Suspension cultures of Camptotheca acuminata, which is known to produce the anticancer indole alkaloid camptothecin and its derivatives, were made to increase camptothecin production. The capability of camptothecin production in suspended cells is decreased by repeated subculturein. Aggregated cells produced more camptothecin than single cells. Optimal cell aggregation was achieved in hybrid medium supplemented with 4% sucrose. Aggregated cells in hybrid medium with 4% sucrose produced $18.04{\times}10^{-4} mg/L$ of camptothecin. The control of shaking speeds was effective at inducing cell aggregation and camptothecin production. A shaking speed of 100 rpm was found optimum to increase the cell aggregation with a camptothecin production of $19.4{\times}10^{-4} mg/L$.
The productivity of alkaloid in the airlift fermentor operation was less than that of suspension coltures of Eschscholtzia californica cells in the shake flask. To overcome the productivity reduction, a gas recycle airlift fermentor was developed because the gas-stripping in normal airlift fermentor was believed to play a significant role for productivity reduction. The alkaloid content in the gas recycle system with Eschscholtzia californica suspension cells was 2.7 times higher than that of normal airlift fermentor. The productivity of alkaloids and $CO_2$ concentration were affected by the volume of gas reservoir in the gas recycle airlift fermentor.
In order to investigate the effects of elicitors on the growth and ginsenosides biosynthesis of ginseng adventitious roots, chitosan and jasmonic acid were treated with various concentrations. The growth rate of adventitious roots was increased with the addition of chitosan at higher concentrations (10 mg/L), but the best accumulation of ginsenosides was observed at the lower concentration (5 mg/L). Jasmonic acid was an effective elicitor for ginsenosides biosynthesis in ginseng adventitious roots. The maximum accumulation of ginsenosides was observed at the treatment of 10 uM jasmonic acid. But the jasmonic acid was found to decrease the growth rate of adventitious roots.
In order to find a potent anti-methicillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA) antibiotic, actinomycetes isolated from the samples collected in Korean marine silt were screened. From the culture broth of the isolated Streptamyces strain AM045, a substance showing excellent biological activity against MRSA was found, isolated and named AM3. The compound showed strong activities against MRSA, S. epidermidis, E. faecium and E. faecalis, which were better than those of vancomycin and teicoplanin. Unfortunately, AM3 was identified as Actinomycin V. However, this paper reports the three dimensional study of AM3 based on high resolution nmr and Computer Aided Molecular Modeling(CAMM), and the fact that the structure of the pentapeptide lactone ring with oxo-proline in chloroform solution does not have 'C conformation' any more.
Kim, Hye Ji;Koo, Man Hyung;Lee, Jun Hyuck;Suh, Sung-Suk;Youn, Ui Joung
Korean Journal of Pharmacognosy
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v.50
no.3
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pp.232-238
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2019
Phytochemical study of Ganoderma lucidum (Polyporaceae) let to the isolation of five lanostane triterpenoid (1-5), along with two nitrogen derived phenolic compounds, N-phenylethylformamide (6) and N-acetylphenethylamine (7). The structures of the compounds were determined by 1D and 2D NMR, and MS experiments, as well as by comparison of their data with published values. Compounds 6 and 7 were isolated for the first time from the genus Ganoderma and this species. All the compounds were evaluated for cancer chemopreventive potential based on their ability to inhibit nitric oxide (NO) production induced by lipopolysaccharide (LPS) in mouse macrophage RAW 264.7 cells in vitro. Among the isolates, compounds 2 and 3 showed moderate inhibitory activity against NO production.
BACKGROUND: Polychlorinated biphenyls (PCBs) are one of the most common environmental contaminants. Because of their recalcitrant properties and long-term toxicity, numerous studies have been performed. The toxicological concerns are focused on endocrinological effects of animal. Several different metabolites have been reported, including hydroxy PCBs, PCB quinones, and methylsulfonyl PCBs from animal tissues. However, details in plants have never been studied. It is well-known that plants can produce phytoalexin in response to chemical, physical, or pathological stress.METHODS AND RESULTS: In this study, the several PCBs and hydroxy derivatives were prepared by chemical syntheses. Their effects on secondary metabolite biosynthesis were determined in carrot roots. The levels of 6-methoxymellein were determined in several different treatments, using gas chromatography-mass spectrometry. In general, the concentration of 6-methoxymellein reached a maximum at 2 days and gradually decreased to trace level at 5 days in control experiments. However, the effects of PCBs or hydroxy derivatives were highly dependent on compounds. For example, the maximum concentrations of 6-methoxymellein were observed at 3 days for 2-hydroxy/4-hydroxybiphenyl, while 3,3',4,4',5-pentachlorobiphenyl and 3,5-dichloro-2-hydroxybiphenyl showed a rapid accumulation within 1 day, followed by rapid dissipation to undetectable levels.CONCLUSION: Biphenyl derivatives were effective elicitor of 6-methoxymellein accumulation. In general, hydroxybiphenyls (phenols) more efficiently induced phytoalexin biosynthesis than those without hydroxy groups. It can be concluded that PCBs or their possible metabolites could change the plant secondary metabolism.
Lim, Sun-Hyung;Park, Sang Kyu;Ha, Sun-Hwa;Choi, Min Ji;Kim, Da-Hye;Lee, Jong-Yeol;Kim, Young-Mi
Journal of Plant Biotechnology
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v.42
no.3
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pp.135-153
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2015
The aromatic amino acids, which are composed of $\small{L}$-phenylalanine, $\small{L}$-tyrosine and $\small{L}$-tryptophan, are general components of protein synthesis as well as precursors for a wide range of secondary metabolites. These aromatic amino acids-derived compounds play important roles as ingredients of diverse phenolics including pigments and cell walls, and hormones like auxin and salicylic acid in plants. Moreover, they also serve as the natural products of alkaloids and glucosinolates, which have a high potential to promote human health and nutrition. The biosynthetic pathways of aromatic amino acids share a chorismate, the common intermediate, which is originated from shikimate pathway. Then, tryptophan is synthesized via anthranilate and the other phenylalanine and tyrosine are synthesized via prephenate, as intermediates. This review reports recent studies about all the enzymatic steps involved in aromatic amino acid biosynthetic pathways and their gene regulation on transcriptional/post-transcriptional levels. Furthermore, results of metabolic engineering are introduced as efforts to improve the production of the aromatic amino acids-derived secondary metabolites in plants.
Plant secondary metabolites play an important role in insect-plant interactions. Herbivorous insects have various strategies to cope with the plant defensive compounds. Polyphagous insects feed on a wide variety of plant species, and their detoxification mechanisms are more complex since they tend to respond to a large array of different plant-derived chemicals. Alternatively, oligophagous insects specialize on only a few related plant species and may be expected to have a more efficient form of adaptation. This adaptation could involve either the production of large quantities of enzymes to detoxify their defensive compounds or the sequestration of the compounds or their metabolites. The oriental tobacco budworm, Helicoverpa assulta, is a specialist herbivore, feeding on a few plants of Solanaceae, such as tobacco and hot pepper. Understanding its host-plant adaptation not provides an important insight on physiology, ecology and evolution of specialist herbivores, but also gives a clue to develop management strategies of the pest species such as H. assulta. This paper briefly reviews the specialist, H. assulta, focusing on its host range, larval associations with the host plants, and detoxification mechanisms to nicotine and capsaicin, two characteristic defensive compounds derived from its two major host plants, tobacco and hot pepper, respectively. It summarizes the relevant research over the last half century and provides a future perspective on this subject.
Purpose : To investigate the signal enhancement ratio by NOE effect on in vivo $^{31}P$ MRS in human heart muscle and liver. we also evaluated the enhancement ratios of different phosphorus metabolites, which are important in 31P MRS for each organ. Materials and Methods : Ten normal subjects (M:F = 8:2, age range = 24-32 yrs) were included for in vivo $^{31}P$ MRS measurements on a 1.5 T whole-body MRI/MRS system using $^1H-^{31}P$ dual tuned surface coil. Two-dimensional Chemical Shift Imaging (2D CSI) pulse sequence for $^{31}P$ MRS was employed in all $^{31}P$ MRS measurements. First, $^{31}P$ MRS performed without NOE effect and then the same 2D CSI data acquisitions were repeated with NOE effect. After postprocessing the MRS raw data in the time domain, the signal enhancements in percent were estimated from the major metabolites. Results : The calculated NOE enhancement for liver $^{31}P$ MRS were $\alpha-ATP\;(7\%),\;\beta-ATP\;(9\%),\;\gamma-ATP\;(17\%),\;Pi\;(1\%),\;PDE\;(19\%)$ and $PME\;(31\%)$. Because there is no creatine kinase activity in liver, PCr signal is absent. For cardiac $^{31}P$ MRS, whole body coil gave better scout images and thus better localization than surface coil. In $^{31}P$cardiac multi-voxel spectra, DPG signal increased from left to right according to the amount of blood included. The calculated enhancement for cardiac $^{31}P$ MRS were : $\alpha-ATP\;(12\%),\;\beta-ATP\;(19\%),\;\gamma-ATP\;(30\%),\;PCr\;(34\%),\;Pi\;(20\%),\;(PDE)\;(51\%),\;and\;DPG\;(72\%)$. Conclusion : Our results revealed that the NOE effect was more pronounced in heart muscle than in liver with different coupling to 1H spin system and thus different heteronuclear cross-relaxation.
Secondary metabolism in actinomycetes has been known to be controlled by a small molecule, ${\gamma}$-butyrolactone autoregulator, the binding of which to each corresponding receptor leads to the regulation of the transcriptional expression of the secondary metabolites. We expected that expression of an autoregulator receptor or a pleiotropic regulator in a non-host was to be gained insight of effective production of new metabolic materials. In order to study the function of the receptor protein (seaR), which is isolated from Saccharopolyspora erythraea, we introduced the seaR gene to Streptomyces coelicolor A3(2) as host strains. An effective transformation procedure for S. coelicolor A3(2) was established based on transconjugation by Escherichia coli ET12567/pUZ8002 with a ${\varphi}C31$-derived integration vector, pSET152, which contained int, oriT, attP and $ermEp^*$ (erythromycin promotor). Therefore, the pEV615 was introduced into S. coelicolor A3(2) by conjugation and integrated at the attB locus in the chromosome of the recipients by the ${\varphi}C31$ integrase (int) function. Exconjugant of S. coelicolor A3(2) containing the seaR gene was confirmed by PCR and transcriptional expression of the seaR gene in the transformant was analyzed by RT-PCR. In case of S. coelicolor A3(2), a phenotype microarray was used to analyze the phenotype of transformant compared with wild type by seaR expression. After that, in order to confirm the accuracy of the results obtained from the phenotype microarray, an antimicrobial susceptibility test was carried out. This test indicated that sensitivity of the transformant was higher than wild type in tetracycline case. These results indicated that some biosynthesis genes or resistance genes for tetracycline biosynthesis in transformant might be repressed by seaR expression. Therefore, subsequent experiments, analysis of transcriptional pattern of genes for tetracycline production or resistance, are needed to confirm whether biosynthesis genes or resistance genes for tetracycline are repressed or not.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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