The purpose of this study was to investigate the antioxidant activity and β-glucan content of extracts extracted by varying the temperature at 30, 55 and 80℃ after hot air drying or freeze drying of Pleurotus ostreatus and Pleurotus eryngii. For the analysis antioxidant activity of each mushroom, β-glucan, total phenol, flavonoid contents, and DPPH·ABTS+·Nitrite assay were measured. Also, the β-glucan content, total flavonoid content and ABTS+ scavenging activity increased with freeze drying rather than hot air drying, and increased with increasing extraction temperature in both mushrooms. However, the total phenol and nitrite scavenging activity increased with hot air drying rather than freeze drying, and decreased with increasing temperature in both mushrooms. DPPH scavenging activity was not significant in both mushrooms, but decreased with increasing extraction temperature. Pearson's correlations between total flavonoid content and antioxidant activities were r=0.719~0.753 (p<0.01). As a result, the β-glucan content, total flavonoid content, and ABTS radical cation scavenging activity were highest during freeze drying and extraction at 80℃. And the highest total phenol content, DPPH radical scavenging activity and nitrite scavenging activity were obtained during hot air drying and extraction at 30℃.
본 연구에서는 바이오폴리머의 일종인 베타글루칸을 구연산과 교차결합하여 수용액 내에서 불용성인 흡착제(crosslinked β-glucan, CBG)롤 제조하였으며, FTIR과 SEM-EDX를 이용하여 CBG의 특성평가와 납과 구리 흡착특성을 파악하기 위한 pH에 따른 흡착량 변화, 흡착속도, 등온흡착 실험을 진행하였다. 특성평가 결과, 베타글루칸과 구연산의 교차결합 메커니즘을 파악하였으며, CBG 표면에서의 납과 구리 흡착을 확인하였다. 수용액 pH에 의한 흡착량 변화 실험에서는 pH 6에서 가장 높은 납과 구리 흡착량을 보였으며, pH 3이하에서는 급격한 감소를 보였다. 또한 흡착속도 실험 결과 CBG에 의한 납과 구리 흡착은 유사 2차 반응속도식과 내부확산식을 따르는 것을 확인하였고, 등온흡착 실험에서는 Langmuir식을 따라 납과 구리 최대흡착량이 각각 59.70, 23.44 mg/g임을 확인하였다. 본 연구에서는 구연산을 이용하여 베타글루칸을 수용액 내 흡착제로 이용하는 방법을 제시하고자 하였으며, 연구결과에 따라 CBG는향후 친환경적인 중금속 흡착제로서의 적용이 가능할 것으로 판단된다.
Antifungal activities of the extracts from 26 medicinal plants were investigated utilizing paper-disk diffusion method and (1,3)β-glucan synthase inhibitory assay. (1,3)β-glucan synthase is considered as valuable target in the development of antifungal agents. Among the screened extracts, the ethyl acetate extract of Equisetum arvense, the ethyl acetate extract of Polygonum aviculare, the butanol extract of Crataegus pinnatifida and the n-hexane extract of Saussurea lappa showed significant antifungal activities on Candida albacans in both disk diffusion and enzyme assays.
The fungal cell wall is a major target of antifungals. In this study, we report the antifungal activity of an ethanol extract from Aucklandia lappa against Candida albicans. We found that the extract caused cell wall injury by decreasing chitin synthesis or assembly and (1,3)-β-D-glucan synthesis. A sorbitol protection assay demonstrated that the minimum inhibitory concentration (MIC) of the A. lappa extract against C. albicans cells increased eight-fold from 0.78 to 6.24 mg/ml in 72 h. Cell aggregates, which indicate damage to the cell wall or membrane, were commonly observed in the A. lappatreated C. albicans cells through microscopic analysis. In addition, the relative fluorescence intensities of the C. albicans cells incubated with the A. lappa extract for 3, 5, and 6 h were 92.1, 84.6, and 79.8%, respectively, compared to the controls, estimated by Calcofluor White binding assay. This result indicates that chitin content was reduced by the A. lappa treatment. Furthermore, synthesis of (1,3)-β-D-glucan polymers was inhibited to 84.3, 79.7, and 70.2% of that of the control treatment following incubation of C. albicans microsomes with the A. lappa extract at a final concentration equal to its MIC, 2× MIC, and 4× MIC, respectively. These findings suggest that the A. lappa ethanol extract may aid the development of a new antifungal to successfully control Candidaassociated disease.
${\beta}$-glucan은 면역증강제의 하나로 어류를 비롯한 척추동물의 사료첨가제에 널리 이용되고 있는 다당체이다. 본 연구는 척추동물과는 다른 면역체계를 갖고 있는 바지락의 면역반응에 ${\beta}$-glucan이 미치는 영향을 조사하기 위하여 실시되었다. 이를 위하여 식물플랑크톤이 공급된 해수에 0, 0.1, 1%의 ${\beta}$-glucan을 첨가하고 이 해수에 바지락을 매일 1시간 씩 2주간 노출시켜 먹이 섭식 시 ${\beta}$-glucan이 흡수되도록 하였다. 바지락의 면역력은 혈구의 식세포작용과 혈림프액의 병원성 세균에 대한 정균력을 실험전과 ${\beta}$-glucan을 급이한 2주 후 각 그룹별로 비교하였다. 실험결과 0.1%의 ${\beta}$-glucan에 노출된 바지락의 식세포율은 대조구와 비교하여 뚜렷한 증가가 관찰되지 않았으나 1%의 ${\beta}$-glucan에 노출된 경우 약 30%의 식세포율이 증가하였다. 또한 정균력에 관한 실험에서 ${\beta}$-glucan은 바지락 혈림프액이 Vibrio tapetis, V. parahaemolyticus, V. ordalii 등의 병원성 세균의 증식을 억제케 함이 확인되었다. 바지락의 사망률 역시 ${\beta}$-glucan에 노출된 바지락에서 낮았으며 이러한 경향은 ${\beta}$-glucan의 농도가 높을수록 낮았다. 본 연구를 통하여 바지락은 ${\beta}$-glucan에 의해 면역력이 상승하였으며, 주사방식이 아닌 해수 침지시에도 발생함을 확인하였다.
${\beta}$-Glucan은 효모나 버섯의 세포벽이나 곡물의 섬유에 들어있는 천연 화합물이며, 면역 시스템을 활성화 한다고 알려져 있다. Aureobasidium pullulans 수용성의 ${\beta}$-1,3/1,6-glucan을 생성한다. 본 연구에서는 A. pullulans 로부터 생성된 ${\beta}$-1,3/1,6-glucan의 면역활성에 관한 효과를 조사하기 위하여, 면역활성에 관여하는 NK 세로의 활성과 대식세포에 미치는 영향을 관찰하였다. NK 세포에 의한 Yac-1 세포의 사멸율은 ${\beta}$-1,3/1,6-glucan을 처리한 군은 처리하지 않은 대조군에 비하여 63-39% 증가하는 것으로 나타났고, 대식세포의 탐식작용은 zymosan을 처리한 군보다 15-21% 증가함을 보였다. LP-BM5 바이러스 복제 억제능을 확인하기 위하여 SC-1/LP-BM5 세포주에 ${\beta}$-1,3/1,6-glucan을 처리한 결과 $200{\mu}g/mL$ 처리에서 LP-BM5 바이러스 복제능이 최대 74% 유의적으로 감소하였다. 이 결과는 ${\beta}$-1,3/1,6-glucan이 면역활성에 관여하는 NK 세포와 대식세포를 활성화하여 면역체계가 민감하게 반응할 수 있도록 만들고, LP-BM5 바이러스 복제를 억제하여 면역력을 증진할 수 있다는 것을 보여준다.
The effects of dietary yeast β-glucan administration on growth, nonspecific immune responses, serum lysozyme, skin mucous lysozyme, NBT (nitroblue tetrazolium) reduction by phagocytes, and disease resistance against Edwardsiella tarda in Japanese eel, Anguilla japonica were evaluated. Fish were fed the diets supplemented with 0%, 0.1% and 0.5% of yeast β-glucan to a commercial diet for 6 weeks. The body weight gain from the fish fed on the 0.5% supplemented diet for 6 weeks was significantly higher than the control. Both serum and skin mucous lysozyme were significantly higher in the all experimental groups except 2 weeks of 0.5% group. The bactericidal activity of serum was slightly increased at 6 weeks. Also, The intracellular superoxide anion production of kidney phagocytes was significantly higher in the all experimental groups. The diet supplemented with 0.1% were also found to raise the relative percent survival (RPS) of Japanese eel after an artificial challenge with 1×107 cells of Edwardsiella tarda per fish. The results suggested the potential of yeast β-glucan to activate some innate immune responses and to improve the growth in Japanese eel.
알칼리 가수분해에 따른 보리 ${\beta}$-glucan의 이화학적 특성변화를 살펴보기 위하여 새쌀보리, 새찰쌀보리 및 흰찰쌀보리에 0.2~1.0 N NaOH를 처리하였으며, 총 및 수용성 ${\beta}$-glucan의 함량 및 순도, 수용성 ${\beta}$-glcuan의 분자량, 점도 및 재용해율을 살펴보았다. 3품종 보리의 총 ${\beta}$-glucan 함량은 7.77~8.40% 범위이었으며, 알칼리 가수분해 농도가 증가함에 따라 6.89~7.54% 범위로 감소하였다. 수용성 ${\beta}$-glucan의 함량은 무처리의 4.16~4.80% 범위에서 알칼리 가수분해 농도가 증가함에 따라 4.30~4.82% 범위로 유의적인 차이가 없었다. 수용성 ${\beta}$-glucan의 순도는 3품종 모두 30.91~35.79% 범위이었으나, 알칼리 가수분해에 의해 74.02~81.41%까지 증가하였다. 분자량은 메성보리보다 찰성보리가 더 컸으며, 알칼리 가수분해 농도가 증가함에 따라서 크게 감소하였다. ${\beta}$-Glucan 수용액의 점도는 알칼리 가수분해 농도가 증가함에 따라 감소하였으며, 메성보리보다 찰성보리가 높았고, 흰찰쌀보리보다 새찰쌀보리가 높았다. 재용해율은 무처리의 50~55% 범위에서 알칼리 가수분해 농도가 증가함에 따라 증가하여 1.0 N NaOH 처리구에서 80.00~87.66% 범위로 증가하였다.
추출조건에 따른 귀리겨 ${\beta}$-glucan의 추출조건을 확립하기 위하여 추출온도($40{\sim}60^{\circ}C$), 추출용매의 에탄올 농도(0~20%) 및 pH(5~9)를 변수로 중심합성계획법으로 설계하여 ${\beta}$-glucan 추출특성을 조사하였다. 추출시간의 증가에 따라 ${\beta}$-glucan의 추출속도는 추출초기에 급격히 증가하였으나, 이후에는 완만하였다. 총괄물질전달계수는 $3.363{\sim}8.552{\times}10^{-6}cm/min$ 범위로 낮은 추출온도에서는 추출용매의 농도가 낮을수록, 높은 추출온도에서는 추출용매의 농도가 높을수록 증가하였지만 pH에 의한 영향은 적은 것으로 나타났다. 추출용매의 pH는 중성일 때보다 산성이나 알칼리성일 때 ${\beta}$-glucan의 추출량이 증가하였다. 추출조건에 따라서 ${\beta}$-glucan 수용액의 점도는 유의적인 차이를 보였으며, 총괄물질전달계수가 높을수록 crude ${\beta}$-glucan 수용액의 점도가 높게 나타났으며, 점도, 추출율 및 총괄물질전달계수의 상관관계를 분석한 결과, 각각의 요인들이 높은 양의 상관관계(p<0.01)를 나타내었다.
Candidiasis has posed a serious health risk to immunocompromised patients owing to the increase in resistant yeasts, and Candida albicans is the prominent pathogen of fungal infections. Therefore, there is a critical need for the discovery and characterization of novel antifungals to treat infections caused by C. albicans. In the present study, we report on the antifungal activity of the ethanol extract from Salvia miltiorrhiza against C. albicans and the possible mode of action against C. albicans. The increase in the membrane permeability was evidenced by changes in diphenylhexatriene binding and release of both 260-nm-absorbing intracellular materials and protein. In addition, inhibition of cell wall synthesis was demonstrated by the enhanced minimal inhibitory concentration in the presence of sorbitol and reduced (1,3)-β-D-glucan synthase activity. The above evidence supports the notion that S. miltiorrhiza has antifungal activity against C. albicans by the synergistic activity of targeting the cell membrane and cell wall. These findings indicate that S. miltiorrhiza displays effective activity against C. albicans in vitro and merits further investigation to treat C. albicans-associated infections.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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