The aim of this study is to optimize the monolayer cultivation of human articular chondrocytes in serum-free media. For this purpose, chondrocytes were isolated from human articular cartilage and monolayer cultures were performed in DMEM/F12 medium with 10% fetal bovine serum (FBS) or serum-free media (SFM) containing various supplements and epidermal growth factor (EGF). Western blotting analysis, RT-PCR, dimethylmethylene blue (DMB) assay were carried out to evaluate the synthesis of collagen type II (Col. II) and glycosaminoglycans (GAGs). We observed that SFM with EGF stimulated the cell growth while the amounts of synthesized GAGs and Col. II were decreased gradually. However, the Col. II mRNA level was increased when the SFM was replaced by media containing 10% FBS. This study suggests that it is possible to obtain large amount of human articular chondrocytes by short-term monolayer cultures in SFM.
Cancer cells grow in an environment composed of various components that supports tumor growth. Major cell types in the tumor microenvironment are fibroblast, endothelial cells and immune cells. All of these cells communicate with cancer cells. Among infiltrating immune cells as an abundant component of solid tumors, macrophages are a major component of the tumor microenvironment and orchestrates various aspects of immunity. The complex balance between pro-tumoral and anti-tumoral effects of immune cell infiltration can create a chronic inflammatory microenvironment essential for tumor growth and progression. Macrophages express different functional programs in response to microenvironmental signals, defined as M1 and M2 polarization. Tumor-associated macrophages (TAM) secret many cytokines, chemokines and proteases, which also promote tumor angiogenesis, growth, metastasis and immunosuppression. TAM have multifaceted roles in the development of many tumor types. TAM also interact with cancer stem cells. This interaction leads to tumorigenesis, metastasis, and drug resistance. TAM obtain various immunosuppressive functions to maintain the tumor microenvironment. TAM are characterized by their heterogeneity and plasticity, as they can be functionally reprogrammed to polarized phenotypes by exposure to cancer-related factors, stromal factors, infections, or even drug interventions. Because TAMs produce tumor-specific chemokines by the stimulation of stromal factors, chemokines might serve as biomarkers that reflect disease activity. The evidence has shown that cancer tissues with high infiltration of TAM are associated with poor patient prognosis and resistance to therapies. Targeting of TAM in tumors is considered a promising therapeutic strategy for anti-cancer treatment.
Lee, So Jin;Kim, Hye Yun;Kim, Seul Ji;Yang, Jaewon;Lee, Seon Ui;Park, Chan Hum;Joo, Choun-Ki;Khang, Gilson
Polymer(Korea)
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v.38
no.3
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pp.364-370
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2014
The retinal pigment epithelium (RPE) plays an important role in maintaining a healthy retina and the degeneration of RPE caused a number of retinal diseases. The transplantation of RPE has recently become a possible therapeutic modality for retinal degeneration. To transplant RPE cells securely, substrates are essential, and then as a substrate, we fabricated films using silk that has unique mechanical properties and biocompatibility. After the FTIR spectra, contact angle and biodegradation of silk films were confirmed, RPE cells were seeded and the influence of RPE cells on silk films was examined. We measured the cell adhesion, cell viability, morphology and specific mRNA expression by MTT assay, SEM, immunofluorescence and RT-PCR. In this study, we confirmed that attachment, proliferation and phenotype maintenance of RPE cells cultured on silk films were great, and thereby we were able to confirm the potential applications of silk films as tissue engineering carrier for regeneration of retina.
Solid tumors are heterogeneous populations of multiple cell types. While the majority of the cells that comprise cancer are unable to divide, cancer stem cells have self-renewal and differentiation properties. Normal stem cell pathways that control self-renewal are overactivated in cancer stem cells, making cancer stem cells important for cancer cell expansion and progression. Dick first proposed the definition of cancer stem cells in acute myeloid leukemia, according to which cancer stem cells can be classified based on the expression of cell surface markers. Cancer stem cells maintain their potential in the tumor microenvironment. Multiple cell types in the tumor microenvironment maintain quiescent cancer stem cells and serve as regulators of cancer growth. Since current cancer treatments target proliferative cells, quiescent state cancer stem cells that are resistant to treatment increase the risk of recurrence or metastasis. Various signals of the tumor microenvironment induce changes to become a tumor-supportive environment by remodeling the vasculature and extracellular matrix. To effectively treat cancer, cancer stem cells and the tumor microenvironment must be targeted. Therefore, it is important to understand how the tumor microenvironment induces reprogramming of the immune response to promote cancer growth, immune resistance, and metastasis. In this review, we discuss the cellular and molecular mechanisms that can enhance immunosuppression in the tumor microenvironment.
Gwak, Gyeong-A;Thai, Van Viet;Lee, Byeong-Taek;Song, Ho-Yeon
Proceedings of the Materials Research Society of Korea Conference
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2009.11a
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pp.43.1-43.1
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2009
Bone plate는 골절된 뼈의 골 유합을 지지하기 위해서 정형외과, 신경외과, 성형외과 및 치과 등에서 널리 사용되고 있다. 하지만 기존의 bone plate는 대부분 금속으로 제작되어 있어 장기간 이식에 따른 부식 및 천연골 강도저하 등으로 인해 1~2년 후 재수술을 해야 하는 문제점을 갖고 있다. 본 연구에서는이런 금속 bone plate의 단점을 개선하고자 생체적합성이 우수한 생분해성 고분자 bone plate를 제작하였다. 사용된 고분자는 생체적합성과 생분해성이우수한 PVA(polyvinly alcohol)와 강도를 유지하기 위한 PMMA(poly methyl methacrylate)를 사용였다. Electrospinning 법으로 PVA와 PMMA fibrous mat를 제작하여 각 mat를 적층시킨 후 열압착을 하여 강도를 증가시킨 PMMA/PVA Mutlilayer bone plate을 제작하였다. 제작된 PMMA/PVA Mutlilayer bone plate의 생체적합성 평가를 위해 MTT assay, 생분해 특성을 관찰하기 위해 Micro-CT와 SBF(simulated body fluid) 내에서의 용해도를 관찰하였다. 또한조골세포의 부착과 분화에 미치는 영향을 SEM(scanning electron microscope)을통해 관찰하였고, 조골세포의 유전자 발현에 미치는 영향을 RT-PCR을통해 확인하였다.
Three-dimensional (3D) printing is driving major innovation in various areas including engineering, manufacturing, art, education and biosciences such as biochemical engineering, tissue engineering and regenerative medicine. Recent advances have enabled 3D printing of biocompatible materials, cells and supporting components into complex 3D functional tissues. Compared with non-biological printing, 3D bioprinting involves additional complexities which require the integration of technologies from the fields of biochemical engineering, biomaterial sciences, cell biology, physics, pharmaceutics and medical science.
In this study, diffusion coefficients of 20 kDa FITC-dextran in 2% agarose gel with different cell concentrations were measured using fiberoptic-based fluorescence recovery after photobleaching technique. As increasing cell concentration suspended in agarose gel, the diffusion coefficients were decreased. The diffusion coefficient of agarose gel which contains $10{\times}10^6$ cells/ml was decreased to 11% that of in agarose gel without cells. The distribution of fluorescence dye in 3D scaffold was also simulated. The simulation result shows that the diffusion coefficient is more significant factor than the scaffold structure.
Production of shikonin derivatives by Lithospermum erythrorhizon cells by using polyurethane foam was invesliigated. Shikonin derivatives were effectively adsorbed mostly by phase distribution to polyurethane matrices and their production increased significantly compared to the suspension culture. The enhanced production of shikonin was probably due to more facilitated cell to cell con-tact and lowered intracellular shikonin concentration, both of which are known to be favorable for plant secondary metabolite production. In order to improve the process productivity, tell culture was conducted under various culture conditions: Of them, Schenk and Hildebrandt medium containing indole-3-acetic acid (1.75mg/ι) and kinetin (0.1mg/ι) was considered most appropriate for shikonin production. Production of shikonin increased about 4.5 times in the Schenk and Hildebrandt medium containing indole-3-acetic acid (1.15mg/ι) and kinetin (0.1mg/ι) when compared to the same medium containing p-chlorophenoxyacetic acid (2.0mg/ι) and kinetin (0.1mg/ι). When poly-urethane was used as the support material, a single-stage system was more preferred to the conventional two-stage culture system in terms of shikonin productivity.
Journal of Korean Society of Industrial and Systems Engineering
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v.31
no.4
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pp.77-85
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2008
생물학적인 셀 인젝션 기술은 유전자 주입, 시험관 배양, 인공수정 및 신약개발 분야에서 광범위하게 사용되어 오고 있는 기술이다. 생물공학에서 다루는 셀 인젝션 기술은 크게 착생세포 인젝션과 서스펜디드 셀 인젝션으로 구분할 수 있다. 최근 상용화 장비로 출시되고 있는 것들은 착생세포에 대한 자동 인젝션 시스템이 대부분을 차지하고 있다. 반면, 서스펜디드 셀 인젝션 시스템의 경우는 비교적 최근들어 자동화 장비 및 방법론의 개발에 대한 논의가 이루어지고 있는 실정으로 실제 수많은 연구자들의 노력에 힘입어 서스펜디드 셀을 대상으로 한 통합 자동화 셀 인젝션 시스템의 개발이 가속화되고 있기는 하지만 이에 대한 만족할 만한 성과는 아직 이루어 지지 않고 있는 실정이다. 본 논문은 서스펜디드 셀을 대상으로 한 인젝션 시스템 개발에 관한 것으로 특히 셀 홀딩 시스템과 최적의 인젝션 피펫 궤적을 결정하기 위한 시스템 개발에 관한 것이다. 본 논문에서 다루어지는 서스펜디드 셀은 통합 자동화를 위하여 특별히 고안된 셀홀딩 시스템에 의하여 배열의 형태로 고정되며, 셀 인젝션 시스템은 엠브리오와 인젝션 피켓을 이미지 프로세싱 기술에 의하여 인식하고 피펫의 인젝션 궤적을 결정하는 것을 포함하고 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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