This study describes an efficient and widely applicable droplet-vitrification following cryopreservation for shoot tips of (Fragaria x ananassa DUCH. cvs. 'Derunoka' and 'Jumbo pure berry'. The shoot tips of strawberry were precultured in Murashige and Skoog (MS) liquid medium supplemented with sucrose (0.3-0.7M). Precultured explants were treated with loading solution (LS, C4) containing glycerol 17.5% and sucrose 17.5% for 40 min and exposed to dehydration solution (B1) containing 50% of glycerol and 50% of sucrose for 60 min at $25^{\circ}C$, and then transferred onto droplets containing $2.5{\mu}l$ PVS3 on sterilized aluminum foils ($4cm{\times}0.5cm$) prior to direct immersion in liquid nitrogen (LN) for 1 h. The highest regeneration rate (%) was obtained when shoot tips were precultured with treatment-2 (exposing of shoot tips to MS + 0.3M Sucrose for 30 h and then treated with MS+0.5 M sucrose for 16 h) at $25^{\circ}C$ in both the cultivars. The viability of cooled samples, followed by culturing on MS medium for 4 weeks was 77.8% and 60.0% for 'Derunoka' and 'Jumbo pure berry', respectively. This result shows droplet-vitrification would be a promising method for cryobanking strawberry germplasm.
This study describes an efficient and widely applicable droplet-vitrification following cryopreservation for shoot tips of Chrysanthemum morifolium (Ramat.) cvs. 'Borami' and 'Yes morning'. The shoot tips of Chrysanthemum were precultured in Murashige and Skoog (MS) liquid medium supplemented with sucrose (0.3-0.7 M). Precultured explants were treated with loading solution (LS, C6) containing glycerol 20% and sucrose 20% for 30 min and exposed to dehydration solution (B5) containing 40% of glycerol and 40% of sucrose for 60 min at $25^{\circ}C$, and then transferred onto droplets containing $2.5{\mu}l$ PVS3 on sterilized aluminum foils ($4cm{\times}0.5cm$) prior to direct immersion in liquid nitrogen (LN) for 1 h. The highest regeneration rate (%) was obtained when shoot tips were precultured with treatment-2 (exposing of shoot tips to MS + 0.3M sucrose for 30 h and then treated with MS+0.5 M sucrose for 16 h) at $25^{\circ}C$ in both the cultivars. The viability of cooled samples, followed by culturing on $NH_4NO_3$-free MS medium for first 5 days was increased to two-fold (80.7%) regrowth rate over those cultured on normal MS medium or MS medium containing plant growth regulators. This result shows droplet-vitrification would be a promising method for cryobanking chrysanthemum germplasm.
This Study was carried out ot investigate the effects of concentration and equilibration time of cryoprotective aagents on survival rate of slowly and ultrarapidly frozen porcine embryos. The porcine embryos following dehydration by cryoprotective agents and 0.25M sucrose were slowly freezed(from 2$0^{\circ}C$ to -7$^{\circ}C$/-1$^{\circ}C$/min., from -7$^{\circ}C$ to -35$^{\circ}C$/-0.2$^{\circ}C$/min., from -35$^{\circ}C$ to -38$^{\circ}C$/-0.3$^{\circ}C$/min.) by Cell Freezer and directly plunged into liquid nitrogen and thawed in 38$^{\circ}C$ water bath. Survival rate was defined as development rate to the morula and blastocyst stage after in vitro culture or by FDA test. The results are summarized as follows : 1. The survival rates of porcine embryos after slow frozen-thawing in the freezing medium of 0.25M sucrose added 2.0M glycerol, 3.0M DMSO, 2.0M propanediol or 2.0M glycerol+2.0M propanediol was 80.6, 84.7, 75.0 or 78.8%, respectively. 2. The survival rates of porcine embryos after slow frozen-thawing in the freezing medium of 0.50M sucrose added 2.0M glycerol, 3.0M DMSO, 2.0M propanediol or 2.0M glycerol+2.0M propanediol was 80.9, 82.4, 73.1 or 77.1%, respectively. 3. The survival rates of porcine embryos after ultrarapid frozen-thawing in the freezing medium of 0.25M sucroese added 2.0M glycerol, 3.0M DMSO, 2.0M propanediol or 2.0M glycerol+2.0M propanediol was 65.3, 68.6, 63.2 or 59.9%, respectively. 4. The survival rates of porcine embryos after ultrapid frozen-thawing in the freezing medium of 0.50M sucrose added 2.0M glycerol, 3.0M DMSO, 2.0 propanediol or 2.0M glycerol+2.0M propanediol was 67.5, 62.9, 56.9, or 62.8%, respectively. 5. The higher survival rate of porcine embryos was attained at the short period ofequilibration time(5min.) in the freezing medium added 0.25M sucrose and 3.0 DMSO compared to those of 10 or 20min. equilibration time in the same condition.
This study describes an efficient and widely applicable droplet-vitrification following cryopreservation for shoot tips of strawberry (Fragaria × ananassa Duch.) cvs. 'Wonkyo3114' and 'Gurumi40'. The shoot tips were precultured in Murashige and Skoog (MS) liquid medium supplemented with sucrose (0.3-0.5M). Precultured explants were osmoprotected with loading solution (LS, C4) containing 20% glycerol and 20% sucrose for 40 min and exposed to dehydration solution (B5) containing 40% glycerol and 40% sucrose for 40 min at 25℃, Subsequently, the explants were transferred onto droplets containing 2.5 μL PVS3 on sterilized aluminum foils (4 cm × 0.5 cm) prior to direct immersion in liquid nitrogen (LN) for 1 h. The highest regrowth rate (%) in both the cultivars was obtained when the shoot tips were precultured with MS + 0.3M sucrose for 40 h at 25℃. The cryopreserved shoots tips exhibited 55% regrowth rate by culturing in NH4NO3-free MS medium supplemented with 3% sucrose, 1.0 g/L casein, 1.0 mg/L GA3, and 0.5 mg/L BA for 5 weeks and in MS medium supplemented with 0.5 mg/L GA3 for 8 weeks. This result shows that droplet-vitrification could be employed as a promising method for cryostorage of strawberry germplasm.
기내 배양환경을 조절하여 건전한 유식물체를 획득하기 위해 도라지를 무균발아시켜 shoot부분을 NAA 0.1 mg/L가 첨가된 MS 기본배지에 치상한 후 membrane filter 부착 유무와 sucrose 농도를 달리 처리하여 생장반응을 조사하였다. Membrane filter 미부착구에서는 배양용기 내의 $CO_2$와 $C_2$H$_4$ 농도가 membrane filter 부착구에 비해 높았으며 membrane filter가 부착되지 않았을 때 $CO_2$ 농도는 배양기간이 경과될수록 증가하였으나 $C_2$H$_4$ 농도는 감소하는 경향이었다. 식물체 생장은 membrane filter 부착구가 미부착구에 비해 양호하였고, 미부착구에서는 sucrose 농도가 증가할수록 생육이 양호하게 나타났다. 생체중과 건물중은 membrane filter를 부착하지 않은 sucrose 4.5% 처리구에 비해 membrane filter를 부착한 sucrose 무첨가구에서 비슷하거나 높았다. 엽록소 함량은 membrane filter 부착구에서 미부착구에 비해 높았으며 당 함량도 비슷한 경향이었는데 두 처리간 차이는 더 컸다. 기공은 membrane filter 부착구에서 미부착구에 비해 닫혀 있었으며 엽육조직은 membrane filter를 부착하거나 sucrose 농도가 높을수록 잘 발달하였다. 또한 상토에 이식한 후 13일째 생존율은 sucrose 처리 농도에 관계없이 membrane filter 미부착구는 0%인데 비해 부착구는 100%로 나타났다.
Purpose: This study compared the pain-relieving effects of human milk, sucrose, and distilled water during examinations for retinopathy of prematurity. Methods: Forty-five preterm infants were randomly assigned to receive a pacifier dipped in one of three solutions: human milk (n=14), 24% sucrose (n=15), or distilled water (n=16), 2 minutes before an eye examination. Their pain score, pulse rate, and oxygen saturation were measured at three time points: 5 minutes before the examination, 30 seconds after speculum introduction, and 2 minutes after the examination. Results: The infants' mean gestational age and weight at birth were $33.1{\pm}2.1$ weeks and $1,842{\pm}470g$, respectively. There were no between-group differences in pain relief during the eye examination. The pain score significantly increased both during (p<.001) and after the examinations (p=.003). Oxygen saturation decreased during the examinations (p<.001); however, the infants in the 24% sucrose group showed higher oxygen saturation (p=.047) during the examinations than the infants in the other groups. Conclusion: Sucking on a pacifier dipped in human milk or 24% sucrose did not reduce the pain associated with eye examinations in preterm infants. Pacifiers dipped in sucrose can be used to maintain better oxygen saturation during these examinations.
This study was conducted to investigate the effect of vitrification solution(VS) on in vitro developmental competence of immature porcine oocytes. The immature porcine oocytes were exposed to the following vitrification solution, at RT. 1) EFS sol. : 20% ethylene glycol (EG) 3 min, 40% EG + 18%(w/v) Ficoll(MV70, 000) + 0.3 M sucrose 30 sec, 2) GE sol. : 10% glycerol 5 min, 10% G + 20% EG 5 min, 25% G +25% EG 30 sec, 3) EG sol : 1.5M EG 2.5 min, 5.5 M EG + 1.0 M sucrose 30 sec. Oocytes were immediately transferred into 1.0 M, 0.5 M, 0.25 M, 0125 M, 0 M sucrose solution for 2.5 min each at RT. After removal of VS, immature oocytes were matured in vitro and subsequently all oocytes were subjected to IVF followed in vitro culture for 7 days. Maturation rates of oocytes were 38.8%, 44.5%, 22.4% and 57.6%, in EFS, EG, GE and Control, respectively, maturation rates of oocytes in EG and Control was significantly higher than EFS and GE(P<0.01). Fertilization rates of oocytes in Control was significantly higher than other treated groups(P<0.05), but no difference were observed among treated groups. Polyspermic rates were no significant difference among four groups. Cleavage rates of oocytes were 21.9%, 47.1%, 19.0% and 65.9%, in EFS, EG, GE and Control, respectively, cleavage rates of oocytes in EG and Control was significantly higher than EFS and GE(P<0.05), but blastocyst formation rates were no significant difference among four groups. These results suggested that the use of EG solution could be a great challenge for reaching a successful vitrification of immature porcine oocytes.
남해안 유류 오염지역으로부터 유류분해능이 우수한 균주를 선별하여 동정한 결과 Pseudomonas aeruginosa로 동정되었으며, Pseudomonas aeruginosa BYK-2로 명명하였다. 균 성장 및 생물 유화제 생산을 위한 최적배양온도, 시간, pH, NaCl 농도는 각각 $25^{\circ}C$, 48시간, 7.0 이었으며, NaCl은 첨가하지 않았을 때 가장 많은 양의 생물유화체가 생산되었다. 본 균주의 경우, 1%(w/v) arabian light 원유와 bunker C oil을 기질로 7일간 배양한 결과 92.1%(w/w)와 76.2%(w/w)가 생분해되었다. n-hexadccane 에 대한 세포부착능이 실험에서는 탄화수소화합물들(arabian light 원유, kuwait 원유, bunker C 유, n-paraffine, n-hexadecane, n-tetradecane)을 기질로 배양했을때는 모두 80% 이상의 높은 세포부착능을 나타냈으며, 지방산들(oleic acid, olive oil, lecithin)중에는 lecithin을 기질로 배양했을 때 91.5%로 가장 높은 세포부착능을 나타냈어다. 또한 당들(arabinose, trehalose, dextrose, galactose, lactose, fructose, maltose, sorbitol, sucrose)을 기질로 했을 경우 arabinose, galactose, sorbitol, sucrose를 제외하고는 대부분 70%이하의 세포부착능을 나타냈다.
본 연구는 '황금배'('Whangkeumbae')의 엽 절편체로부터 형질전환 체계 확립을 위한 효율적인 재분화 체계 확립을 위해 식물 생장조절제와 주요 탄소원인 sucrose, sorbitol이 식물체 재분화에 미치는 영향을 조사하기 위해 수행되었다. 잎 절편체를 MS 배지에 TDZ 농도를 각각 0.1, 0.25, 0.5, 1, 2.5, 5 mg/L으로 하여 IBA 0.3 mg/L을 혼용 처리한 결과 TDZ 0.25 mg/L 농도에서 61.1%의 가장 양호한 재분화율을 보였으며 TDZ 2.5 mg/L 이상의 농도에서는 신초의 재분화율이 급격히 감소하였다. IBA와 IAA 농도에 의한 신초의 재분화율은 TDZ 0.5 mg/L와 IAA 혼용 처리한 구에서 전체적으로 높은 신초의 재분화율을 보였으며 특히 TDZ 0.5 mg/L + IAA 0.3 mg/L 처리구에서 76.7%의 가장 높은 재분화율을 보였다. 서로 다른 탄소원으로써 sucrose와 sorbitol의 영향에 대하여 15 g/L, 30 g/L 농도로 처리한 결과 sorbitol 30 mg/L에서 가장 높은 재분화율을 보였고 또한 절편체 당 신초의 수도 3.5개로 가장 양호하였다. 따라서 sorbitol이 sucrose보다 '황금배'의 신초의 재분화에 있어서 효과적이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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