감귤의 저온저장 중 부패방지를 위한 천연항균제 개발의 일환으로 감귤의 저온저장 중 과피로부터 분리한 곰팡이를 MEA와 PDA 배지에서 배양하면서 분생자병과 분생자의 형태적 특성을 조사한 결과 플라스크형의 phialide, 분생자병의 branching type이 simple type이며, conidial head가 columnar shape 등의 특징을 갖는 Penicillium sp. CF-301로 동정되었다. 또한 국내 자생식물을 채집하여 유기용매로 추출한 후 향균활성을 조사한 결과 측백나무 열매와 주목나무를 제외한 8종의 식물 추출액이 감귤부패균에 대하여 향균활성을 보였으며, 특히 측백나무 즙액은 8mm의 투명환을 보여 가장 높은 항균활성을 나타내었다.
B. subtilis에 대한 항균 활성을 파악하기 위하여 bacteriocin의 일종인 leucocin A로 형질전환된 효모를 배양 시간별로 채취하여 광학밀도, 총 분비 단백질량, 단백질 분해효소 그리고 향균활성을 측정했다. Sucrose > glycerol > glucose > fructose 순으로 세포 증식이 높게 확인되었고, glyceroldmf 제외한 탄소원에서 총분비 단백질은 배양 15 시간까지 증가되었다. Leucocin A의 향균활성(antibacterial activity)은 성장양상, 총 분비 단백질과 비례 하였으며 배양 15 시간에 glucose와 sucrose에서 배양한 상등액이 B. subtilis 성장을 가각 $65.5\%$, $72.6\%$ 감소하는 것으로 나타났다. 정지기 이후에는 향균활성이 급속히 감소하였는데, 이는 항균활성을 보이는 leucocin A가 단백질이고, 단백질 분해효소가 정지기 이후 증가한 것에 의한 것으로 사료된다. 본 연구는 향후 식품산업뿐만 아니라 항생제 생산 사용되기 위한 산업적 기초 자료로써 이용 될 것이다.
중합체약 Polymethacryloylsulfadiazine의 합성은 DCC법과 Acid Chloride법으로 비교 검토하고 그 중합체약에 대한 향균활성을 측정하였다. 중합체약은 Acid Chloride법에의하여 높은 수득률(72%)로 합성할 수 있었으나, DCC법은 수득률(23%)이 낮았다. 중합체약의 향균활성 측정은 2단계 희석법에 의한 최소 발육 저지 농도로서 조사였으며, Bacillus subtillis ATCC 6633, Mycrobacterium phlei IFO 3158, Micrococus luteus ATCC 9341, Salmonella tyhimurium KCTC 1925, 및 Klebsiella pneumoniae DCTC 1560 균주들에 대해서는 강한 항균력을 보여주었다. 그러나, Staphylococcus aureus IFO 12732, Escherichia cole BE 1186, Escherichis coli AB 0111 및 Pseudomonas aeruginosa IFO 13130 균주들에 대해서는 유사한 항균력을 나타냈다. 한편 sulfadiazine 향균제가 진균류에 대햐여 감수성을 보이지 않는 것처럼 중합체약에 있어서도 candida albicans IFO 1594 균주는 항균력을 나타내지 않았다.
Levofloxacin은 ofloxacin의 L형의 광학이성질체로 D형의 ofloxacin보다 뛰어난 향균활성을 갖는다. 본 연구에서는 광학선택성을 지닌 외래 효소를 재조합균주에서 발현시키고 고농도배양과 세포고정화를 통해 levofloxacin을 생산하였다. E. coli 고농도 배양을 수행하여 89 g/L의 세포농도를 얻었으며 IPTG 1 mM로 단백질 발현을 유도하여 levofloxacin 생산 반응에 사용할 때 최적 첨가시기를 결정하였다. 세포고정화를 위해서는 sodium alginate를 사용하였으며 1.5% 첨가시 가장 우수한 효소활성을 나타내었고 재사용시에도 효소활성과 광학선택성이 유지됨올 확인하였다.
원예산물의 저온저장중 부패방지를 위한 천연항균제 개발의 일환으로 식용 가능한 식물을 채집하여 E. coli K 12, B. subtilis K KCTC 1028 및 딸기부패균에 대한 항균활성을 조사하였다. 사철 쑥, 가죽나무 잎, 초피 잎, 적송 잎, 뽕 잎, 씀바귀, 마늘의 즙액은 E. coli와 B. subtilis에 대하여 높은 항균활성을 보였다. 이들 식물체 즙액으로부터 n-hexane, ethyl ace떠te, chloroform 및 물로 용매분획한 분획물로 항균성을 재검색한 결과, 사철쑥, 가죽나무 잎, 적송 잎, 씀바귀의 ethyl acetate 분획과 초피 잎과 마늘의 모 든 분획에서 비교적 높은 향균활성을 보였으며 가죽나무 잎의 ethyl acetate 분획 이 가장 높은 항균활성(6 nun)을 보였다. 한편 딸기의 저온저장중인 과육으로부터 두 종의 부패 세균을 분리하 여 각각 Staphylococcus sp. TG-IOI과 Staphylococcus sp. TG-I02 로 동정하였다. 이들 균주에 대한 항균성을 조사한 결과, 가죽나 무 잎의 ethyl acetate 분획에서 두 균주에 대하여 가장 높은 저 해효과(각각 6 mm, 7 nun)를 보였다.
본 연구는 마늘속에 alliin을 크로마토그래피에 의하여 함량을 알고 이들이 에탄올추출물에 향균효과를 알아보기 위하여 연구했다. HPLC를 이용하기 위하여 메탄올로 Alliin을 추출하고 유해세균에 대한 향균활성을 알아보기 위하여 Alliin을 에탄을 추출물 시료를 조제하여 사용하였다. 마늘에는 alliin의 함량은 0.34 ∼0.73% fresh weight를 나타내고 에탄을 추출물의 시료에서 동결건조 시료수율이 가장 높았는데 이는 효소적 분해가 최소화되는 것으로 사료되며 에탄을 추출물의 향균효과는 Table 3에서 각 균주에 대하여 억제효과는 각 균주에서 50∼80% 효과를 보았고, 각종 균에 대한 억제차원에서 향균성을 달리하는 것을 알 수 있었으며 유해세균에 대한 향균작용이 마늘 추출물은 미생물의 발육저지력이 강하고 지속적으로 인체에 무해하므로 보존료 개발이 바람직함을 알았고, 독특한 향미를 주는 황화합물이 많아 산도의 증가와 관계없이 항균력이 강함을 보았고, 각종 균에 대한 항균성을 달리 하는 것을 알 수 있었다. 이로 인해 마늘성분중 선택적인 항균물질의 개발이 요구됨을 알았다.
Irradiated and non-irradiated Korean medicinal herbs were extracted by water and 70% ethanol. Antimicrobial activity of these extracts were invesigated against selected food hygiene microoganisms. The ethanol extracts of the non-irradiated Agrimonia pilosa ledebour japonica Nakai, Curcuma longa Linne and Angelica gigas Nakai were completely inhibited on four species of bacteria, such as Vibrio parahaemolyticus, Clostridium perfringenes, Bacillus subtilis and Staphylococcus aureus. Also, above four strains did not have antibacterial activity in the water-ethanol mixtures. Futhermore, the ehtanol extracts of the non-irradiated Agimonia pilosa ledebour Japonica Nakai, Curcuma Iedoaria Roscoe, Curcuma longa Linne and Scutellaria baikalensis George were shown inhibitory effects against Aspergillus flavus and Pen icillium islandicum. And the water extract of Scutellaria baikalensis George was the same effect to these molds. Essentially the same results were observed when samples irradiated at a dose of 10 kGy.
Propolis 에탄올 추출물(EEP)의 천연 보존제로서의 가능성을 확인하기 위하여 80% 에탄올로 추출하여 제조한 propolis추출물을 소시지에 농도별로 첨가한 후 $20^{\circ}C$에서 7일 동안 저장하면서 그 효과에 대하여 조사하였다. EEP가 농도별로 참가된 소시지의 pH는 저장 기간이 지남에 따라 대조군에 비하여 서서히 증가하는 경향이었으며, 생균수 및 대장균 군수는 저장시간이 지남에 따라 농도 의존적으로 낮게 나타나 향균활성이 있음을 나타내었다. 육제품의 선도 판단의 지표가 되는 TBA가 및 VBN 함량도 역시 EEP 첨가 농도에 비례적으로 감소하여 propolis가 식품의 천연 보존제로서의 가능성이 있음을 강하게 시사하였다. 또한 EEP의 아질산염 소거능은 저장기간이 지남에 따라 첨가 농도에 비례하여 감소하는 경향이었는데, 특히 EEP 5% 첨가 소시지가 가장 효과가 우수한 것으로 나타났다.
본 연구는 폐기되는 차나무 열매를 이용하여 향균활성과 항종양활성을 비교하고 이용가능성에 대하여 탐색하고자 하였다. 항균활성과 항종양활성을 알아보기 위하여 70% 에탄올과 물 추출물의 활성을 측정하였다. 항균활성은 식중독균과 몇 종의 병원균, 효모, 곰팡이 등 17균주에 대하여 추정하였고, 항종양 활성은 6종류의 인체 암세포주, 1종류의 정상세포주에 대하여 조사하였다. 차나무 잎, 종자와 과피의 항균활성을 비교한 결과는 종자의 70% 에탄올과 물 추출물에서 효모에 대하여 항균활성이 높게 나타났다. 특히, candida albicans, Cryptococcus neoformans에 대하여 항균활성을 보였다. 종자 물 추출물을 $80,\;100^{\circ}C$에서 30분, $121^{\circ}C$에서 15분간 열처리 후 항균활성을 검색한 결과 가열온도에 따른 차이는 크게 나타나지 않았다. 항종양 활성을 검색하기 위하여 MTI assay를 통해 활성을 측정하였다. 과피 추출물에서 전혀 활성이 없었지만 종자 추출물에서는 큰 활성을 나타내었다. 극성용매인 70% 에탄올과 물 추출물의 종양세포 증식억제효과가 높게 나타났으며 그중에서 물 추출물이 70% 에탄올 추출물 보다 높게 항종양 활성이 나타났다. 차나무 종자로부터 추출한 활성물질의 종양세포와 정상 세포에 대한 세포독성을 MTT assay로 비교한 결과 $50{\mu}g/mL$의 농도에서 난소암 세포인 SK-OV-3는 70%의 억제율을 나타낸 반면 정상세포에서는 10% 미만으로 나타나 정상세포보다 종양세포에 대하여 보다 큰 선택 독성을 나타내는 것으로 보인다.
국내산 점토광물들의 식품 잠재적 가치를 알아보고, 그 활용 특성에 대해 알아보기 위해 점토광물에 대한 항산화성, 항균성, 물성에 대한 영향, 고미취 흡착능력 등을 측정하였다. 전자 공여능에 의한 항산화력 측정 결과 bentonite가 20.6%로 가장 우수하였다. 과산화물가에 의한 항산화력 측정결과 저장 7일째의 POV가는 control 310 meq/kg이었으며, vermiculite가 100 meq/kg로 가장 우수한 산패 지연 효과를 나타내었고, TBA가에 의한 항산화력은 zeolite가 가장 우수하였다. 향균활성 측정결과 illite, vermiculite, zeolite를 첨가한 배지에서 E. coli, .S. aureus의 균주에 대해 증식 지연 효과를 나타내었으며, 농도가 높아질수록 증식 속도가 지연되었다. 응력완화와 파손강도 측정으로부터 각 점토광물은 무의 조직과 물성에 영향을 미치는 것으로 나타났다. 쌀의 취반시 kaolin, vermiculite를 첨가하였을 때 pentanol, hexanal, nonanal, linoleate, stearic acid, oleic acid 등 고미취의 원인이 되는 대부분 화합물의 peak area는 감소하였다. 이러한 결과로부터 국내산 여러 점토광물은 항산화력 및 유지 산패 지연능력을 가지고 있으며, 향균활성 및 물성 변화 억제 그리고 고미취의 원인이 되는 여러 화합물들을 흡착하는 등 여러 가지 각종 부수적인 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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