Vitellogenin (VTG) induction in response estradiol-17${\beta}$ ($E_2$) were electrophoretically examined in primary hepatocyte cultures in rainbow trout. The hepatocytes were maintained as monolayers on positively charged dishes for up to 7 days. The viability of hepatocytes on Day 7 in cultures decreased about 20.7% and 23.6% with and without $E_2$, respecitively. The amount of DNA per dish also decreased to 13.7% and 14.0% with and without $E_2$, respectively. There were no differences in viability and DNA content between the control and $E_2$-treated culture. Moreover, the rate of VTG to total protein concentrations reached the maxium level at the addition of $10^{-6}$ M E2, to the incubation medium. However, the higher concentration of $10^{-5}$ M $E_2$ rater depressed the level.
The study was designed to determine the estrogenic effect of some penicillins on endocrine function in adult Japanese medaka (Oryzias latipes). Vitellogenin (Vtg) produced in male fish has been used for a biomarker to study endocrine disrupters. $17\beta-estradiol\;(E_2)$ was used a positive control that was induced Vtg in male fish. Result of total protein qantification and ELISA for female and male fish were exposed to $17\beta-estradiol$ 10ng/ml for $3\sim5$ days. As a result, male fish exposed to amoxicillin respectively appeared 0.75, 0.23, 8.21 and $9.36\%_{\circ}$ of 1, 10, 100 and 1000 ppm respectively, that value was elevated compared with control male fish. Male fish exposed to ampicillin respectively appeared 1.85, 4.68, 0.85 and $39.59\%_{\circ}$ of 1, 10, 100 and 1000 ppm respectively, that value was elevated compared with control male fish. This study is one of the first reports suggesting potential endocrine disruption of some penicillins in aquatic ecosystem. These results suggest that vitellogenin and estrogen receptor induction patterns alter in male medaka treated with selected estrogenic compounds, and that these results may be useful molecular biomarkers for screening estrogenic EDCs (endocrine-disrupting chemicals) in the shortest possible time.
These studies were undertaken to examine the relationship between tamoxifen and sex steroid hormones in rat uterine morphology and the effect of tamoxifen on sex steroid hormone levels, implantation and myometrial contraction. The results obtained were as follows : 1) The increase in height of the luminal epithelium caused by tamoxifen treatment was blocked by progesterone. The increase in height of luminal epithelium caused by $estradiol-17{\beta}$ treatment was blocked by tamoxifen. 2) When a single dose of tamoxifen(10, 20, $40{\mu}g$) was given on Day 2 of pregnancy, implantation was prevented. Plasma $estradiol-17{\beta}$ level fell in a dose-dependent manner but plasma progesterone level was constant. 3) In vitro, tamoxifen decreased rat uterine contractility in a dose-dependent manner.
Park C. S.;Sung N. D.;Kim C. H.;Jin D. I.;Choi Y. S.;Yi Y. J.
Reproductive and Developmental Biology
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v.29
no.1
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pp.25-30
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2005
This study was carried out to investigate the effects of semen characteristics, frozen-thawed sperm viability and serum FSH, LH, estradiol-17β and testosterone concentrations between breeds and among seasons in boars. In all seasons, Yorkshire boars produced higher semen volume compared with Duroc boars, whereas sperm concentration did not differ significantly between Duroc and Yorkshire boars. Semen volume in spring was higher compared with summer, autumn and winter in both Duroc and Yorkshire boars, but sperm concentration did not differ significantly among seasons. Sperm motility and normal acrosome rate of frozen-thawed sperm produced in spring were higher than those in summer, autumn and winter in both Duroc and Yorkshire boars. Sperm motility of frozen-thawed sperm in Yorkshire boars was higher than that in Duroc boars regardless of seasons. However, normal acrosome rate did not differ significantly between Duroc and Yorkshire boars. Serum FSH concentration in Yorkshire boars was lower than that in Duroc boars in all seasons. However, there were no significant differences on serum FSH concentration of Duroc and Yorkshire boars among seasons. Serum LH and estradiol-17β concentrations did not differ significantly between Duroc and Yorkshire boars. Also, there were no significant differences in serum LH and estradiol-17β concentrations of Duroc and Yorkshire boars among seasons. Serum testosterone concentration in Yorkshire boars was higher than that in Duroc boars in all seasons. In both breeds, serum testosterone concentrations were higher in spring than in summer, autumn and winter. In conclusion, when serum FSH concentrations were low, semen volumes were high, and when serum testosterone concentrations were high, sperm motility and normal acrosome rate of frozen-thawed sperm were high.
KIM Yoon;KIM Woo Jin;BAEK Hea Ja;KIM Kyung Kil;BANG In Chul;HAN Chang Hee
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.30
no.3
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pp.480-487
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1997
Vitellogenin (Vg) was purified from plasma of $estradiol-17\beta(E_2)-treated$ spotted flounder, verasper variegatus, by preripitation with cold distilled water, followed by fractionation using a Sepharose CL-6B column chromatography. $E_2-induced$ protein was identified as Vg by SDS-PAGE and western blot analysis. The molecular weight of the purified Vg was estimated 175 kD as determined by SDS-PAGE. In order to measure the Vg level, monoclonal antibodies against Vg were produced by hybridoma technique. Purified Vg was immunized into Balb/c mice and then the spleen cells from mice were fused with NS-1 myeloma cells. The hybridoma cells were screened by enzyme-linked immunosorbent assay (WLISA) and subcloned by limiting dilution. The hybridoma clones which secreted antibodies highly reactive to the purified Vg were designated as 4D6. Its specificity was demonstrated by western blot from plasma of untreated, $E_2-treated$ male fish, and purified Vg.
Punica granatum, L. (Pomegranate) has 613 seeds which accidentally corresponds to the 613 commandments in the Bible. Accordingly, the fruit has been worshipped by the Jewish and other religious people from the ancient. Pomegranate's seed, peel and juice contain a variety of ethnomedical components so much as the sum of three kinds of other common fruits. The number of published papers related to the pomegranate in recent 7 years flourished 7 times more than before at the bases of Medline record. Since the containments of estrogen, as $17{\alpha}-estradiol,\;17{\beta}-estradiol$, estrone, and estradiol, etc., in pomegranate have been reported, public interests and commercial values of pomegranate arose considerably. The report was disproved later, however, merits of this fruit remained yet; clinical efficacy for preventing and remediating cancers including breast and prostate cancers by oral administration of the juice, seed oil, and peel extract is still believed to be true. In this review, target components of pomegranate such as antioxidants, anticancers, antiestrogens and ethnomedical components were analyzed and discussed along with examining its pharmaceutical efficacy and prescription to postmenopausal lesion, cardiosclerosis, cosmetic beautification, viral and allergic symptoms, and diabetes mellitus, etc.
It is well publicized that the existence of various endocrine disrupting chemicals threatens normal sexual development of many sedentary marine fishes in the coastal areas. However, a suitable marine fish species for efficient monitoring of this threatening has yet to be identified. One of the difficulties in estimating the effect of endocrine disruption in marine fish is the absence of clear distinction between testicular and ovarian structures at the early stages of sex differentiation. In search of a potential test species, we have investigated the microscopic structures of sexually undifferentiated and differentiated gonads and the susceptibility of gonadal differentiation to exogenous sex steroids during the sex differentiation period in a sedentary marine rockfish, Sebastes schlegeli. Male gonads in this species contained dark pigmentation that made them distinct from female gonads. Treatment either with $estradiol-17\;{\beta}(E_2)$ or $17\;{\alpha}-methyltestosterone$ (MT) significantly altered the sex ratios with the complete sex changes or the occurrence of ovotestis that was easily identified by the mixed structure of dimorphic gonads (coexistence of ovarian cavity/primary oocytes and dark pigmentation/seminiferous tubules). Results in this study suggest that S. schlegeli can be developed as a monitoring/test fish species for endocrine disruption in marine fish in the coastal areas.
The study was designed to investigate the effects of progesterone and estrogen on the uterus of rats by immunohistochemical methods using Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA) antibody. Eighteen female rats(Wistar), weighing initially about 300g, were ovariectomized. These rats were divided into four groups, progesterone-treated group, estrogen-treated group, estrogen+progesterone-treated group, and control group, progesterone-treated group was injected with 1mg of progesterone per rat per day for 2 days and estrogen-treated group with $20{\mu}g$ of $17{\beta}-estradiol$ for 3 days and estrogen+progesterone-treated group with $17{\beta}-estrdiol$ for 3 days and then with progesterone for 2 days as above. In gross findings, the uteri were markedly hypertrophied by estrogen treatment but were not affect in size by progesterone treatment. Immunohistochemical investigation was performed on the cell types with higher appearance of PCNA positive reaction cells in four groups. The groups with higher appearance of the stromal cells were ordered as estrogen-treated group, progesterone-treated group, estrogen+progesterone-treated group, and control group. The muscle cells were ordered as progesterone-treated group, estrogen-treated group, estrogen+progesterone-treated group, and control group. Positive reaction cells of the stromal cells were total 4.6 times higher than those of muscle cells. Therefore, the affect of the hypertrophy on the uterus by estrogen was larger than those of progesterone and affect on the uterus by stromal cells were larger than those of muscle cells. The group with more PCNA positive reaction cells of luminal epithelial cells were ordered as control group, progesterone-treated group, estrogen+progesterone-treated group, and estrogen-treated group, and glandular epithelial cells were ordered as estrogen+progesterone-treated group, progesterone-treated group, control group, and estrogen-treated group. It was suggested that estrogen and progesterone did not affect on the proliferating cells of luminal epithelial cells and affection of progesterone on the development of glandular epithelial cell was larger than that of estrogen.
The aim of this study was to assess the precision of the estimates of the time of estrous cycle, optimal breeding and ovulation derived by vaginal cytology. The thirteen Korea Jin-do dogs were examined the vaginal cytology, plasma estradiol-17$$\beta $ and progesterone assay during the estrous cycle. Day 0 was the day of the first male acceptance. The main change of vaginal cytology during the estrous cycle was the high proportion of anuclear cell and erythrocyte in proestrus, superficial cell, anuclear cell and erythrocyte in estrus, parabasal cell, large intermediate cell and leukocytes in diestrus, and parabasal cell and small intermediate cell in anestrus, respectively. These data indicated that vaginal cytology was reliable method for estimating estrous cycle in Korea Jin-do dogs. In the cell indices during estrus the maximum eosinoghilic index was $92.0{\pm}$2.6 (Mean{\pm} SEM$)% at Day 2 and the maximum cornification indez was $96.0{\pm}1.3%$ at Day 2, respectively. The eosinothilic indez and cornification indez of up to 70% were found at Day -1 to Day 5 and Day -6 to Day 8, and up to 80% at Day 1 to Day 4 and Day -4 to Day 6, respectively. From these data it was presumed that eosinophilic index was more reliable index for monitoring optimal breeding time than cornification indexm because eosinophilic index peak period was shorter than cornification indeX peak period and Day 2 was the day of ovulation. Therefore, optimal breeding time was the eosinophilic index peak period, more than 80% of eosinoghilic index. The $estradiol-17{\beta}$ peak, with 3 days delayed when progesterone concentration was $4.5{\pm}0.5 ng/ml$. These data estimated that the ovulation time was the day of eosinophilic index peak, Day 2. breeding time and pvulation time in Korea Jin-do dogs.
Lee, Nam Kyung;Jang, Kyoung Hwa;Lee, Jong Tae;Park, Hee Won;Han, Sung Tai;In, Gyo
Natural Product Sciences
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v.25
no.1
/
pp.49-58
/
2019
Eleven steroid hormones (SHs: androstene-3,17-dione, estrone, ${\beta}$-estradiol, ${\alpha}$-estradiol, testosterone, dehydroepiandrosterone, $17{\acute{a}}$-hydroxyprogesterone, medroxyprogesterone, megestrol acetate, progesterone, and androsterone) were detected from New Zealand deer (Cervus elaphus var. scoticus) velvet antler (NZA, 鹿茸 ). A method for the quantification of eleven SHs was established by using ultraperformance liquid chromatography (UPLC)-MS/MS. The linearities ($R^2$ > 0.991), limits of quantification (LOQ values, 0.3 ng/mL to 23.1 ng/mL), intraday and interday precisions (relative standard deviation: RSD < 2.43%), and recovery rates (97.3% to 104.6%) for all eleven SHs were determined. In addition, a method for the quantification of three 7-oxycholesterols (7-O-CSs: 7-ketocholesterol, $7{\alpha}$-hydroxycholesterol, and $7{\beta}$-hydroxycholesterol) in the NZA was established by using an HPLC-photodiode array (PDA) method. The linearities ($R^2$ > 0.999), LOQ values (30 ng/mL to 350 ng/mL), intraday and interday precisions (RSD < 1.93%), and recovery rates (97.2% to 103.5%) for the three 7-O-CSs were determined. These quantitative methods are accurate, precise, and reproducible. As a result, it is suggested that the five steroid compounds of androstene-3,17-dione, androsterone, 7-ketocholesterol, $7{\alpha}$-hydroxycholesterol, and $7{\beta}$-hydroxycholesterol could be marker steroids of NZA. These methods can be applied to quantify or standardize the marker steroids present in NZA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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