경북포항지역의 해안사구지역에서 서식하는 11종의 해안사구 식물의 근권으로부터 1,330균주의 근권세균들을 분리하였다. 이들 분리된 근권세균등 중에서 9종의 주요 식물병원성 진균인 Phytophthora capsici, Fusarium oxysporum, Corynespora casriicola, Colletotrichum acutatum, Botrytis cinerea, Rhizoctonia solani AG-1(IA), Pythium ultimum, Rhizoctonia solani AG-1(IB)에 대하여 넓은 항진균성 스펙트럼을 가지고 동시에 생장촉진호로몬 옥신을 생산하는 23균주의 근권세균을 선발하였다. 1차 선발된 23균주의 옥신 생산성 사구식물근권세균들에서 19균주가 항진균성 siderophore를, 4균주가 항진균성 cellulase를 생산할 수 있었으며, 17균주는 불용성 인산염을 분해할 수 있었다. 또, 23균주의 선발된 사구식물생장 촉진 근권세균들은 16S rDNA 염기서열 조사와 Bergey's manual에 의하여 99%이상의 상동성을가지는 7균주의 Bacillus sp.균주들과 15균주 Pseudomonas sp.균주들로 동정할 수 있었다. 한편, 이들 중 다기능 사구식물생장촉진 근권세균인 Pseudomonas fluorescens IB4-14는 고염, 건조와 같은 환경스트레스에 저항성을 가질 수 있게 하는 ACC deaminase를 생산하므로써 식물생장촉진은 물론이고, 환경스트레스 저항성 기작을 가지는 다중기능 균주이었다. 또한, 선발된 옥신생산성 다기능 균주인 P. fluorescens IB4-14는 사구식물인 갯까치수영의 종자발아능과 뿌리생장촉진능에서 우수한 생육촉진능을 발휘함을 확인하였으므로 사구식물 복원에 사용할 미생물제제의 구성균주로 선발되었다고 생각한다.
Bacterial 1-aminocyclopropane-1-carboxlyate (ACC) deaminase (AcdS) is an enzyme that cleaves ACC, a precursor of the plant hormone ethylene, into ${\alpha}$-ketobutyrate and ammonia. The acdS gene was cloned from Pseudomonas fluorescens, which was capable of improving the seedling of Chinese cabbage under salinity condition. The recombinant AcdS (rAcdS) exhibited optimal activity at pH 8.5 and $30^{\circ}C$. Strong activity was sustained at up to 100 mM NaCl. The polyclonal anti-P. fluorescens AcdS antibody was produced in a rabbit that had been immunized with the purified rAcdS. This antibody successfully recognized the homologous antigens derived from the total proteins of isolated plant growth-promoting microorganisms. A statistically significant correlation was observed between the intensity of hybridization signal and AcdS activity measured by a biochemical method, suggesting its application as a useful indicator for active deaminases.
비식량 바이오매스 대상작물인 억새의 생육을 촉진하는 균주를 선발하기 위하여 충북 청원군 대청호 주변에서 서식하는 물억새 뿌리로부터 64균주를 분리하였다. 분리균의 식물생육촉진 활성을 확인하기 위하여 옥신, 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid (ACC) deaminase 생선능 및 기타 배양조건에 따른 생육 특성을 조사한 결과, 8균주가 선발되었으며 Agrobacterium sp. BE516 균주가 억새 줄기의 생육을 2배 이상 증가시켜 가장 활성이 뛰어난 균주로 선발되었다. Agrobacterium sp. BE516 균주는 식물호르몬 indole acetic acid를 64 ${\mu}g/mL$ 생산하고, 염 및 건조 등의 환경 스트레스 저항성 ACC deaminase 를 생산하며, $4-15^{\circ}C$, pH 4.0 및 4% NaCl 농도에서 생육하였다. 따라서, Agrobacterium sp. BE516 균주가 간척지와 같은 조건불리지역에서 비식용 바이오매스 대상작물인 억새의 생육을 촉진시키기 위한 미생물비료제 개발에 유용한 균주임을 확인하였다.
본 연구에서 부산, 창원, 제주도 일대에서 채취한 토양으로부터 분리한 미생물을 이용하여 식물 생장 촉진활성 및 식물병원성 곰팡이에 대한 길항능을 확인하고자 하였으며, 분리주 간에 비교우위를 통해 Pseudomonas plecoglossicida ANG14, Pseudarthrobacter equi ANG28, Beijerinckia fluminensis ANG34, Acinetobacter calcoaceticus ANG35를 최종 선정하였다. 이들은 ACC deaminase 생성능, IAA 생성능, 질소 고정능, 인산 가용화능 및 siderophore 생성능을 모두 가지며, 일부 식물병원성 곰팡이에 대해 길항능을 가지는 것을 확인하였다. 특히 ANG35의 경우에는 7가지 식물병원성 곰팡이 중 6가지에 대해 비교적 높은 억제율을 나타내어 식물 생장 촉진뿐만 아니라 방제활성을 가지므로 식물이 생장하는 데 도움을 줄 것으로 기대된다. 또한, 4균주 간의 세포외 효소활성 synergy effect를 확인한 결과 단독배양을 했을 때보다 혼합배양 시 세포외 효소활성이 증가하는 것을 확인하였다. 따라서, 식물 생장촉진 활성 및 식물병원성 곰팡이에 대한 결과를 통해 새로운 생물학적 제제로서 이용 가능성을 제시한다.
Arsenic is a known hazardous metalloid not only to the animals but also to plants. With high concentrations, it can impede normal plant growth and cause even death of plants at extremely high levels. A known plant response to stress conditions such as toxic levels of metal (loids) is the production of stress ethylene, causing inhibitory effect on root growth in plants. When the effect of various arsenic concentrations was tested to maize plant, the stress ethylene emission proportionately increased with increasing concentration of As(V). The inoculation of two arsenic tolerant bacteria; Pseudomonas grimonti JS126 and Pseudomonas taiwanensis JS238 having respective high and low 1-aminocyclopropane-1-carboxylate (ACC) deaminase activity reduced stress ethylene emission by 59% and 30% in maize grown in arsenic polluted soils. The result suggested the possible use of Pseudomonas grimonti JS126 for phytoremediation of arsenic polluted soils.
다양한 난개발과 해안도로, 방파제 등의 인공 구조물 설치로 인한 해안 침식과 해안선 파괴 등으로 해안사구가 크게 훼손되고 있다. 이에 본 연구에서는 해안사구에서 서식하고 있는 토착식물의 근권으로부터 식물 성장 촉진 능력이 있으면서 동시에 염분에 강한 내성을 가지는 근권세균의 library를 구축하였고, 이들 균주를 대상으로 식물 성장 촉진 능력을 평가하였다. 또한, 내염성 식물을 대상으로 사구 토양에서의 성장률에 근권세균이 미치는 영향을 평가한 후, 훼손된 사구의 복원에 가장 유용한 미생물을 선별하고 분리된 근권세균이 식물 성장에 미치는 영향을 평가하였다. 실험은 선정된 균주와 갯기름나물과 줄무늬갈대를 해안사구에 식재한 후 성장에 미치는 영향을 평가하였다. 그 결과, MH1RS1는 (IAA) production, siderophores, 1-aminocyclopropane-1-carboxylate deaminase (ACC deaminase) 그리고 염분내성을 가지고 있다. 갯기름나물의 경우는 줄기의 길이와 뿌리의 무게는 크게 향상되었다. 특히, 줄기의 생체와 뿌리 무게는 control과 비교했을 때 25% 성장이 향상되었다. 줄무늬 갈대는 Bacillus aerius MH1RS1 에 의해 초장은 18%와 뿌리의 생체 중은 20%로 크게 향상 되었다.
Plant growth promoting traits like production of indoleacetic acid (IAA), ammonia, hydrogen cyanide (HCN), siderophore, and like the enzyme activities of catalase, ACC deaminase, cellulase, chitinase and protease were assayed in vitro for twenty one phosphorus solubilizing bacteria isolated from soil isolates. Except SPP-5 and SPP-15 strains, all the other isolated strains produced IAA in various amounts of 10 to $23{\mu}g\;ml^{-1}$. All strains showed positive response for ammonia production and ACC deaminase activity implying that they are capable of growing in a N-free basal medium. Catalase activity was found to be superior in SPP-2, SPP-7, SPP-12 and SPP-17 compared to the other strains tested. HCN production was detected by 15 strains and among them SPP-9, SPP-15, SAph-11, and SAph-24 were found to be strong HCN producers. Except the isolates SPP-10, SPP-12, SPP-13 and SPP-14, all the other isolates produced more than 80% siderophore units. None of the strains showed cellulose and chitinase activity. SAph-8, SAPh-11, SAPh-24 and SPP-15 strains showed 35.84, 50.33, 56.64 and 34.78 U/ml protease activities, respectively. SPP-1, SPP-2, SPP-3, SPP-11, SPP-17, SPP-18, SAph-11 and SAph-24 strains showed positive response for all the tested plant growth promotion traits except cell wall degrading enzyme activities. According to the results, all the tested phosphorus solubilizing isolates could exhibit more than three or four plant growth promoting traits, which may promote plant growth directly or indirectly or synergistically. Therefore, these phosphorus solubilizing strains could be employed as bio-inoculants for agriculture soils.
Two phosphate solubilizing Pantoea strains (P. agglomerans and P. rodasii) were employed in elucidating their phosphate solubilizing potential under different carbon and nitrogen sources, pH, temperature and salt conditions. Plant growth promoting characteristics such as ACC deaminase activity, indole acetic acid (IAA), HCN, ammonia, and siderophore production of the two strains were assessed in vitro. Potential applicability of the strains as bio-inoculants was also evaluated in pot experiments conducted under green house conditions. Phosphate solubilization measured as the amount of phosphorous released into the medium was recorded as 810 and $788{\mu}g\;ml^{-1}$ respectively by P. agglomerans and P. rodasii. Glucose at the rate of 2% was found be the best carbon source, while $(NH_4)_2SO_4$ was the best nitrogen source for both strains. Despite a slight decrease in phosphate solubilization observed at higher temperature, pH and salt concentrations, both strains could withstand against a range of temperature ($30-35^{\circ}C$), pH (7-9) and the presence of NaCl (up to 5%) without much compromising the phosphate solubilization. Different plant growth promoting traits (ACC deaminase activity, IAA, HCN, ammonia, and siderophore production) of the strains and their ability to promote the growth of green gram seedlings indicate that both strains possess high potential to be used as bio-inoculants.
In this study, Arthrobacter scleromae SYE-3, which was isolated from indigenous plant in a subtropical region, Neigeria, with plant growth promoting activity was evaluated to determine the optimal culture condition. A bacterial strain SYE-3 had the IAA productivity ($89.15{\pm}0.36mg/L$) and ACC deaminase activity ($0.20{\pm}0.06$ at 72 hours). Also, optimal culture conditions such as temperature and pH of strain SYE-3 were $20^{\circ}C$ and 10 in LB medium, respectively. Strain SYE-3 had up to 3% salt tolerance in the LB medium. Plant growth promoting ability of strain SYE-3 using yam (Dioscorea japonica Thunb.) was evaluated. As a result, strain SYE-3 had showed very powerful effect on the increase of the shoot length and root biomass of yam (190.0% and 282.41% increase for 112 days, respectively). These results indicated that Arthrobacter scleromae SYE-3 can serve as a promising microbial resource for the biofertilizers of subtropical crops.
Hong, Sun Hwa;Kim, Ji Seul;Sim, Jun Gyu;Lee, Eun Young
한국토양비료학회지
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제48권1호
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pp.36-43
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2015
Excess use of chemical fertilizer causes soil acidification and accumulation of salt, and thus might bring to desertification of soil. To overcome this problem, it needs limited usage of chemical fertilizer and increased usage of natural fertilizer as an alternative. In this study, dry soil-borne Bacillus sp. SHL-3, which was isolated from arid and barren soil, with plant growth promoting activity was isolated for identification and to determine optimal culture condition. A bacterial strain SHL-3 had the IAA productivity ($5.16{\pm}0.10mg\;L^{-1}$), ACC deaminase activity ($0.36{\pm}0.09$ at 51 hours) and siderophore synthesis. It was identified as genus Bacillus sp.. Also, optimal culture condition of SHL-3 were $20^{\circ}C$ and pH 7 in LB medium. Bacillus sp. SHL-3 had up to 4% salt tolerance in the medium. We evaluated the plant growth promotion ability of SHL-3 using yam (Dioscorea japonica Thunb.). As a result, Bacillus sp. SHL-3 was effective on the increase of the shoot length (202.4% increase for 91 days). These results indicate that Bacillus sp. SHL-3 can serve as a promising microbial resource for the biofertilizers of soil.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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