Hong Seong Eon;Kang Jin Oh;Baik Hyung Hwan;Yoon Kyung Sik
Radiation Oncology Journal
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v.19
no.2
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pp.107-112
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2001
Purpose : To determine the prognostic significance of p53 mutations in advanced supraglottic cancer patients. Material and Methods : Twenty-six patients with pertinent tissue materials among 60 patients diagnosed as advanced supraglottic cancer in Kyung Hee university hospital and received total or partial laryngectomy followed by radiation therapy were enrolled. Immunohistochemical staining using DO7 monoclonal antibody was peformed. Tumor specimens were analyzed for p53 mutations in exons 5 through 8 by using PCR-SSCP analysis followed by DNA sequencing of all variants. Results : p53 mutations were present in 8 cases among 26 patiets. Mutations within exon 5 were 3 cases, exon 6 were 4 cases, and exon 7 was 1 case. Mean survival time was 70.2 months in patients without mutations, 61.3 months with mutations but there was no statistically significant differences (p=0.596). Mutations were $25\%$ in stage III and $36\%$ in stage IV but there was no statistically significant differences (p=0.563). Mutations were $25\%$ in lymph node negative group and $42\%$ in lymph node positive group but there was no statistically significant differences (p=0.437). Conclusion : The presence of p53 mutation detected by PCR-SSCP is not associated with survival, stage and lymph node status.
We have reported previously that intact embryogenic cells can be used instead of protoplasts for electroporation-mediated transformation of zoysiagrass and rice. In this study, conditions of the tissue electroporation were examined to optimize the procedures. Embryogenic cell suspensions were established in liquid MS medium containing 2 mg/L of 2,4-D with embryogenic calluses induced from mature embryos of Z. japonica. The suspension-cultured cell clumps were electroporated with 35S-gusA expression vector DNA, and degrees of DNA introduction into the cells were determined by histological expression rates of the gusA marker gene. DNA transfer into the cell clumps occurred in wide range of voltage (100-400 V) and capacitance (10-1980 $\mu\textrm{F}$), but more in the ranges of 200-300 V and 330-800 $\mu\textrm{F}$ DNA concentrations higher than 6 $\mu\textrm{g}$/mL were adequate for GUS expression of the electroporated cells. DNA transfers were confirmed in all three embryogenic cell lines but only in one out of eleven non-embryogenic lines. Positive GUS expressions occurred with DNAs added even 20-40 h after pulse treatments. As a promoter of gusA, Act1 and Ubi1 were effective 7 and 5 times than 35S respectively in number of GUS expression units on electroporated cell clumps. Embryogenic cell clumps survived and regenerated into plantlets after pulse treatments of wide range of conditions.
Vitellogenins(VTGs) are the precursor of egg-yolk proteins in most oviparous species from invertebrates to vertebrates. In oviparose vertebrates, VTGs are synthesized in the liver and transported through the blood to oocytes. In female fish, concentrations of plasma VTG increase rapidly at onset of vitellogenesis in the normal reproductive cycle. Male fishes also possess the gene for VTG, but plasma concentrations of the protein typically remain small, presumably due to low levels of endogenous estrogens. However, exposure of males to exogenous estrogenic mimics can result elevated. Therefore, the VTG in fish can be used as a useful biomarker for appropriate tools of endocrine disrupting compounds effects. In this studies, we prepared the test methods that can measure the plasma VTG level in the gobies that live in polluted area with mimic estrogen. For the purpose, we purified VTG of floating goby(Chaenogobius annularis) and prepared specific monoclonal and polyclonal antisera to yolk protein, then developed a sandwich competitive ELISA system for measurement of plasma VTG levels. Validation for the ELISA system using monoclonal and polyclonal antibodies against VTG was tested. The absorbance curve of serial dilutions of serum from vitellogenic female was paralleled to the standard curve of VTG, but normal male was not paralleled. The developed sandwich ELISA system was measured for VTG levels in plasma of common goby(Acanthogobius flaviman) and javeline goby(A. hasta) as well as in plasma of floating goby(C. annularis).
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.44
no.3
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pp.338-346
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2015
This study was performed to elucidate the anti-proliferative and apoptotic mechanism of flavonoids in HT-29 human colon cancer cells. We investigated the anti-proliferative activity of flavonoids in HT-29 human colon cancer cells via cell viability assay (MTT assay), caspase-3 activity, RT-PCR, and western blotting. We cultured HT-29 cells in the presence of various flavonoids (apigenin, rutin, naringenin, and myricetin) at a concentration of $100{\mu}M$. In the MTT assay, naringenin showed the strongest effect on cell viability in HT-29 colon cancer cells. Caspase-3 activity, a marker of apoptosis, significantly increased upon naringenin treatment. For RT-PCR, myricetin significantly increased Bax protein levels, naringenin increased p53 protein levels, and rutin reduced expression of the anti-apoptotic protein Bcl-2. Western blotting of HT-29 colon cancer cells showed that myricetin increased cleaved caspase-3 protein levels, naringenin significantly increased poly (ADP-ribose) polymerase protein levels, and rutin increased E-cadherin protein levels. These results indicate that flavonoid exerts anticancer effects on human colon HT-29 cells through a caspase-dependent apoptotic pathway.
Living creatures possess long-conserved mechanisms to maintain homeostasis in response to various stresses. However, chronic and continuous exposure to stress can result in the excessive production of stress hormones, including catecholamines, which have harmful effects on health. Studies on the relationship between the sympathetic nervous system (SNS) and cancer have been conducted based on the traditional hypothesis that stress can promote cancer progression. Many preclinical and epidemiological studies have suggested that the regulation of ${\beta}$-adrenergic signaling, which mediates SNS activity, can suppress the progression of solid tumors. SNS activation has highly pleiotropic effects on tumor biology, as it stimulates oncogenes, survival pathways, the epithelial - mesenchymal transition, and invasion. Moreover, it inhibits DNA repair and programmed cell death and regulates the tumor microenvironment, including immune cells, endothelial cells, the extracellular matrix, mesenchymal cells, and adipocytes. Although targeted therapies on the molecular basis of tumor proliferation are currently receiving increased attention, they have clinical limitations, such as the compensatory activation of other signaling pathways, emergence of drug resistance, and various side effects, which raise the need for pleiotropic cancer regulation. This review summarizes the effects of the SNS on the development and progression of cancer and discusses the clinical perspectives of ${\beta}$-blockade as a novel therapeutic strategy for this disease.
Kwon Ki Soo;Park Jae Ho;Kim Dae Seop;Jeong Jin Boo;Sim Young Eun;Kim Mi Suk;Lee Hee Kyung;Chung Gyu Young;Jeong Hyung Jin
Journal of Life Science
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v.15
no.4
s.71
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pp.528-535
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2005
The non-enzymatic anti-oxidants and lunasin peptide from the extracts of the pepper were examined in order to utilize the discovery in natural products as cancer chemopreventive agents. The DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl) free radical scavenging activity on the fruit parts of the pepper was higher than that of the seed, but the difference was low. The Inhibition activity of xanthine/ xanthine oxidase in extracts of the seed was higher than that of the fruit and that of the seed on 20 days after flowering was the highest at the growing period. These were identified as fatty acids and phenolic compounds such as 1-eicosanol, palmitic acid, linoleic acid, linolenic acid and benzonitrile. The contents of fatty acids and phenolic compounds increased according to the time passing at the growing period. Peroxidase (POD) activity of the fruit at middle stage was high than that of other growing stages and that of the seed was the highest at later growing period. Though superoxide dismutase (SOD) activities in fruit were hish by passage of Slowing stage, the activity in seed was low. Lunasin was searched from seeds of the peppers by coomassie blue staining and western blot among them and we just found lunasin peptide from extracted protein of the pepper by western blot. In addition, we observed the contents of lunasin after flowering and confirmed to appear the lunasin at 35 days after flowering. We confirmed that lunasin is complex protein of maturing seeds. 100nM lunasin peptide in pepper showed inhibition effect on colony formation in $2\~12$ cells.
To develop simple and efficient transformation methods of monocotyledonous plane, electroporation-mediated delivery of DNA into intact embryogenic cell clumps was investigated in zoysiagrass and rice. Calli of zoysiagrass, induced from 3-week-old immature embryos, were suspension-cultured in MS basic medium supplemented with 1.0 mg/t 2.4-D and used for elechuporation. Calli, derived from immature inflorescences of 20 mm lenth of rice, were also suspension-cultured on N6 basic medium supplemented with 1.0 mg/L 2.4-D. Suspension-cultured embryogenic cell clumps were electroporated in liqid MS medium added with a Plasmid DNA (30 $\mu\textrm{m}$/ml), pGA1074, encoding ${\beta}$-glucuronidiase (GUS). DNA delivery into the cells through cell walls and cell membrane was confirmed by the transient expression of the GUS gene. Cell clumps of zoysiagrass and rice, electroporated with 400 volt at 800 pF capacitance, expressed GUS gene activity at a mean frequency of 25 units (one unit = one clony of blue cells) per 200 ${\mu}\ell$ of packed cell volume. Untreated cells and healed non-embryogenic cells did not exhibit GUS activity These results indicate that electroporation-mediated transformation can use intact embryogenic cells (thus avoiding the use protoplasts) in zoysiagrass and rice.
The 1,874 rice lines were selected from 3,000 Ds insertional mutant pool by Basta herbicide treatment and were surveyed for trait variation and molecular characteristics of genes knocked out by Ds insertion. Compared with "Donjin", an original japonica cultivar used for transformation, Ds insertion mutant pool showed large variation in major agronomic traits including tiller, panicle, and heading etc. Southern blot analysis demonstrated that these lines on the average had two Ds copies in Donjin genome, resulting in 38.4% of one copy, 32.5% of two copies, 16.7% of three copies, and 11.3% of over four copies. GUS analysis showed that 3.9% of lines (73/1,860) had tissue-specific expression in leaves, nodal parts, floral organs such as stigma and pollen, and roots. Data set obtained from agricultural trait variation and molecular characteristics for individual Ds insertional lines would provide researchers with more information for understanding the function of unknown rice genes controlling economically important traits.
The mitochondria is the major cellular organelle of energy metabolism for the supply of cellular energy; it also plays an important role in controlling calcium regulation, reactive oxygen species (ROS) production, and apoptosis. Mitochondrial dysfunction causes various diseases, such as neurodegenerative diseases, Lou Gehrig's disease, cardiovascular disease, mental disorders, diabetes, and cancer. Most of the diseases are age-related diseases. In this review, we focus on the roles of mitochondrial dysfunction in cancer. Mitochondrial dysfunction induces carcinogenesis and is found in many cancers. The factors that cause mitochondrial dysfunction differ depending on the types of carcinoma, and those factors could cause cancer malignancy, such as resistance to therapy and metastasis. Mitochondrial dysfunction is caused by a lack of mitochondria, an inability to provide key substances, or a dysfunction in the ATP synthesis machinery. The main factor associated with cancer malignancy is mtDNA depletion. Mitochondrial dysfunction would leads to malignancy through changes in molecular activity or expression, but it is not known in detail which changes lead to cancer malignancy. In order to explore the relationship between mitochondrial dysfunction and cancer malignancy in detail, mitochondria dysfunctional cell lines are constructed using chemical methods such as EtBr treatment or gene editing methods, including shRNA and CRISPR/Cas9. Those mitochondria dysfunctional cell lines are used in the study of various diseases caused by mitochondrial dysfunction, including cancer.
Park, Seo-Young;Baek, Yeong-Bin;Park, Sang-Ik;Lee, Chang-Min;Kim, Sung-Hak
Journal of Life Science
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v.31
no.2
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pp.248-255
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2021
Mammary gland tumors are one of the most common cancers in female dogs, and there are various types of cells depending on the tumor type. Complex carcinoma consists of a combination of luminal epithelial and myoepithelial cells with intra-tumoral heterogeneity. However, the origins of these tumor cells and their effects on the malignancies of tumors have not been identified. Recently, it has been reported that cancer stem cells, identified in several types of human tumors, are involved in tumor heterogeneity and may also contribute to malignancies such as tumor recurrence and metastasis. Interestingly, cancer stem cells share several abilities of self-renewal and cell differentiation into multiple types of cancer cells, but they have abnormal genetic mutation and signal transduction pathways to regulate the maintenance of stem cell characters. Moreover, it is known that these cell populations contribute to cell metastasis as well as cell resistance against chemo- and radio-therapeutics that promote tumor recurrence. The existence of cancer stem cells might explain the intra-tumoral heterogeneity and cancer aggressiveness during tumorigenesis in canine mammary gland tumors. This review summarizes the characteristics and types of canine mammary gland tumors, the definition of tumor stem cells, methods of isolation, and clinical significance.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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