Recent research has shown that curcumin has beneficial effects in a variety of skin diseases, including scleroderma, psoriasis, and skin cancer. In this study, we assessed the effects of curcumin on epidermal permeability barrier function in vivo and in vitro. In order to evaluate the effects of curcumin on epidermal permeability barrier function in vivo, hairless rats were exposed to UVB irradiation, and curcumin was administered orally at a dosage of 150 mg/kg per day for 8 weeks. Transepidermal water loss (TEWL) and epidermal thickness were measured at the end of the experiment. The expression of filaggrin, a marker of keratinocyte differentiation, and serine palmitoyltransferase (SPT), a marker of the formation of the stratum corneum lipid barrier, in human HaCat keratinocytes were analyzed. The in vivo results showed that an 8 week administration of curcumin markedly prevented the UVB-induced increase in TEWL. The UV-induced increase in epidermal thickness was also reduced significantly by curcumin treatment. The in vitro results demonstrated the concentration-dependent effects of curcumin on the expression of both filaggrin and SPT in HaCat cells, reflecting the notion that curcumin can induce epidermal keratinocyte differentiation and can improve the recovery of skin barrier functions. These results show that curcumin is a promising candidate for the improvement of epidermal permeability barrier function.
Jeong, Jin-Woo;Baek, Jun Young;Kim, Kwang Dong;Choi, Yung Hyun;Lee, Jae-Dong
Journal of Life Science
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v.25
no.1
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pp.93-100
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2015
Pachymic acid (PA) is a lanostane-type triterpenoid derived from the Poria cocos mushroom. Several beneficial biological features of PA provide medicine with a wide variety of valuable effects, such as anticancer and anti-inflammatory activity; it also has antioxidant effects against oxidative stress. Nonetheless, the biological properties and mechanisms that produce this anti-cancer action of PA remain largely undetermined. In this study, we investigated the pro-apoptotic effects of PA in T24 human bladder cancer cells. It was found that PA could inhibit the cell growth of T24 cells in a dose-dependent manner, which was associated with the induction of apoptotic cell death, as evidenced by the formation of apoptotic bodies and chromatin condensation and accumulation of cells in the sub-G1 phase. The induction of apoptotic cell death by PA was connected with an up-regulation of pro-apoptotic Bax and Bad protein expression and down-regulation of anti-apoptotic Bcl-2 and Bcl-xL proteins, and inhibition of apoptosis family proteins. In addition, apoptosis-inducing concentrations of PA induced the activation of caspase-9, an initiator caspase of the mitochondrial-mediated intrinsic pathway, and caspase-3, accompanied by proteolytic degradation of poly (ADP-ribose)-polymerase. PA also induced apoptosis via a death receptor-mediated extrinsic pathway by caspase-8 activation, resulting in the truncation of Bid and suggesting the existence of cross-talk between the extrinsic and intrinsic pathways. Taken together, the present results suggest that PA may be a potential chemotherapeutic agent for the control of human bladder cancer cells.
As the elderly population increases, it is becoming important to prevent and treat muscle loss caused by aging or disease. Steroidal androgen in the protein assimilation steroid (AAS) system is mainly used to induce muscle improvement, but it is well known that long-term or excessive doses of AAS result in various side effects, although they are prescribed for various muscle and weight loss treatments. Research is therefore underway to explore natural substances that promote muscle renewal with relatively few side effects. However, despite many studies on the improvement of skeletal muscle and the reduction of muscle disease using natural products, there is still a lack of significant clinical results and mechanism studies. The promotion of muscle regeneration through treatment with natural substances typically involves three mechanisms: positive control of the muscle modulating factor (MRF), activation of the protein synthesis mechanism, and inhibition of the protein breakdown mechanism. A study of plant extracts that are known to have muscle neoplasmic stimulation effects, such as black ginseng, plum, and nutmeg, as well as single substances derived from natural products, such as creatine, catechin, and several fatty acids, is therefore described. We also summarize the mechanisms that have been identified so far through which each of these extracts or single materials facilitates muscle regeneration and the signaling pathways that they mediate.
Rhodiola spp. and red ginseng have been used for food and medicinal applications in disease chemoprevention in many Asian countries. Increased oxidative stress by reactive oxygen species (ROS) has been proposed to be a major cause of muscle fatigue. The present study was designed to investigate the protective effects of a fermented hot-water extract mixture from Rhodiola sachalinensis and red ginseng (MFR) on cell damage and the antioxidant enzyme system in $H_2O_2$-induced oxidative stress in skeletal muscle cells. C2C12 myoblasts were treated with various concentrations of NFR (non-fermented Rhodiola sachalinensis extract), FR (fermented hot-water extract from Rhodiola sachalinensis) and MFR for up to 5 days after the standard induction of differentiation, followed by semi-quantitative RT-PCR. MFR treatment dose-dependently protected oxidative damage of C2C12 cells. The treatment with MFR also enhanced mRNA expressions of MyoD, Cu/Zn SOD, Mn-SOD and GPX up to 16%. These results indicate that MFR exerts an anti-oxidative effect through a mechanism (s) that may involve the up-regulation of antioxidant enzymes, which may be important for the cellular redox environment in muscle cells.
Biochemical consequence of the accumulation in cells of superoxide $(O^{-}_{2})$ which was proposed to be probably a common chemical factor in the secondary process of the mechanism of chilling injury as well as in the visible light photodamage in cells of higher plants, has been investigated in the present work. Especially focused was the destructive effect of $O^{-}_{2}$ on the biochemical activity of mitochondria, as informations which support the suggestion that mitochondrial inner membrane is the major site of $O^{-}_{2}$ production have been collected. Mitochondria and submitochondrial particles (SMP) were prepared from soybean hypocotyls for this case study. When SMP were treated with the electrolytically produced $O^{-}_{2}$ they suffered not only inhibition of the membrane-bound enzymes as demonstrated by cytochrome c oxidase, but also lipid peroxidation of membrane as proved by malondialdehyde production. Malate dehydrogenase present in the protein extract from mitochondrial matrix was also inhibited by the $O^{-}_{2}$ treatment. These results exhibited the chaotic effect of the overproduction and accumulation of $O^{-}_{2}$ in cells under a certain abnormal circumstance such as environmental stress on the physiological function of mitochondrial; disruption of the cellular metabolic pathways and the structural integrity of membrane.
In vitro culture of Toxoplasma gondii in HL-60 cells and cell-mediates immunity against Toxoplasma in dimethylsulfoxide(DMSO) -induced HL-60 cells, i.e., differentiation into granulocytes, were pursued. HL-60 calls were treated with various concentrations of DMSO, and 1.3%(v/v) for 3 day incubation was chosen as the optimal condition icy differentiation into granulocytes. The degree of differentiation was assayed in physiological and functional aspects in addition to morphological point. When treated with 1.3% DMSO for 3 days, HL-60 cells did not synthesiar DNA materials beyond background level, and showed active chemotactic response to chemotactic peptide, formal-methionyl-leucyl-phenylalanine(FMLP). Morphologically promyelocytes of high nuclearlcytoplasmic(NIC) ratio changed to granulocytes of relatively low WJC ratio. The relationships between HL-60 cells or DMSO-induced HL-60 cells and Toxoplasma were examined after stain with Giemsa and Buorescent dye (acridine orange). HL-60 cells did not show any sign of torso- plasmacidal activity but showed intracellular proliferation of Texoplasma to form rosette for 72 hr co-culture. In contrast, OMSO-induced HL-60 cells phagocytosed Toxoplasma within 1 hr, and performed a process of intracellular digestion of Toxoplasma thereafter. With the above results, it is suggested that phagosome-Iysosome fusion is one of the critical events for the parasitism by Toxoplasma or for susceptibility of host cells. The in vitro culture system of this study has offered a defined condition to study the protozoan parasite-host cell interactions.
For the development of basic genetic materials for specific and effective therapeutic approach to suppress multiplication of hepatitis C virus (HCV), HCV internal ribosome entry site (IRES)-targeting hammerhead ribozyme which activity is allosterically regulated by HCV regulatory protein, NS5B RNA replicase, was developed. The ribozyme targeted most effectively to +382 nucleotide (nt) site of HCV IRES RNA. The allosteric ribozyme was designed to be composed of sequence of RNA aptamer to HCV NS5B, communication module sequence which can transfer structural transition for inducing ribozyme activity upon binding NS5B to the aptamer, and sequence of ribozyme targeting +382 nt of HCV IRES. Noticeably, we employed in vitro selection technology to identify the most appropriate communication module sequence which can induce ribozyme activity depending on the US5B protein. We demonstrated that the ribozyme was nonfunctional either in the absence of any proteins or in the presence of control bovine serum albumin. In sharp contrast, the allosteric ribozyme can induce activity of cleavage reaction with HCV IRES RNA in the presence of the HCV NS5B protein. This allosteric ribozyme can be used as lead compound for specific and effective anti-HCV agent, tool for highthroughput screening to isolate lead chemicals for HCV therapeutics, and ligand for biosensor system for HCV diagnosis.
ERM proteins transfer the methyl group to $A_{2058}$ in 23S rRNA, which reduces the affinity of MLS (macrolide-lincosamide-streptogramin B) antibiotics to 23S rRNA, thereby confer the antibiotic resistance on micro-organisms ranging from antibiotic producers to pathogens and are classified into monomethyltransferase and dimethyltransferase. To investigate the differences between mono- and dimethyltransferase, tirD, a representative monomethylase gene was cloned in Escherichia coli from Streptomyces fradiae which contains ermSF, dimethylase gene as well to overexpress the TlrD for the first time. T7 promoter driven expression system successfully overexpress tlrD as a insoluble aggregate at $37^{\circ}C$ accumulating to around 55% of the total cell protein but unlike ErmSF, culturing at temperature as low as $18^{\circ}C$ did not make insoluble aggregate of protein into soluble protein. Coexpression of Thioredoxin and GroESL, chaperone was not helpful in turning into soluble protein either as in case of ErmSF. These results might suggest that differences between mono- and dimethylase could be investigated on the basis of the characteristics of protein structure. However, a very small amount of soluble protein which could not be detected by SDS-PAGE conferred antibiotic resistance on E. coli as in ErmSF which was expected from the activity exerted by monmethylase in a cell.
ErmSF is one of the proteins which are produced by Streptomyces fradiae to avoid suicide by its autogenous macrolide antibiotic, tylosin and one of ERM proteins which are responsible for transferring the methyl group to $A_{2058}$ (Escherichia coli coordinate) in 23S rRNA, which reduces the affinity of MLS (macrolide-lincosamide-streptogramin B) antibiotics to 23S rRNA, thereby confers the antibiotic resistance on microorganisms ranging from antibiotic producers to pathogens. ErmSF contains an extra N-terminal end region (NTER), which is unique to ErmSF and 25% of amino acids of which is arginine known well to interact with RNA. Noticeably, arginine is concentrated in $^{58}RARR^{61}$ and functional role of each arginine in this motif was investigated through deletion and site-directed mutagenesis and the activity of mutant proteins in cell R60 and R61 was found to play an important role in enzyme activity through the study with deletion mutant up to R60 and R61. With the site-directed mutagenesis using deletion mutant of 1 to 59 (R60A, R61A, and RR60, 61AA), R60 was found more important than R61 but R61 was necessary for the proper activity of R60 and vice versa. And these amino acids were presumed to assume a secondary structure of $\alpha$-helix.
Kim, Min Ju;Kim, Min Seo;Kang, Sung Tae;Kim, Ji Yeon
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.60
no.4
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pp.321-326
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2017
We aimed to assess the potential growth-promoting effects of ginger and cinnamon mixtures (GCM) on intestinal bacteria and their anti-inflammatory effects in a cellular model of intestinal inflammation. Bifidobacterium longum, Lactobacillus sp., and Lactobacillus acidophilus served as intestinal bacteria. Further, in the inflammatory co-culture model, Caco-2 cells co-cultured with RAW264.7 cells were treated with GCM before the addition of lipopolysaccharide (LPS) to induce inflammation in RAW264.7 cells. Addition of GCM to modified Eggerth Gagnon media at a ginger:cinnamon ratio of 1:5 increased the growth of B. longum, Lactobacillus sp., and L. acidophilus compared to that of the control. In a cellular model, compared to LPS-treated groups, GCM-treated groups maintained high transepithelial electrical resistance at ginger:cinnamon ratios of 1:1, 1:3, 1:5, and 1:7 and decreased the tight junction permeability at 3:1, 1:1, 1:3, and 1:5 ratios, similar to that shown by the control groups. In addition, GCM-treated groups showed decreased levels of nitrite at 1:1, 1:5, and 1:7 ginger:cinnamon ratios. Based on these results, it can be concluded that among the various combinations of GCM, the ginger:cinnamon ratio of 1:5 is the optimal composite ratio that shows positive effects on the intestinal beneficial bacteria and in anti-inflammation.
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