Diversity of myxobacteria in five soil samples from Asansi and Uponeup in Korea was explored by means of polymerase chain reaction (PCR) using primers that specifically bind 16S rDNA of myxobacteria. DNA sequence analysis of 76 PCR fragments containing myxobacterial 16S rDNA revealed five putative novel myxobacterial genera whose 16S rDNA sequences shared <95% sequence identity with those of the type strains. This finding indicates the presence of many uncultured and unidentified myxobacterial species in Korean soil.
Myxobacteria produce diverse secondary metabolites for predation, self-defense, intercellular signaling, and other unknown functions. Many secondary metabolites isolated from myxobacteria show pharmaceutically useful bioactivity such as anticancer, antibacterial, and antifungal activities with a unique mechanism of action. Therefore, a large number of myxobacterial strains have been isolated globally and many bioactive compounds have been purified from them. However, 16S rRNA database analysis indicates that there are far more types of myxobacterial species in the wild than have ever been isolated, and genome sequence analysis suggests that each myxobacterium is capable of producing much more metabolites than already known. In this article, the current status of studies on the secondary metabolites from myxobacteria, their biosynthetic genes, biological functions, and transcriptional regulatory factors governing gene expression were reviewed.
Bacteriolytic myxobacteria have been known to secrete various antifungal metabolites against several soilborne phytopathogens including Phytophthora. Among the three isolates of Myxococcus spp., KYC 1126 and KYC 1136 perfectly inhibited the mycelial growth of Phytophtora capsici in vitro. In order to show the biocontrol activity on Phytophthora blight of hot pepper, we tried to find the best way of application of a myxobacterial isolate. Although KYC 1126 fruiting body was easily grown on the colony of Escherichia coli as a nutrient source, it did not control the disease when it was pre-applied in soil. Before the bioassay of a liquid culture filtrate of KYC 1126 was conducted, its antifungal activity was confirmed on the seedlings applying with the mixture of the pathogen's zoospore suspension and KYC 1126 filtrate. On greenhouse experiments with five and four replications, the control value of KYC 1126 on phyllosphere and rhizosphere was 88% and 36%, respectively. Whereas, the control value of dimetnomorph+propineb on phyllosphere was 100% and that of propamorcarb on rhizosphere was 44%. There was a phytotoxicity of the myxobacterial filtrate when seedlings were washed and soaked for 24 hours. Gummy materials were covered with roots. And stem and petiole were constricted, then a whole seedling was eventually blighted.
As an effort to search new bacterial biocontrol agents against pepper anthracnose, we screened myxobacteria, which might inhibit the growth of Colletotrichum acutatum, the agent of that plant disease. When 93 myxobacterial strains including 59 Myxococcus spp. and 34 Corallococcus spp. were tested against C. acutatum ACYSJ001 on agar plates, 10 strains identified as the genus Myxococcus significantly obstructed the growth of C. acutatum, whereas the majority of strains belonging to the genus Corallococcus did not demonstrate any counteractive effect. Such results have indicated that the strains of the genus Myxococcus have a high potential to play roles of biocontrol agents for control of pepper anthracnose. These also have revealed that the strains of the genus Myxococcus could be used as excellent microbial resources for screening novel antifungal substances.
Clumping of cells is one of the major obstacles to culture wild myxobacterial strains in liquid media. In an effort to solve this problem, we tried a method isolating spontaneous mutants that grow dispersed in liquid media from a wild myxobacterial strain. Myxococcus stipitatus KYC1001, a newly isolated strain from Gyearyongsan National Park in Korea, clumps and sticks to the surface of culture vessels as other wild myxobacteria behave in liquid media. Taking an advantage of the characteristics that dispersed mutant cells would grow dispersed while most other wild type cells would clump and stick to the surface of culture vessels, spontaneous dispersed mutants were enriched by repeated subculturing of culture supernatant. A resultant mutant, KYC2001, did not form any clumps nor stick to the surface of culture flasks, but grew completely dispersed in liquid. Meanwhile, three other spontaneous mutants, KYC2002, KYC2003, and KYC2004, shelved partially dispersed phenotype. A major portion of the cells grew dispersed in liquid but they still formed some clumps.
The viscosity of mucilage of Abelmoschus Manihot, Medic root decreased by the influence of various mechanical, physical and chemical conditions. It was experimented by viscosity decrease of mucilage connected with hydrogen ion concentration, bacterial multiplication, disinfection with 70% ethanol, some antibiotics, such as streptomycin, penicillin, ganamycin and chloramphenicol and mucilage derived from autoclaved Abelmoschus Manihot, Medic root. The results obtained were as follows: 1. It was clear that the viscosify of mucilage decreased notably under the influence of infected bacteria and bacterial multiplication. 2. By the inoculation of Bacillus subtilis ATCC 6633 and Escherichia coli ML 1410 to the mucilage the viscosify decrease fast but the viscosity of mucilage derived from autoclaved, Abelmoschus Manihot, Medic root. 3. The small quantity of reducing sugar in the mucilage was detected. 4. Hydrogan ion concentration in the mucilage remained $6.5{\sim}8.0$ in spite of the viscosity decrease.
Two bithiazole-type antibiotics were isolated from the culture broth of a Myxococcus species which isolated from the marine sediment off the coast of Cheju Island, Korea. The structures of these metabolites were determined as KR025 and melithiazole F, previously reported bithiazoles, using combined spectroscopic methods. Both compounds showed an antifungal activity. In in vivo tests, these compounds exhibited potent controlling activities against tomato late blight, wheat leaf rust, and barley powdery mildew with control values more than 80% at a concentraton of 20 $\mu\textrm{g}$/ml.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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