Roh, Jae Won;Hwang, Ga Eun;Kim, Woo Kyung;Nam, Joo Hyun
Molecules and Cells
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제44권2호
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pp.88-100
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2021
Anoctamin 6/TMEM16F (ANO6) is a dual-function protein with Ca2+-activated ion channel and Ca2+-activated phospholipid scramblase activities, requiring a high intracellular Ca2+ concentration (e.g., half-maximal effective Ca2+ concentration [EC50] of [Ca2+]i > 10 μM), and strong and sustained depolarization above 0 mV. Structural comparison with Anoctamin 1/TMEM16A (ANO1), a canonical Ca2+-activated chloride channel exhibiting higher Ca2+ sensitivity (EC50 of 1 μM) than ANO6, suggested that a homologous Ca2+-transferring site in the N-terminal domain (Nt) might be responsible for the differential Ca2+ sensitivity and kinetics of activation between ANO6 and ANO1. To elucidate the role of the putative Ca2+-transferring reservoir in the Nt (Nt-CaRes), we constructed an ANO6-1-6 chimera in which Nt-CaRes was replaced with the corresponding domain of ANO1. ANO6-1-6 showed higher sensitivity to Ca2+ than ANO6. However, neither the speed of activation nor the voltage-dependence differed between ANO6 and ANO6-1-6. Molecular dynamics simulation revealed a reduced Ca2+ interaction with Nt-CaRes in ANO6 than ANO6-1-6. Moreover, mutations on potentially Ca2+-interacting acidic amino acids in ANO6 Nt-CaRes resulted in reduced Ca2+ sensitivity, implying direct interactions of Ca2+ with these residues. Based on these results, we cautiously suggest that the net charge of Nt-CaRes is responsible for the difference in Ca2+ sensitivity between ANO1 and ANO6.
Stereospecific coordination of racemic 2,3-diaminobutane has been observed in the reaction with platinum(Ⅱ) complexes of optically active 6,6'-dimethyl-2,2'-diaminobiphenyl. The reaction between [Pt (R-dmdabp) Cl$_{2}$] (R-dmdabp is R-6,6'-dimethyl-2,2'-diaminobiphenyl) and unresolved bn (bn is 2,3-diaminobutane) has yielded [Pt(R-dmdabp)-(R-bn)] Cl$_{2}$ only, while the reaction of [Pt(S-dmdabp)Cl$_{2}$] with unresolvd bn has yielded [Pt(S-dmdabp) (S-bn)]Cl$_{2}$ only. On the other hand, the standard [Pt(R-dmdabp) (R-bn)] Cl$_{2}$ complex has been independently prepared from the reaction of [Pt(R-dmdabp)Cl$_{2}$] with R-bn, and the standard [Pt(S-dmdabp) (S-bn)] Cl$_{2}$ from the reaction of [Pt(S-dmdabp)Cl$_{2}$] with S-bn. The stereospecific behavior of the racemic 2,3-diamino-butane is thus confirmed from the comparison of these Pt(Ⅱ) complexes prepared using racemic bn with the standard Pt(Ⅱ) complexes prepared using R-bn or S-bn.
사염화탄소 용액에 대하여 分光光度法으로 연구한 결과 아닐린, N,N-디메틸아닐린 및 N,N-디에틸아닐린과 요오드 또는 일염화요오드 사이에 1:1 錯物이 형성됨을 알았다. 이들 錯物형성에 대한 실온에서의 평형상수는 다음과 같다. $C_6H_5NH_2{\cdot}I_2\;2.05$, $C_6H_5N(CH_3)_2{\cdot}I_2\;15.2$, $C_6H_5N(C_2H_5)_2{\cdot}I_2\;35.5$, $C_6H_5NH_2{\cdot}ICl\;18.5$, $C_6H_5N(CH_3)_2{\cdot}ICl\;25.6$, 및 $C_6H_5N(C_2H_5)_2\;42.0$ l $mole^{-1}$.
본 연구에서는 탄화수소 개질을 위한 예비 개질기에서 에탄의 반응 메커니즘과 이에 적합한 반응속도식에 대한 연구를 수행하였다. 반응 mechanism 분석을 통해 ethane의 개질 반응 중 (CO2+H2,C2H6+H2,C2H6+H2O)3개의 반응이 진행되는 것을 확인할 수 있었으며, 각각의 반응 속도 (CO2+H2($r=3.42{\times}10-5molgcat.-1\;s-1$), C2H6+H2($r=3.18{\times}10-5mol\;gcat.-1s-1$), C2H6+H2O($r=1.84{\times}10-5mol\;gcat.-1s-1$)) 를 구하였다. 이를 통해 C2H6+H2O반응이 rate determining step (RDS)임을 확인하고, Langmuir-Hinshelwood model (L-H model)을 통해 이 반응의 반응식을 r=kS*(KAKBPC2H6PH2O)/(1+KAPC2H6+KBPH2O)2 (KA=2.052,KB=6.384,$kS=0.189{\times}10-2$)로 나타낼 수 있었다. 이렇게 얻어진 반응식은 반응 메커니즘을 고려하지 않고 유도된 power rate law와 비교하였으며, power rate law는 좁은 농도 변화 영역 (ethane 약 2.5-4%, water 약 60-75%)에서는 비교적 유사한 fitting이 이루어졌지만, 넓은 농도 변화영역에서는 반응 mechanism을 토대로 얻은 L-H model 반응식이 실험값과 더 유사한 값을 보이는 것을 확인하였다.
담수답 토양중에서 배양된 Alachlor는 그 분해산물로 1-formyl-2, 3-dihydro-7-ethylindole, 2,6-diethylaniline, 2,6-diethylacetanilide, 2,6-diethyl-N-(methoxymethyl) acetanilide, 2-hydroxy-2', 6'-diethyl-N-(methoxymethyl) acetanilide, 그리고 삼종(三種)의 미확인 화합물을 생성하였다. 환(環)-$^{14}C$ 표식(標識) Alachlor의 사용으로 입증된 바와 같이 토양 현탁액중에서 Alachlor의 수용성 분해산물은 배양기간이 증가함에 따라 증가하였고 Rhizoctonia solani의 배양에서도 유사한 결과를 얻었다. Streptomyces lavendulae Ru3340-8은 주요분해산물로 2-hydroxy-2', 6'-diethyl-N-(methoxymethyl) acetanilide를 최고 25%까지 생성하는 반면 Bacillus brevis IFO 3331, Bacillus cruciviae, 그리고 Pseudomonas putida는 그것을 생성하지 않았다.
1,2,3,4,5,6-hexaalkyl-1,4-dibora-2-cyclohexene은 $B_2Cl_4$로부터 제조할 수 있었으나, 보통실험실에서는 이것을 제조하기 어렵기 때문에 다른 방법에 의한 생성을 시도하였다. 즉,1,4-dimethyl-2,3-diethyl-1,4-dibora-2-cyclohexene, 1 유도체를 potassium과 methyl iodide에 의한 환원${\cdot}$산화반응을 시켜주므로 2,3-dietyl-1,4,5,6-tetramethyl-1,4-dibora-2-cyclohexene, 2를 얻을 수 있었다. 또 이 유도체와 ($({\eta}5-C_5H_5Co(C_2H_4)_2$를 반응시켜 코발트 sandwich 착물인 두 종류의 double-decker, 6 그리고 7, 또 한 종류의 triple-decker, 8을 생성하였다.
연구에서는 PEN 수지 안전관리를 위하여 HPLC-UV 검출기를 이용한 2,6-NDC 및 2,6-NDA 분석법을 확립하였다. 분석법 검증 결과, 2,6-NDC 및 2,6-NDA 모두 $0.002{\mu}g/mL$ 검출한계, $0.005{\mu}g/mL$ 정량한계 및 $0.05{\sim}1{\mu}g/mL$의 농도 범위에서 $r^2$= 0.999 이상의 직선성을 확인할 수 있었다. 또한 회수율도 90~110%임을 확인할 수 있었다.
본 연구에서는 세포외 $\beta$-glucosidase를 생산하는 효모 37개 균주와 Lactobacillus 젖산균 5개 균주 중에서 세포외 $\beta$-glucosidase 효소활성이 우수한 Lactobacillus zeae와 Pichia pijperi을 선발하였고, 2-MBQ와 2,6-DMBQ 생산을 위한 밀배아 발효의 스타터로 사용하였다. P. pijperi 균주만을 이용하여 밀배아를 발효한 경우 2-MBQ는 거의 생성되지 않았으며, 2,6-DMBQ는 발효 개시 후 36시간과 48시간이 경과한 후 각각 $0.02{\pm}0.01$ mg/g 및 $0.02{\pm}0.001$ mg/g의 농도로 생성되었고 Lb. zeae 균주만을 이용하여 밀배아를 발효한 경우에는 발효개시 후 36시간과 48시간이 경과한 후 2-MBQ는 $0.21{\pm}0.02$ mg/g에서 $0.28{\pm}0.06$ mg/g으로 증가하였고 2,6-DMBQ 생성량의 유의적인 차이는 없었다. 효모와 젖산균을 동시에 사용하여 밀배아를 발효했을 때에는 발효 개시 후 36시간이 경과한 후 2,6-DMBQ의 생성량은 효모 및 젖산균을 단독으로 사용한 경우와 비교하여 유의적인 차이를 나타내지 않았지만 2-MBQ의 농도는 0.39${\pm}$0.06 mg/g을 나타내었으며 발효 48시간이 경과하면 더욱 증가하여 0.46${\pm}$0.07 mg/g을 나타내었다. 이러한 결과는 젖산균인 Lb. zeae 균주가 효모인 P. pjperi보다 상대적으로 2-MBQ 및 2,6-DMBQ를 생산하는데 중요한 역할을 하며, 두 균주를 동시에 사용하면 각 균주를 단독으로 사용한 경우와 비교하여 2-MBQ 및 2,6-DMBQ를 생산하는데 상승효과가 있음을 알 수 있었다.
Carbonato and diammine platinum(Ⅱ) complexes of resolved 6,6'-dimehtyl-2,2'-diaminobiphenyl have been prepared. The absolute configuration of the square planar platinum(Ⅱ) complexes is determined on the basis of stereospecificity of the 6,6'-dimethyl-2,2'-diaminobiphenyl ligand, circular dichroism spectra of the complexes, and nonempirical circular dichroism method.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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