Background: There are no ideal substitutes for tracheal replacement. Therefore we investigated the possibility of clinical use of cryopreserved tracheal homograft with special interest in the viability and rejection of the epithelial cell and cartilage. Material and Method: Rabbit's trachea was sected and stored in liquid nitrogen tank for 1 month. Tracheal replacement was done in 45 rabbits with autograft(n=15, Group 1), fresh allograft(n=15, Group 2) and cryopreserved homograft(n=15, Group 3). After 7, 14, and 30 days, 5 rabbits in each group were sacrificed and the regeneration of epithelium and cartilage and the degree of rejection were assessed by counting the monocellular infiltration. Result: Investigation at day 7, showed no difference in epithelial regeneration, however, at days 14 and 30, Group 1 showed better regeneration of epithelium than groups 2 and 3. There was no difference of epithelial regeneration between group 2 and 3. There was little rejection at day 7, but at days 14 and 30, there was significant rejection in group 2 and group 3.(P<0.05). Group 3 showed lesser rejection than group 2 at days 14 and 30, but it was not statistically significant. Cartilage showed no rejection and maintained its viability in groups 2 and 3. Conclusion: Cryopreserved tracheal homograft can maintain its viability, therefore it may represent a possibility of clinical application for tracheal replacement. However, cryopreservation can not eliminate the antigenicity of the trachea completely. Furthere studies for lowering the antigenicity and rejection should be performed for an ideal substitute for tracheal replacement.
Human mesenchymal stem cells (hMSCs) in bone marrow (BM) can be induced to differentiate into a variety of mesenchymal tissues, including adipocytes, osteoblasts and chondroblasts, under the influence of certain growth or environmental factors. In this study, we analyzed the differentiation process and the associated gene expression profiles inherent to the process by which hMSCs differentiate into osteoblasts. We conducted a comparison of gene expression profiles of the normal human BM MSCs, using human 8K cDNA microarray, incubated in media containing either a combination of $\beta$-glycerol phosphate, L-ascorbic acid, and dexamethasone, or in medium lacking these osteogenic supplements. During the osteoblastic differentiation process, 36 genes were determined to be up-regulated, and 59 genes were shown to be down-regulated. Osteoprotegerin, LRP5, and metallothionein 2A, all of which are associated with the osteogenetic process, were up-regulated, and genes associated with the differentiation of MSCs into other lineages, including muscle, adipose tissue and vascular structure were down-regulated. The set of differentially expressed genes reported in this work should contribute to our current understanding of the processes inherent to the differentiation of MSCs into osteoblasts.
Tissue engineering has been enhanced by advance in biomaterial nature, surface structure and design. In this paper, I report specifically vertically aligned titania ($TiO_2$) nanotube surface structuring for optimization of titanium implants utilizing nanotechnology. The formation, mechanism, characteristics of titania nanotubes are explained and emerging critical role in tissue engineering and regenerative medicine is reviewed. The main focus of this paper is on the unique 3 dimensional tubular shaped nanostructure of titania and its effects on creating epochal impacts on cell behavior. Particularly, I discuss how different cells cultured on titania nanotube are adhered, proliferated, differentiated and showed phenotypic functionality compared to those cultured on flat titanium. As a matter of fact, the presence of titania nanotube surface structuring on titanium for dental applications had an important effect improving the proliferation and mineralization of osteoblasts in vitro, and enhancing the bone bonding strength with rabbit tibia over conventional titanium implants in vivo. The nano-features of titania nanotubular structure are expected to be advantageous in regulating many positive cell and tissue responses for various tissue engineering and regenerative medicine applications.
배경: 기관의 동종이식편은 초냉동보관으로 생육성을 유지할 수 있으며 항원성이 줄어든다고 알려졌으나 냉동보관 온도 및 기간에 따른 항원성의 변화는 아직까지 명확히 밝혀져 있지 않다. 따라서 이번 연구에서는 냉동보관 온도의 차이 및 기간이 쥐 기관 동종이식편의 거부반응에 미치는 영향을 연구하였다. 대상 및 방법: 24개의 쥐 기관을 적출하여 12개씩 -8$0^{\circ}C$ 냉동고 및 -196$^{\circ}C$ 질소탱크에 각각 1, 3, 6개월씩 보관하였다. 냉동보관한 기관을 반으로 나누어 48마리의 쥐복강에 대망으로 감싼 다음 이식하였다. 1, 3, 5군은 -8$0^{\circ}C$ 냉동고에 각각 1, 3, 6개월씩 보관한 기관 동종이식편을 이식하였고 2, 4, 6군은 -196$^{\circ}C$ 질소탱크에 각각 1, 3, 6개월씩 보관한 기관 동종이식편을 이식하였다. 7군은 대조군으로 냉동보관하지 않은 동종이식편을 이식하였다. 이식후 14일째 이식된 동종이식편을 적출하여 간질조직의 단세포 침윤정도 및 내강 폐쇄 정도를 관찰하여 거부반응을 정도를 측정하였다. 결과: 7개 군 모두에서 중등도 이상의 심한 단세포 침윤을 보였으며 각군간의 통계학적인 차이를 보이지 않았다. 1, 2, 3, 4, 5, 6군에서 7군에서 보다 내강 폐쇄 정도가 적었으나 통계학적인 의의는 없었다. 모든 군에서 연골주위 단세포 침윤이 심한 경우에도 연골세포는 비교적 생육성을 잘 유지하고 있었다. 결론: 냉동보관 온도 및 보관 기간의 차이에 따른 동종이식편의 거부반응의 차이는 없었으며 모든 군에서 심한 거부반응을 보였다. 따라서 냉동 보관 쥐 동종이식편을 이용한 실험에서는 적절한 면역억제제의 사용이 필수적이라고 생각된다.
Eight cases of chonproblastoma were studied by analyzing the clinical and pathologic findings. The age of eight cases ranged from 17 to 38 years old(median age, 22.7 years old). The tumors developed in the femur(3 cases), patella(2 cases), tibia(1 case), fibula(l case), and ulna(1 case). The mean diameter of tumors was 4.0cm (range, 1.5 to 8.0cm). Grossly, tumors showed grayish brown solid area with foci of secondary aneurysmal bone cyst. Histologically, the tumor cells were round or polygonal in shape with nuclear groove. And there were chondroid differentiation(7 cases), mitosis(3 cases), calcific deposits(3 cases), secondary aneurysmal bone cyst(4 cases), hemosiderin deposits(4 cases), necrosis(3 cases), vascular invasion(1 caes), and foamy histiocytes and cholesterol cleft(l cases). All cases showed no metastasis to lymph node and distant organ. Seven cases (87.5%) were immunoreactive for S-100 protein. None was immunoreactive for cytokeratin.
Kim, Mi-Kyeong;Park, Hyoung-Joon;Rho, Gyu-Jin;Kim, Chung-Hei;Cho, Jae-Hyeon
Development and Reproduction
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v.15
no.4
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pp.281-289
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2011
The objective of this study was to investigate the effective cryoprotectants for the cryopreservation of porcine mesenechymal stem cells (pMSCs). In order to understand the effectiveness of various cryoprotectants on pMSCs, we studied the most commonly used cryoprotectants; dimethyl sulfoxide (DMSO), ethylene glycol (EG), DMSO and EG. pMSCs were isolated from bone marrow matrix of piglet (2 month) and characterized by alkaline phopshatase (AP) activity, colony forming, and differentiation to adipocyte. In slow cooling cryopreservation, the pMSCs were exposed to cell medium containing Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) supplemented with 10% DMSO, 1.5M EG and 5% DMSO/0.75M EG, respectively, and freezed to $-1^{\circ}C$/min from $25^{\circ}C$ up to $-80^{\circ}C$ in a cryo-container. The proportion of viable cells and the growing rates in fresh pMSCs were significantly (P<0.05) higher than those of other groups, but did not differ between the cryopreserved groups. The expression of Sox-2 and Nanog gene was increased by extending culture time in cryopreserved groups. The expression of Bax gene in cryopreserved groups was similar with fresh pMSCs. Moreover, the gene expression of adipocyte-specific marker as well as chondrogenic/osteogenic factors in cryopreserved groups was similarly to fresh pMSCs. Taken together, our results suggested that all these cryoprotectants of 10% DMSO, 1.5M EG and 5% DMSO/0.75M EG could be used for cryopreservation of the pMSCs.
The Journal of the Korean bone and joint tumor society
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v.11
no.1
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pp.88-93
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2005
Malignant transformation of a solitary osteochondroma is rare, and usually takes form of a chondrosarcoma. We present a case of low grade osteosarcoma arising in a solitary osteochondroma of the right femur in a 30-year-old woman. As the lesion was initially continuous with corresponding components of the parent bone, so the possibilities of other diagnoses were excluded. After the initial excision, there were 3 times of recurrences during the follow up period of 3 years. The histologic subtypes of the recurred osteosarcomas were different each other, which were high grade chondroblastic, osteoblastic and fibroblastic respectively.
Sim, Boo Yong;Bak, Ji Won;Lee, Hae Jin;Jun, Ji Ae;Choi, Hak Joo;Kwon, Chang Ju;Kim, Hwa Young;Ruff, Kevin J.;Brandt, Karsten;Kim, Dong Hee
Journal of Nutrition and Health
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v.48
no.4
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pp.310-318
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2015
Purpose: The aim of this study is to investigate anti-arthritis activity using natural eggshell membrane (NEM). Methods: NEM was administered at 52 mg/kg, 200 mg/kg, and 400 mg/kg to SD-Rat, where arthritis was induced by monosodium iodoacetate (MIA) at 3 mg. NO production in serum was measured using Griess reagent. Cytokines including IL-$1{\beta}$, and IL-6 were measured by Luminex and $PGE_2$, MMP-2, MMP-9, TIMP-1, $LTB_4$, and hs-CRP were measured by ELISA. The cartilage of patella volume was examined and 3-D high-resolution reconstructions of the cartilage of patella were obtained using a Micro-CT system. Results: Production of NO, IL-$1{\beta}$, IL-6, $PGE_2$, MMP-2, MMP-9, TIMP-1, $LTB_4$, and hs-CRP in serum was decreased, respectively, in comparison with control. The cartilage of patella volume increased significantly. In addition, the NEM group showed a decrease in the cartilage of patella, synovial membrane, and transformation of fibrous tissue. Conclusion: The results for NEM showed significant anti-arthritis activity. These results may be developed as a raw material for new health food to ease the symptoms mentioned above.
The periosteum contains multipotent cells that can differentiate into osteoblasts and chondrocytes. Cultured periosteum-derived cells (PDCs) have an osteogenic capacity. The purpose of this study was to evaluate the interaction of PDCs with bone graft biomaterial. After cell isolation from the calvarial periosteum of Sprague-Dawley rats, cultured PDCs were placed in critical-sized calvarial defects with beta-tricalcium phosphate (${\beta}$-TCP). All rats were sacrificed 8 weeks after bone graft surgery, and the bone regenerative ability of bone grafting sides was evaluated by plain radiography, micro-computed tomography (CT), and histological examination. PDCs grafted with ${\beta}$-TCP displayed enhanced calcification in the defect site, density of regenerated bone and new bone formation within the defect and its boundaries. Furthermore, these PDCs more efficiently regenerated new bone as compared to grafted ${\beta}$-TCP only. The results suggest that cultured PDCs have the potential to promote osteogenesis in bone defects.
Kim, Baik-Yoon;Joo, Ki-Jung;Nam, Kwang-Il;Yoon, Jae-Rhyong
Applied Microscopy
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v.30
no.2
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pp.213-232
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2000
The development of the knee joint was studied by electron microscopy in human fetuses ranging from 20 mm to 260 mm crown-rump length ($7\sim30$ weeks of gestational age). The appearance of the primordium of the meniscus and cruciate ligament was conspicuous as the mesenchymal cells , preceeding that of joint space at 30 mm fetus. The primitive joint cavity was first seen in the interzone from the 40 mm fetus and its intermediate layer proceeded developing as a narrow cleft which was closely incorporated with two chondrogenic layers. Poorly differentiated mesenchymal cells of the meniscus at 40 mm fetus containing predominantly free ribosomes differentiated into fibroblasts at 60 mm fetus. By 100 mm fetus, the fibroblast in inner zone of the meniscus presented as oval profiles with a short cell processes, whereas middle and peripheral zones presented as elongated cells. Differentiation of the synovial membrane coincided with clarification of the joint cavity When dilatation of the synovial cavity occurred, the two types of synovial cells were identified at 60 mm fetus. By 100 mm fetus a majority of the intimal cells were B-type. B-type cells were clearly distinguishable from A-type cells by their content of extensive rough endoplasmic reticula and well developed Golgi complexes. In contrast, A-type cells had numerous filopodia, pinocytotic vesicles, lysosomes and large vacuoles. At 260 mm fetus the B-type cells were also a majority of intimal cells. At 260 mm fetus the inner zone of the meniscus was filled with parallel oriented fascicles of collagenous fibers and oval fibroblasts. The middle zone was constituted of parallel and radially arranged fibers and fibroblasts. The outer zone was populated by elongated fibroblasts encircled by crossed collagenous fibers with the blood vessels. At 30 mm fetus the fibroblasts of the cruciate ligament contained rough endoplasmic reticula and mitochondria. Collagen fibrils were noted within narrow cytoplasmic processes which were continued with the extracellular space. Collagen fibrils of ligament were filled in the bulk of extracellular space at 100 mm fetus. By $150\sim260mm$ fetus, the cruciate ligaments were constituted of longitudinally oriented bundle of collagen fibrils with irregular rows of round cells between.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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