective in hyperlipidemia.
Objective: The aim of the study was to evaluate the influence of polymorphic loci and other factors on milk performance and the technological properties of milk. Methods: The analysis was performed on Simmental and Holstein cows in field conditions (n = 748). Milk yield in kg, fat and protein percentage and yield were evaluated. Technological properties were evaluated by milk fermentation ability, renneting, and an alcohol test. Polymorphisms in the acyl-CoA diacylgycerol transferase 1 (DGAT1), leptin (LEP), fatty acid synthase (FASN), stearoyl CoA desaturase 1 (SCD1), casein beta (CSN2), casein kappa (CSN3), and lactoglobulin beta genes were genotyped, and association analysis was performed. Results: The DGAT1 AA genotype was associated with higher milk, protein and fat yields (p<0.05). The MM genotype in the LEP gene was associated with a lower protein percentage and the W allele with a higher protein percentage (p<0.05). In cows with the FASN GG genotype, the protein percentage was higher, but the A allele was associated with higher milk, protein and fat yields than the G allele. The TT genotype in SCD1 was associated with the lowest milk, protein and fat yields and with the highest milk protein percentage (p<0.01). The T allele had higher values than the C allele (p<0.05) except for fat percentage. The genotype CSN3 AA was associated with a significantly heightened milk yield; BB was associated with a high protein percentage. The effect of the alleles on the technological properties was not significant. The CSN2 BB genotype was associated with the best alcohol test (p<0.01), and the renneting order was inverse. Milk from cows with the CSN2 A1A1 genotype was best in the milk fermentation ability. CSN3 significantly affected the technological properties. Conclusion: The findings revealed the potential of some polymorphic loci for use in dairy cattle breeding and for the management of milk quality. In field research, the pivotal role of farms in milk yield, composition and technological properties was confirmed.
Objective: As one of the most important metabolic organs, the liver plays vital roles in modulating the lipid metabolism. This study was to compare miRNA expression profiles of the Large White liver between two different developmental periods and to identify candidate miRNAs for lipid metabolism. Methods: Eight liver samples were collected from White Large of 70-day fetus (P70) and of 70-day piglets (D70) (with 4 biological repeats at each development period) to construct sRNA libraries. Then the eight prepared sRNA libraries were sequenced using Illumina next-generation sequencing technology on HiSeq 2500 platform. Results: As a result, we obtained 346 known and 187 novel miRNAs. Compared with the D70, 55 down- and 61 up-regulated miRNAs were shown to be significantly differentially expressed (DE). Gene ontology and Kyoto encyclopedia of genes and genomes enrichment analysis indicated that these DE miRNAs were mainly involved in growth, development and diverse metabolic processes. They were predicted to regulate lipid metabolism through adipocytokine signaling pathway, mitogen-activated protein kinase, AMP-activated protein kinase, cyclic adenosine monophosphate, phosphatidylinositol 3 kinase/protein kinase B, and Notch signaling pathway. The four most abundantly expressed miRNAs were miR-122, miR-26a and miR-30a-5p (miR-122 only in P70), which play important roles in lipid metabolism. Integration analysis (details of mRNAs sequencing data were shown in another unpublished paper) revealed that many target genes of the DE miRNAs (miR-181b, miR-145-5p, miR-199a-5p, and miR-98) might be critical regulators in lipid metabolic process, including acyl-CoA synthetase long chain family member 4, ATP-binding casette A4, and stearyl-CoA desaturase. Thus, these miRNAs were the promising candidates for lipid metabolism. Conclusion: Our study provides the main differences in the Large White at miRNA level between two different developmental stages. It supplies a valuable database for the further function and mechanism elucidation of miRNAs in porcine liver development and lipid metabolism.
The aerial parts of Sajabalssuk (Artemisia princeps PAMPANINI, Sajabalssuk) was extracted with 80% aqueous MeOH, and the concentrated extract was partitioned with EtOAc, n-BuOH and $H_2O$, successively. From the EtOAc fraction, three cycloartane-type triterpnoids and one ursane-type triterpenoid were isolated through the repeated silica gel, ODS and Sephadex LH-20 column chromatographies. From the results of physico-chemical data including NMR, MS and IR, the chemical structures of the triterpenoids were determined as wrightial (1), wrightial acetate (2), 27-norcycloart-20(21)-ene-25-al-3${\beta}$-ol acetate (3) and ursolic acid (4). No report has been found for isolation of compound 3 in the literature so far, and compounds 1, 2 and 3 were the first to be isolated from Sajabalssuk (Artemisia princeps PAMPANINI, Sajabalssuk). Also, compound 1 showed Acyl-CoA:Cholesterol acyltransferase (hACAT-1) and hACAT-2 inhibitory activity with the $IC_{50}$ values of 33.0 and 45.0 ${\mu}g/ml$, respectively. Compounds 2 and 3 inhibited hACAT-1 activity with the $IC_{50}$ values of 12.0 and 16.0 ${\mu}g/ml$, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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