인공장기 등 다양한 세포관련 연구를 수행할 때 요구되는 세포공배양에서 세포를 2D/3D 패터닝하는 기술은 장기를 모사하기 위한 필수적인 공정 중의 하나로 간주된다. 그러므로 이 글에서는 가장 간단하게 세포 및 표면을 이용하여 세포를 패턴화하고, 공배양할 수 있는 방법들에 대하여 설명하고자 한다.
The noble method of hybrid agarose gel microstamp fabricated by replica molding against PDMS master to make bacteria patterns on agar surface was presented. After the fabricated hybrid agarose gel microstamp was inked with E. coli, we could obtain 2 dimensional bacterial arrays with $50{\mu}m$ circular spots. And the various shaped patterns based on experimental design were easily generated. The analysis of mean fluorescent signal was showed that bacterial pattern have high contrast between spots and background and homogeneity of pattern. Our proposed method solved the problem of wetting and handling with small soft agarose gel microstamp when bacteria were used for ink. The agarose gel stamp provides appropriate environment to inked bacteria, which is essential technology for cell patterning with high retaining viability during the patterning process. This method is reproducible, convenient, rapid, and could be applied to screening system, study of cell-surface interaction, and microbial ecology.
In this study, we presented rapid and simple fabrication method of functionalized surface on various substrates as a universal platform for the selective immobilization of cells. The functionalized surface was achieved by using deposition of polyelectrolyte such as poly(allyamine hydrochloride) (PAH), poly(diallyldimethyl ammonium chloride) (PDAC), poly(4-ammonium styrene sulfonic acid) (PSS), poly(acrylic acid) (PAA) and fabrication of poly(ethylene glycol) (PEG) microstructure through micro-molding in capillaries (MIMIC) technique on each glass, poly(methyl methacrylate) (PMMA), polystyrene (PS) and poly(dimethyl siloxane) (PDMS) substrate. The polyelectrolyte multilayer provides adhesion force via strong electrostatic attraction between cell and surface. On the other hand, PEG microstructures also lead to prevent non-specific binding of cells because of physical and biological barrier. The characteristic of each modified surface was examined by using static contact angle measurement. The modified surface onto several substrates provides appropriate environment for cellular adhesion, which is essential technology for cell patterning with high yield and viability in the micropatterning technology. The proposed method is reproducible, convenient and rapid. In addition, the fabrication process is environmentally friendly process due to the no use of harsh solvent. It can be applied to the fabrication of biological sensor, biomolecules patterning, microelectronics devices, screening system, and study of cell-surface interaction.
Transactions of the Korean Society of Mechanical Engineers B
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v.34
no.1
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pp.89-94
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2010
Patterning bacteria and cells on substrates has potential applications in molecular biology, antimicrobial drug screening, environmental monitoring and tissue engineering. We developed a technique to deposit two-dimensional array of bacterial cells onto an agar plate by modifying commercially available thermal inkjet printers. The concentration of the bacterial solution in the cartridge was carefully determined to ensure a single cell suspension in a droplet ejected from a nozzle. We measured quantitatively the effects of the bacterial concentration and the agar concentration on patterning performance. Bacterial patterning by inkjet printer is a low-cost and versatile technique which may replace the existing sophisticated methods.
In this study, the feasibility of laser patterning on the surface of food packaging polymer film was confirmed, and the surface patterning process conditions of femtosecond laser were established. In addition, it was proved that the surface properties of the film can be changed and controlled through the fabrication of various patterned films on the surface of food packaging films such as HDPE, PP, and PET. Various patterned surfaces, including large-scale circular patterns induced by a single femtosecond laser pulse, roughness patterns achieved by overlapping single pulses by 30%, straight line patterns, roughness patterns obtained by overlapping straight line patterns, and grid patterns formed by intersecting straight line patterns were fabricated. The characteristics of the patterned HDPE, PP, and PET films, based on the surface pattern structure and size, were analyzed using SEM, AFM, and contact angle measurements. Compared to the surface of each control film without femtosecond laser patterning, the contact angles of the surfaces of large-area circular patterning HDPE and PP films, large-area roughness patterning HDPE and PP films by overlapping 30% of single pulses, and large-area roughness patterning PET film by overlapping rectilinear patterning were in the range of 27.1-37.5 degree. This indicated that the HDPE, PP, and PET films became more hydrophilic after patterning. On the other hand, the HDPE film patterned with a large-scale grid pattern exhibited a contact angle of 120.4 degree, indicating that the HDPE film became more hydrophobic after patterning. Therefore, films that have been changed to hydrophilic surfaces through patterning can be used in anti-fouling applications where proteins, cells, viruses, and other food materials do not adhere or are easily detached. In addition, if a superhydrophobic surface of 150 degrees or more is fabricated through more precise lattice patterning in the future, it will be possible to use it for superhydrophobic surface applications such as self-cleaning.
This study presents a fabrication method of cell-chip using aqueous solution based surface modification. The applications of cell-chip have potential for fundamental study of genetics, cell biology as well as cancer diagnostics and treatment. Conventional methods for fabrication of cell-chip have been limited in economic loss and environmental pollution because of the use of harsh organic solvent, complex process of silicon technology, and expensive equipment. In order to fabricate cell chip, we have proposed simple and eco-friendly process combined polyelectrolyte multilayer coating with microcontact printing. For the proof of concept, the cell chip can be applied to analyze the different expression of cell surface glycans and derivatives between cancer and normal cells. Our proposed method is useful technique for the application of novel cancer diagnostics and basic medical engineering.
The control of surface properties and spatial presentation of functional molecules within a microfluidic channel is important for the development of diagnostic assays, microreactors, and for performing fundamental studies of cell biology and fluid mechanics. Here, we present soft lithographic methods to create robust microchannels with patterned microstructures inside the channel. The patterned regions were protected from oxygen plasma by controlling the dimensions of the poly(dimethylsiloxane)(PDMS) mold as well as the sequence of fabrication steps. The approach was used to pattern a non-biofouling polyethylene glycol(PEG)-based copolymer or the polysaccharide hyaluronic acid(HA) within microfluidic channels. These non-biofouling patterns were then used to fabricate arrays of fibronectin(FN) and bovine serum albumin(BSA) as well as mammalian cells.
Journal of the Korean Society for Precision Engineering
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v.30
no.2
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pp.236-240
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2013
In this presentation, we propose a fabrication method of PDMS stencil to apply into a localized culture of NIH/3T3 cells. PDMS stencil was fabricated by nitrogen gas blowing and soft lithography from preparing SU-8 master mold by photolithography. PDMS stencil pattern was production of the circle size 20 to $500{\mu}m$. In the culture test of PDMS stencil, a stencil was placed on a glass disk. The NIH/3T3 cells were successfully cultured into micropatterns by using the PDMS stencil. The results showed that cells could be cultured into micropatterns with precisely controlled manner at any shapes and specific size for bioscience study and bioengineering applications.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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