Nematodes were isolated using silkwom trap through the investigation of 100 soil samples from various biotopes in Korea. The 30 nematode strains from soil and dead insects by the pathogenicity aganinst silkworms (Bombyx mori mori) and insect pests of Calliphora vomitoria, Pseufazetia separata, Palomena angulosa, and Melolontha incana. Mortailty of the silkworm larvae and pupae were as high as 100% by nematode infection, those of insect of pests were varied from 20 to 100%. The 30 strains of entemopathogenic nematodes were classified into five groups of Rhabditidae, Diplogatroidae, Heterorhabitidae, Steinernematidae, and Tylenchida by morphological criteria. The genetic relationships among the 30 nematode strains were analyzed by various RAPD bands with twenty primers. The 30 nematode strains were classified into six major subgroups on the basis of the genetic similarity coefficient of 0.853. The grouping by RAPD was agree with those of morphological taxa in discrimination of the higher group, however, was not completely agree in the subgroup. The family Steinernematidae belong to Rhabditida was clarified as closer to the Tylenchida, rather than the other Rhabditida of Heterorhabitidae, Rhabditidae, and Diplogatroidae in genetic distance valule. From the result of the morphological classification and RAPD of the genomic DNA showed that genetic relationship analysis furnish infurmation on phylogenetic classification and relationships of entomopathogenic nematodes. The application of genetic similarity will overcome the limitation of taxonomy and classification of morphologically simple nematode. Several primers were confirmed those utility of identification for individual nematode strains, the methods of molecular genetics secured the simplicity, rapidity and accuracy on the selection of entomopathogenic nematodes.
Twenty-two strains of nematophagous fungi were isolated from 100 soil samples. Nematophagous fungi were classified into three categories; 3-dimensional adhesive nets (A group), 2-dimensional adhesive nets (B group) and constricting ring (C group). Nine strains were selected and identified on the basis of morphological characteristics (hypha, conidiophore, form and size of conidia, number of conidia, node of conidophore, number and location of septa, size and color of chlamydospore) and ITS (internal transcribed spacer) region of rDNA sequences. As the results, the isolated were identified as belonging to the species of Monacrosporium thaumasium (Kan-2, Kan-4, Kan-11), Arthrobotrys oligospora (Kan-9, Kan-13, Kan-20, Kan-21), A. musiformis (Kan-12), and A. dactyloides (Kan-22).
Entomopathogenic nematodes were isolated through the investigation in soils collected from cultivated and non-cultivated fields using silkworms (Bombyx mori) and Galleria mellonella trap. The detectable rate of entomopathogenic nematodes of silkworms trap was higher than the G. mellonella trap. This study indicates the detection of entomopathogenic nematodes from soils that silkworms are sensitive superior to the G. mellonella to entomopathogenic nematodes. The steinernema, rhabditidae, and diplogatroidae strains successfully cultured on the silkworms host as well as on artificial media. Reproductivity in the living silkworm larva and pupa was 1.5 to 3.5${\times}$ 10$\^$5/ nematodes per host However, G. mellonella could be multiplied less than 5${\times}$l0$\^$5/ nematodes. The dried pupa of the silkworm following mositurize was cultured 0.5 to 2${\times}$10$\^$5/) nematodes per host. The culture methods of the steinernema, rhabditidae, and diplogatroidae strains, using silkworm powder, extracted chicken intestine, and food waste fertilizer could be applicative, but rate of reproduction was low.
Kim, Soo-Jin;Min, Byoung-Hoon;Lee, Haeng-Sook;Lee, Byoung-Wook;Joo, Kyoung-Hwan
Applied Microscopy
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v.39
no.2
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pp.167-173
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2009
Capillaria hepatica is a parasitic nematode which causes hepatic capillariasis in rodents and other mammals, including man. Rat species of the genus Rattus are main primary host and rates of genus Rattus of up to 100% have been reported. Infection to reservoir and other mammalian hosts occur incidentally due to ingestion of water or food contaminated with C. hepatica embryonated eggs. The worms mature exclusively inside the liver, but they die and disassemble soon after egg spawning in rats. Dead worms and their eggs cause immune response of focal necrosis and inflammation within the liver. C. hepatica adult with a thin and long body is similar to capillary. The members of Order Trichurida are characterized by having a stichosome and the bacillary bands in front of the body. As already mentioned, the adult C. hepatica residesin the liver, where it deposits groups of eggs, and finally die in the encapsulated tissue of the liver. They produce eggs that elicit a marked granulomatous reaction that eventually destroy the worms. And the adult worms were mixed with eggs. So the complete isolation of the worm and observation of intact ultrastructure is very difficult. In this study, integument structure of C. hepatica isolated from the liver of mouse at 7 weeks after inoculation of embryonated eggs were observed with scanning and transmission electron microscopy. As a results, body length of isolated C. hepatica was about 99 mm. Cuticle, bacillary band and bacillary pore were obtained in the integument of worm. Bacillary pore across cuticular surface of the worm were observed. According to the existence of cap material, external forms of bacillary pore can be divided into three types such as flat, ingression, and ingression with the cap material type. The complete isolation of the worm and observation of ultrastructure of integument will provide the fundamental data which is important in the nematode research including C. hepatica.
Lee, Chae Min;Lim, Tae Heon;Lee, Sang Myeong;Mun, Il Sung;Han, Sang Sub;Lee, Dong Woon
The Korean Journal of Pesticide Science
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v.19
no.2
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pp.141-150
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2015
Thirty-two actinomycetes isolates from Korean forest soil were screened for their nematicidal and reproduction suppression activity against pine wood nematode (PWN) which is widely spread in Korea. Culture filterates of 21 isolates showed more than 90% mortality at 2-fold concentration. Among them, AM210, SG16, YD116 and YD315 were more effective than others on reproduction of PWN. The YD116 isolate was identified as Streptomyces atratus by morphological and 16S rDNA analyses. Hydrazine hydrate, similar to hydrazidomycin which has cytotoxicity among substances from S. atratus against PWN, was tested for its nematicidal activity. Ten ppm of the hydrate showed 60.8% mortality. Additional studies are needed for practical use of the S. atratus YD116 isolate.
Seo, Jongmin;Kang, Heonil;Kwon, Giyoon;Park, Namsook;Bae, Changhwan;Choi, Insoo
The Korean Journal of Mycology
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v.47
no.4
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pp.291-301
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2019
Nematophagous fungi can capture, kill, and digest nematodes using a specific capturing organ. Of the nematophagous fungi, while Arthrobotrys flagrans and A. superba have been described previously, certain characteristics have not been described. For a detailed description of the two nematophagous fungi, the fungi were isolated from soil samples and produced in a pure culture. Morphological characteristics, such as predatory ability (according to the nematode species), shape, and size of predatory organ, conidia, and chlamydospore were investigated and they were used for identification of the fungal isolates along with molecular phylogenetic analysis. Furthermore, this study provides the classification key for 21 nematophagous species.
The variety and density of entomopathogenic nematodes from the polluted soils of heavy metals were examined. In order to investigate the pollution of heavy metals in soil, 300 sites in kyungsangbuk-do were collected from March to October in 2001. We measured the contents of seven heavy metal elements (Cd, Cu, As, Hg, Pb, Cr^{6+}$, CN) and than cheesed soil of 25 sites with high concentration of heavy metals. The seven strains of nematodes were isolated from seven samples by silkworm host (Bombyx mori mori) and white trap. Isolated nematodes are composed of two families, one order. The members of Rhabditida were isolated in the soil with mean Cd content of 0.870 ppm. And they were isolated in the soil samples with As content less than 0.745 ppm. However they were isolated regardless of concentration of Cu and Pb. The members of Cylindrocorpidae were isolated in the soil samples with Cr^{6+}$ content less than 0.05 ppm. Any entomopathogenic nematode was not detected in the CN polluted soil. Isolated nematodes successfully cultured on the silkworm host and were confirmed the pathogenicity, multiplicity, and tolerance against various condition of preservation. Which proved its potential usefulness as biological agent.
In this study, we analyzed the phylogenetic characterization of root-knot nematodes (Meloidogyne spp.) in soils from fruits and vegetables greenhouses in Korea. Soil samples were collected from 12 greenhouse fields in which tomato, cucumber, watermelon, and Oriental melon were being cultivated. Meloidogyne spp. were detected in all the soil samples at an average number of $72{\pm}6$ nematodes/300 g of soil to $2,898{\pm}468$ nematodes/300 g of soil. Phylogenetic analysis using polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism was attempted for the second-stage juveniles (J2) of Meloidogyne spp. collected from the greenhouse soils. Twelve Meloidogyne spp. from the greenhouse soils were classified into two groups by using HinfI digestion of mitochondrial DNA, resulting in 900, 410, 290, and 170 bp fragments (group A) and 900, 700, and 170 bp fragments (group B). Phylogenetic analysis based on mitochondrial DNA sequences (1,483-1,521 bp) showed that nine group A isolates were identified as Meloidogyne incognita (99.73-99.93%) and three group B isolates showed 99.54-99.73% similarity to Meloidogyne arenaria.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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