서로 다른 물리-화학적 성격이 다른 저온기 두 부영양수계에서 우점하는 규조류 중심의 현장수에 대한 한국산 말조개(Unio douglasiae)의 섭식특성-여과능 및 배설물 생산을 각각 비교 조사하였다. 두 실험수 모두 패류밀도가 증가할수록 뚜렷한 엽록소 $\alpha$ 감소를 보였으며, 한강시료는 1시간 이후부터, 일감호 시료는 패류 처리와 함께 즉시 감소였다. 한강시료는 고밀도 처리에서 감소율이 높았으며 (약 90%), 일감호시료는 패류밀도 간에 다소 차이는 보였으나 고밀도군에서도 50% 정도 감소하였다. 조류 현존량의 변화경향는 엽록소와 유사하였으며, 시료와 조류종에 따라 차이를 보였다. 패류의 조류여과능은 패류적용 1시간째 시료 간에는 큰 차이를 보였으나 시간이 경과할수록 유사한 수준에 도달하였다. 배설물 생산은 한강시료에서는 밀도간에 차이가 적었으며 일감호의 높은 전도도와 탁도, 낮은 DO 포화도에서는 밀도 간에 100배 이상의 큰 차이를 나타냈다. 특히 일감호에서 고밀도 패류 적용시, 낮은 엽록소(조류)감소 및 높은 배설물 생산 등은 소화가 어려운 고형물의 축적효과가 높아 저온기 동안 탁도가 높은 하천 및 호수의 수질개선에 매우 효과적일 것으로 사료되었다.
연구배경 : 폐상피세포가 능동적으로 IL-8을 분비한다는 것은 주지의 사실이다. NF-${\kappa}B$는 IL-8 발현 조절에 있어서 가장 중요한 역할을 담당하는 전사인자이다. Triptolide는 최근 밝혀진 NF-${\kappa}B$ 억제제로서 중국한약제인 뇌공등 (Tripterygium Wilfordii)에서 추출된약제이다. 연자들은 새로운 NF-${\kappa}B$ 억제제인 triptolide가 폐상피세포에서 NF-${\kappa}B$ 의존성 IL-8 유전자의triptolide가 염증성 폐질환에서 새로운 치료제로서의 가능성을 확인하기 위하여 본 연구를 시행하였다. 방법 : 폐상피세포로서 A549 사용하였고 triptolide는 미국의 Pharamagenesis(Palo Alto, CA)사로부터 제공받았다. NF-${\kappa}B$ 활성유도물질로는 IL-$1{\beta}$(R&D)와 PMA(Sigma)를 이용하였다. IL-8 유전자의 발현은 RT-PCR과 ELISA를 이용하여 측정 하였다. NF-${\kappa}B$의존성 IL-8 유전자의 전사활성을 평가하기 위하여는 IL-8 NF-${\kappa}B$ luciferase construct를 안정적으로 유전자주입한 A549 IL-8 NF-${\kappa}B$ luciferase 세포주를 제조해 사용하였고 NF-${\kappa}B$ DNA 결합은 electromobility shift assay(EMSA)를 이용하였다. p65 전사활성을 assay하기 위해서는 Gal4-p65 fusion protein expression system을 유전자주입과 luciferase assay를 통하여 시행하였다. Transcriptional coactivator의 역할을 규명 하가 위하여서는 CBP(CREB-binding protein)와 SRC-1(steroid receptor coactivator-1) 발현 벡터를 유전자 주입하고 luciferase assay를 이용하여 확인하였다. 결과 : Luciferase assay로 triptolide가 PMA와 IL-$1{\beta}$자극에 의한 IL-8 NF-${\kappa}B$ 활성을 의미있게 감소시킴을 확인하였다. IL-8 ELISA와 RT-PCR로 triptolide가 PMA와 IL-$1{\beta}$ 자극에 의해 유도되는 IL-8 발현을 각각 단백질과 mRNA 수준에서 억제함을 관찰하였다. Triptolide가 PMA와 IL-$1{\beta}$에 의한 IL-8 NF-${\kappa}B$의 전사활성을 억제시킨 반면 EMSA와 $I{\kappa}B{\alpha}$ Western blot을 이용한 실험에서는 triptolide가 NF-${\kappa}B$ DNA 결합과 $I{\kappa}B{\alpha}$의 분해에 전혀 영향을 미치지 못함을 확인하였다. 이러한 전사활성 억제와 DNA 결합 간의 불일치의 원인으로서는 DNA 결합 이후에 발생하는 핵내 에서의 transactivation에 triptolide가 영향을 미치리라고 생각되어 p65 transactivation study를 Gal4-p65T A(p65의 transactivation domain) fusion protein 발현 시스템과 luciferase assay를 이용하여 시행한 결과 triptolide가 p65 transactivation을 억제함으로써 NF-${\kappa}B$를 억제함을 확인하였다. 그러나 CBP나 SRC-1과 같은 coactivator의 역할을 규명하기 위한 유전자주입 실험에서 triptolide에 의한 p65 transactivation 억제에 대해 CBP나 SRC-1의 과발현이 별다른 영향을 미치지 못하였다. 결론 : Triptolide는 폐상피세포에서 NF-${\kappa}B$ 의존성 IL-8 유전자의 전사활성을 억제하고 그 기전은 $I{\kappa}B{\alpha}$ 경로가 아닌 핵내에서의 p65 transactivation 억제에 의해 발생하며 이에는 CBP나 SRC-1과 같은 coactivator가 관여하지 않음을 확인하였다.
Objectives: Gallic acid (GA) is the major component of tannin which could be easily founded in various natural materials such as green tea, red tea, grape juice, and Corni Fructus. The purpose of this study is to investigate the effect of Gallic acid (GA) on production of interleukin (IL) in mouse macrophage Raw 264.7 cells stimulated by lipopolysaccharide (LPS). Methods: Productions of interleukins were measured by High-throughput Multiplex Bead based Assay with Bio-plex Suspension Array System based on $xMAP^{(R)}$ (multi-analyte profiling beads) technology. Firstly, cell culture supernatant was obtained after treatment with LPS and GA for 24 hour. Then, it was incubated with the antibody-conjugated beads for 30 minutes. And detection antibody was added and incubated for 30 minutes. And Strepavidin-conjugated Phycoerythrin (SAPE) was added. After incubation for 30 minutes, the level of SAPE fluorescence was analyzed on Bio-plex Suspension Array System and concentration of interleukin was determined. Results: The results of the experiment are as follows. 1. GA significantly inhibited the production of IL-3, IL-10, IL-12p40, and IL-17 in LPS-induced mouse macrophage RAW 264.7 cells at the concentration of 25, 50, 100, 200 uM (p<0.05). 2. GA significantly inhibited the production of IL-6 in LPS-induced mouse macrophage RAW 264.7 cells at the concentration of 50, 100, 200 uM (p<0.05). 3. GA diminished the production of some cytokine such as IL-4, IL-5, and IL-13 in LPS-induced mouse macrophage RAW 264.7 cells. 4. GA did not show the inhibitory effect on the production of IL-$1{\alpha}$ and IL-9 in LPS-induced mouse macrophage RAW 264.7 cells. Conclusions: These results suggest that GA has anti-inflammatory activity related with its inhibitory effects on the production of interleukins such as IL-3, IL-10, IL-12p40, IL-17, and IL-6 in LPS-induced macrophages.
본 연구에서는 추출 온도에 따른 금불초 꽃(I. britannica var. chinensis) 추출물의 항노화 효능을 알아 보았다. 추출 온도에 따른 세포독성을 살펴본 결과, 상온, $45^{\circ}C$와 $65^{\circ}C$ 추출물 모두 0.1% 이하의 농도에서 세포독성이 관찰되지 않았다. 0.1% 이하의 농도에서 항노화 효능평가를 수행한 결과, 0.1% 농도의 상온 추출물 경우에 멜라닌 생성 억제율은 24.5%로 $45^{\circ}C$와 $65^{\circ}C$ 추출물과 비교하여 멜라닌 생성 억제율이 큰 것으로 나타났다. 0.1% 농도의 상온 추출물을 처리한 세포의 히알루론산 합성 관련 유전자 HAS-1, HAS-2 및 HAS-3의 발현율은 각각 123.3%, 137.8% 및 133.2%를 나타냈으며, 이는 비교물질인 L-ascorbic acid (115.6%, 121.0% 및 131.4%) 경우 보다 약간 크게 나타났다. 금불초 꽃 45 $^{\circ}C$ 추출물의 경우, 0.1%의 농도에서 염증유발 유전자인 TNF-${\alpha}$, COX-2 및 IL-1${\alpha}$의 발현율이 대조군 대비 각각 30.3%, 12.8%, 25.7%로 감소하였으며, 이는 상온, $65^{\circ}C$ 추출물과 비교하여 염증유발 유전자 발현 억제 효과가 더 큰 것으로 나타났다. 이상의 결과들로 볼 때, 금불초 꽃 추출물은 추출 온도에 따라 멜라닌 생성 억제, 히알루론산 합성 관련 유전자 발현 증가 효과, 염증유발 유전자 발현 억제 효과를 나타내며, 그로 인하여 피부에서 미백, 보습, 항염 효능을 통해 피부 항노화 효능을 가질 것으로 사료된다. 이는 금불초 추출물이 항노화 화장품 원료로서 응용 가능성이 있음을 시사한다.
The Salvia plebeia R. which is the biennial plant belonging to the Labiatae department, grows naturally in the Korea entire area. Presently, its extract (SPRE) is known to have an anti-inflammation and anti-allergy activity, but there are a few evidences about it. SPRE inhibits pro-inflammatory cytokine such as TNF-$\alpha$ and IL-6 as well as nitric oxide (NO) production in lipopolysaccharide (LPS) treated- macrophages. The co-administration of SPRE during OVA sensitization significantly reduced total IgE levels in mice. The mice who received SPRE co-administered with OVA showed a significant increase in serum OVA-specific IgG2a/b levels. Spleen-cell cultures harvested from OVA-sensitized mice showed a significant decrease in Th2 cytokine levels with a concomitant increase in Th1 cytokine levels only when SPRE co-administered with OVA. These results demonstrate that SPRE can control the LPS-induced inflammatory reaction and prevent antigen-induced Th2 immune responses in mice.
BACKGROUND/OBJECTIVES: The present study investigated the hypothesis that a highly pure linear ${\beta}$-1,3-glucan produced by Agrobacterium sp. R259 enhances human natural killer (NK) cell activity and suppresses pro-inflammatory cytokines. SUBJECTS/METHODS: In an eight-week, double-blind, randomized, placebo-controlled clinical trial, 83 healthy adults with white blood cell counts of $4,000-8,000cells/{\mu}L$ were participated and randomly assigned to take two capsules per day containing either 350 mg ${\beta}$-1,3-glucan or placebo. Six participants withdrew their study consent or were excluded due to NK cell activity levels outside the normal range. NK cell activity and serum levels of immunoglobulin G (IgG) and cytokines, such as interferon (IFN)-${\gamma}$, interleukin (IL)-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12 and tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ were measured. RESULTS: NK cell activity and the serum levels of IL-10 were significantly higher from baseline to week 8 in the ${\beta}$-glucan group compared with the placebo group (P = 0.048, P = 0.029). Consumption of ${\beta}$-1,3-glucan also significantly increased NK cell activity compared with placebo after adjusting for smoking and stress status (P = 0.009). In particular, the effect of ${\beta}$-1,3-glucan on NK cell activity was greater in participants with severe stress than in those experiencing mild stress. However, the administration ${\beta}$-1,3-glucan did not significantly modulate the levels of IFN-${\gamma}$, IL-2, IL-4, IL-6, IL-12, TNF-${\alpha}$ and IgG compared with the placebo. CONCLUSION: The results showed that supplementation with bacterial ${\beta}$-1,3-glucan significantly increased NK cell activity without causing any adverse effects. Additionally, the beneficial effect of ${\beta}$-1,3-glucan on NK cell activity was greater in participants experiencing severe stress.
Yijung-tang (YJT) is a traditional herbal formula comprising 4 medicinal herbs. In the present study, we performed the simultaneous analysis for three compounds of YJT and examined anti-allergic effects in vitro. The column for separation of three compounds was used Gemini C18 column and maintained at 40$^{\circ}C$. The mobile phase for gradient elution consisted of two solvent systems. To evaluate Th2 chemokines, YJT was treated into tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ and interferon (IFN)-${\gamma}$-stimulated HaCaT cells, and performed ELISA for thymus and activation regulated chemokine (TARC) and regulated on activation, normal T-cell expressed and secreted (RANTES). To measure Th2 cytokines, YJT was added into primary mouse splenocytes, and performed ELISA for interleukin (IL)-4, 5, 13. Calibration curves were acquired with r2 >0.9999. The contents of liquiritin, glycyrrhizin, and 6-gingerol in YJT were 4.50 mg/g, 11.10 mg/g, and 1.33 mg/g, respectively. YJT inhibited production of TARC and RANTES in TNF-${\alpha}$ and IFN-${\gamma}$-treated HaCaT cells. YJT also reduced production of IL-4, 5, and 13 in primary mouse splenocytes. In conclusion, our data will be a valuable information to improve quality control and anti-allergic effects of YJT.
NaMg[$Cr(C_2O_4)_3]{\cdot}10H_2O$ crystallizes in the trigonal space group P$\bar{3}$c1, with a=b= 16.969(3), c=12.521(3) ${\AA}$, ${\alpha}={\beta}=90^{\circ},\;{\gamma}=120^{\circ},\;{\rho}=1.734 \;gcm^{-3},\;{\mu}=6.46\;cm^{-1}$, Z=6. Intensities for 1062 unique reflections were measured on a four-circle diffractometer with Mo K${\alpha}$ radiation (${\lambda}=0.71069\;{\AA}$). The structure was solved by direct methods and refined to a final ${\omega}$R value of 0.084. X-ray crystal structure showed that magnesium ion appears to be occupied over two sites with the occupancy ratio of 2:1. The crystal possesses 10 water molecules instead of previously estimated 9 water molecules.
본 연구는 분유모델시스템에 $\small{L}$-carnitine, pyridoxine hydrochloride, $\small{DL}$-${\alpha}$-tocopheryl acetate를 첨가하여 Maillard 반응에 의해 생성된 MRPs를 저감화 시키기 위한 최적조건을 찾기 위해 RSM의 CCD를 이용하였다. $\small{L}$-Carnitine ($X_1$), pyridoxine hydrochloride($X_2$), $\small{DL}$-${\alpha}$-tocopheryl acetate ($X_3$)의 농도를 독립변수로 하고 형광도와 HMF 함량을 종속변수로 각각 설정하였다. 종속변수 회귀식의 결정계수($R^2$)는 각각 0.942, 0.861로 반응표면분석 모델에 적합하였다. 형광도와 HMF 함량은 $\small{L}$-carnitine과 pyridoxine hydrochloride의 농도가 낮을 때 $\small{DL}$-${\alpha}$-tocopheryl acetate의 농도가 감소할수록 그 값이 급격히 감소하였다. $\small{L}$-Carnitine의 농도가 높을 때 pyridoxine hydrochloride의 농도가 $20{\mu}M$ 이하로 감소할수록 형광도가 감소하였고 HMF 함량은 $\small{L}$-carnitine의 농도에 관계없이 pyridoxine hydrochloride의 농도가 $20{\mu}M$ 이하로 감소할수록 감소하는 경향을 나타냈다. 본 실험에서 분유모델시스템에서 생성된 MRPs를 저감화 할 수 있는 최적조건으로 $\small{L}$-carnitine, pyridoxine hydrochloride, $\small{DL}$-${\alpha}$-tocopheryl acetate의 농도는 각각 2.26, 15.77, $20.63{\mu}M$이었다. 이때 형광도는 77.4%였고 HMF 함량은 248.7 ppb로 각각 유단백질-유당 마이얄 반응생성물(LC, lactose+sodium caseinate)대비 MRPs를 22.6, 23.1% 감소시킬 수 있다고 예측할 수 있었다. 또한, RSM을 통해 찾은 최적 조건의 실험값으로 형광도는 79.3%였고 HMF 함량은 247.6 ppb로 각각 LC대비 MRPs를 20.7, 17.8% 감소 시켰다. 따라서, $\small{L}$-carnitine, pyridoxine hydrochloride, $\small{DL}$-${\alpha}$-tocopheryl acetate의 최적화된 혼합을 통하여 분유 제조 시 MRPs 생성을 저감화 시킬 수 있을 것으로 생각된다.
Lactic acid bacteria (LAB) in fermented foods have attracted considerable attention recently as treatment options for immune diseases, the incidence of which has been increasing worldwide. The ability of 500 strains of LAB, isolated from kimchi, to induce TNF-${\alpha}$ production in peritoneal macrophages was investigated. Lactobacillus plantarum HY7712 most strongly induced TNF-${\alpha}$ production as well as NF-${\kappa}B$ activation. However, HY7712 inhibited NF-${\kappa}B$ activation in LPS-stimulated peritoneal macrophages. When HY7712 was orally treated in cyclophosphamide (CP)-immunosuppressed mice for 5 or 15 days, it reversed the body and spleen weights, blood RBC and WBC levels, and splenocyte and bone marrow cells that were reduced by CP. Orally administered HY7712 increased concanavalin A-induced T cell proliferation to 84.5% of the normal group on day 15, although treatment with CP alone markedly reduced it to 53.7% of the normal group. Furthermore, orally administered HY7712 significantly induced the expressions of IL-2 and IFN-${\gamma}$ in ConA-induced splenic cytotoxic T cells of CP-treated mice. Orally administered HY7712 restored the CP-impaired phagocytosis of macrophages in mice. Orally administered HY7712 also restored the cytotoxicity of NK and cytotoxic T cells derived from spleen and bone marrow against YAC-1 in CP-immunosuppressed mice. Based on these findings, orally administered HY7712 may accelerate the recovery of cyclophosphamide-caused immunosuppression, without evident side effects, by immunopotentiating NK and Tc cells, and may provide a mechanistic basis for using HY7712 as an alternative means in lessening chemotherapyinduced immunosuppression in cancer patients.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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