Objective : This study purposed to investigate the anti-oxidative effect of Lithospermi Radix (root of Lithospermum erythrorhizon S.) on liver cells isolated from oxidatvely stressed rat by AAPH. Method : We investigate effects of Lithospermi Radix(LR) and its fractions on normal liver cells' proliferation. And the amounts of SOD, GSH, catalase, NO, MDA production by liver cells isolated from the oxidatively stressed rat by AAPH also were measured after incubation with various fractions of LR extraction. Results : LR and its fracitons showed no toxicity on the normal liver cells from rat. LR and its fracitons increased the activity of SOD and reduced the amounts of NO and MDA in the liver cells from the oxidatively stressed rat. Conclusion : Lithospermi Radix could be supposed to have antioxidant effect on liver cells with no toxicity.
This study investigated the protective effect of the butanol (BuOH) fraction from fermented Laminaria japonica extract (BFLJ) on AAPH-induced oxidative stress in porcine kidney epithelial cells (LLC-PK1 cells). L. japonica was fermented by Aspergillus oryzae at $35{\pm}1^{\circ}C$ for 72 h. Freeze-dried fermented L. japonica was extracted with distilled water, and the extracted solution was mixed with ethanol and then centrifuged. The supernatant was subjected to sequential fractionation with various solvents. The BuOH fraction was used in this study because it possessed the strongest antioxidant activity among the various solvent fractions. The BuOH fraction of fermented L. japonica had a protective effect against the AAPH-induced LLC-PK1 cells damage and increased cell viability while reducing lipid peroxidation formation and increased activities of antioxidant enzymes such as superoxide dismutase and glutathione peroxidase. The inhibitory effect of BFLJ on lipid peroxidation formation had a higher value of $0.11{\pm}0.01nmol$ MDA at $100{\mu}g/mL$ concentration in comparison with intact BuOH fraction showing $0.22{\pm}0.08nmol$ MDA at the same concentration. Furthermore, BFLJ treatment increased glutathione concentration. GSH concentration in the cell treated with BFLJ of $100{\mu}g/mL$ was $1.80pmol/L{\times}10^5cells$. These results indicate that BFLJ protects the LLC-PK1 cells against AAPH-induced cell damage by inhibiting lipid peroxidation formation and increasing antioxidant enzyme activities and glutathione concentration.
We investigated the protective effects of antioxidant fractions from a 70% ethanolic extract of Hizikia fusiformis in human dermal fibroblasts (HDFs). Powdered H. fusiformis was extracted with 70% ethanol and then partitioned into three fractions according to polarity using n-hexane (HFH), chloroform (HFC), and ethyl acetate (HFEA). Antioxidant activity was observed in HFEA at 0.66 mg/mL based on the half maximal inhibitory concentration ($IC_{50}$) of 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), and at 0.24 mg/mL based on alkyl radical scavenging. The protective effects of the HFEA antioxidant fraction against 2,2-azobis-(2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH)-damaged HDFs and the expression of Type I procollagen in HDFs were examined. HFEA caused the proliferation of HDFs with and without AAPH treatment and protected against AAPH damage to HDFs in a dose-dependent manner ($50-200{\mu}g/mL$). This implies that the antioxidant properties of the fractions depended on their proliferative and protective effects. The HFEA antioxidant fraction had significant effects and caused the dose-dependent expression of Type I procollagen, an important anti-wrinkle protein, in HDFs. In conclusion, antioxidant substances in H. fusiformis were found in the ethyl acetate fraction, and the resulting HFEA may have cosmetic applications.
Koh, Eun Mi;Lee, Eun Kyeong;Song, Chi Hun;Song, Jeongah;Chung, Hae Young;Chae, Chang Hoon;Jung, Kyung Jin
Toxicological Research
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제34권4호
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pp.333-341
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2018
Ferulate is a phenolic compound abundant in wheat germ and bran and has been investigated for its beneficial activities. The aim of the present study is to evaluate the efficacy of ferulate against the oxidative stress-induced imbalance of protein tyrosine kinases (PTKs), protein tyrosine phosphatases (PTPs), and serine/threonine protein phosphatase 2A (PP2A), in connection with our previous finding that oxidative stress-induced imbalance of PTKs and PTPs is linked with proinflammatory nuclear factor-kappa B $(NF-{\kappa}B)$ activation. To test the effects of ferulate on this process, we utilized two oxidative stress-induced inflammatory models. First, YPEN-1 cells were pretreated with ferulate for 1 hr prior to the administration of 2,2'-Azobis(2-methylpropionamidine) dihydrochloride (AAPH). Second, 20-month-old Sprague-Dawley rats were fed ferulate for 10 days. After ferulate treatment, the activities of PTKs, PTPs, and PP2A were measured because these proteins either directly or indirectly promote $NF-{\kappa}B$ activation. Our results revealed that in YPEN-1 cells, ferulate effectively suppressed AAPH-induced increases in reactive oxygen species (ROS) and $NF-{\kappa}B$ activity, as well as AAPH-induced PTK activation. Furthermore, ferulate also inhibited AAPH-induced PTP and PP2A inactivation. In the aged kidney model, ferulate suppressed aging-induced activation of PTKs and ameliorated aging-induced inactivation of PTPs and PP2A. Thus, herein we demonstrated that ferulate could modulate PTK/PTP balance against oxidative stress-induced inactivation of PTPs and PP2A, which is closely linked with $NF-{\kappa}B$ activation. Based on these results, the ability of ferulate to modulate oxidative stress-related inflammatory processes is established, which suggests that this compound could act as a novel therapeutic agent.
The six phenolic compounds isolated from the root of Dipsacus asper, 3,4-di-O-caffeoylquinic acid (1), methyl 3,4-di-O-caffeoyl quinate (2), 3,5-di-O-caffeoylquinic acid (3), methyl 3,5-di-O-caffeoyl quinate (4), 4-5-di-O-caffeoylquinic acid (5), methyl 4,5-di-O-caffeoyl quinate (6) were continuously evaluated for their antioxidant activity using superoxide radical scavenging and AAPH-mediated (LDL) oxidation assay. The results demonstrated that compounds 1 - 6 had remarkable antioxidant activities with the $IC_50$ values ranging from 12.0 to $2.8{\mu}M$ in superoxide radical scavenging. They also inhibited AAPH-mediated low-density lipoprotein LDL oxidation by the generation of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) with $IC_50$ ranging from 6.7 to $8.7{\mu}M$.
In this study, we investigated the antioxidant activity of hesperidin and hesperetin, which are the active compounds from Citrus junos, in the cellular system. Under cellular model of oxidative damage using LLC-$PK_1$ renal epithelial cell, the oxidative damage induced by 2,2'-azobis (2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH) led to the loss of cell viability, while treatment of hesperidin and hesperetin increased significantly the cell viability as dose-dependent manner. In addition, NO-induced cellular oxidative damage by sodium nitroprusside were significantly recovered by the treatment of hesperidin and hesperetin, showing the increase of cell viability. But hesperidin and hesperetin showed no significant protective effect on $O_2{^-}$-induced cellular oxidative damage. The present study indicates that hesperidin and hesperetin protect against free radical, especially AAPH-induced peroxyl radical. In particular, hesperetin has stronger protective effect against oxidative stress than hesperidin.
To investigate the protective effect of eggplant (Solanum melongena L.) and its active compound, delphinidin, we used in vitro and cellular system. The active fraction from eggplant, BuOH fraction, showed protective effect from hydrogen peroxide-induced oxidative stress in WI-38 fibroblast cells. It suggests that eggplant would have the protective activity from radical-induced oxidative damage and its BuOH fraction would play the crucial role with antioxidative activity. In addition, delphinidin, the active compound from eggplant, exerted the strong 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl scavenging effect with $IC_{50}$ value of 6.59 ${\mu}g/mL$. Furthermore, the cellular oxidative stress was induced by 2,2'-azobis (2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH) in LLC-$PK_1$ cells, while treatment of delphinidin atteunated AAPH-induced oxidative stress as dose-dependent manner. The present study suggests the antioxidative activity of eggplant and delphinidin against free radical-induced oxidative stress.
Objectives : This study was undertaken to determine the in vitro antioxidant activity of the extract of Chilgitang herb-acupuncture solution (CHAS). Methods : The radical scavenging capacity was tested by 2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl (DPPH), hypoxanthine-xanthine oxidase system, DCFH-DA assay, nitric oxide and peroxynitrite generating system. In addition, antioxidant activity on copper and AAPH mediated human low-density lipoprotein (LDL) oxidation was measured by using TBARS assay and relative electrophoretic mobility assay. The amount of total phenolic compounds was assayed by the Folin-Ciocalteu method. Results : CHAS revealed a potent scavenging activity on DPPH radical(82%), superoxide anions(73%), hydroxyl radical(63%), nitric oxide (99%) and peroxynitrite (99%). Moreover, CHAS showed a strong inhibitory effect (59%) on $FeCl_2$-ascorbic acid induced lipid peroxidation of rat liver homogenate. CHAS also markedly inhibited copper(81%) and AAPH(56%)-mediated LDL oxidation, and effectively suppressed the electrophoretic mobility during exposure of human LDL to copper ions. CHAS (82 mg/g) contained higher concentration of total phenolic compounds than that of water extract (45 mg/g) obtained from Chilgitang. Conclusions : These results indicate that CHAS may protect against ROS- or RNS involved diseases, including cardiovascular diseases.
GRF (Korean Red Ginseng mixed formula) consists of six herbs such as Ginseng Radix rubra Koreana, Lycii Fructus, Artemisiae Capillaris Herba, Poria, and Glycyrrhizae Radix and Hoveniae Fructus. For the evaluation of hepatoprotective effect of GRF, the study was performed on protective effect against hepatic damage induced by galactosamine in vitro and ccl4 in vivo and also elucidate antioxidant activity. In vitro assay with 1.1 mM galactosamine, protection (%) was 44% (GR), and 58% (GRF-A) at 50 ug/ml. GRF effectively protected fatty degenertion and necrosis in murine hepatic damage induced by ccl4. For the -antioxidant study, GRF inhibited hemolysis of erythrocyte and decolored DPPH (2,2-diphenyl-l-picrylhydrazyl) free radical in a dose dependent manner more effetively than GR alone in vitro. GRF and GR significantly suppressed the time course $(1\;hr{\sim}6\;hr)-level$ of MDA (malondialdehyde) following AAPH (2,2'-azo-bis-(2-amidino -propane) dihydrochloride) treatment in vivo as compared with control data. From the results it can be concluded GR and GRF exerted the hepatoprotective effect by dint of antioxidant activity.
The water extract of Saururus chinensis was investigated for oxygen radical absorbance capacity (ORAC), reducing capacity, metal chelating activity, and intracellular antioxidant activity using HepG2 cell. When 2,2'-azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH) was used for the generation of peroxyl radicals in vitro, S. chinensis extract (SC-E) showed the strong and concentration-dependent scavenging activity through donating protons which could be explained by its reducing property. When hydroxyl radicals were generated in vitro through the addition of $Cu^{2+}$ and $H_2O_2$, SC-E demonstrated the antioxidant activity depending on its concentration. In HepG2 cell model, most of intracellular oxidative stress generated by AAPH was efficiently removed by SC-E. However, when $Cu^{2+}$ without $H_2O_2$ was used as an oxidant in the intracellular assay, SC-E partially reduced the oxidative stress caused by $Cu^{2+}$ in cellular antioxidant activity assay system. These results indicate that SC-E could be utilized for the development of functional foods as antioxidant resource in the near future.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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