Organochlorine pesticide residues continue to remain as a major environmental threat worldwide. Lindane is an organochlorine pesticide widely used as an acaricide in medicine and agriculture. In the present study, a new lindane-degrading yeast strain, Pseudozyma VITJzN01, was identified as a copious producer of glycolipid biosurfactant. The glycolipid structure and type were elucidated by FTIR, NMR spectroscopy, and GC-MS analysis. The surface activity and stability of the glycolipid was analyzed. The glycolipids, characterized as mannosylerythritol lipids (MELs), exhibited excellent surface active properties and the surface tension of water was reduced to 29 mN/m. The glycolipid was stable over a wide range of pH, temperature, and salinity, showing a very low CMC of 25 mg/l. Bio-microemulsion of olive oil-in-water (O/W) was prepared using the purified biosurfactant without addition of any synthetic cosurfactants, for lindane solubilization and enhanced degradation assay in liquid and soil slurry. The O/W bio-microemulsions enhanced the solubility of lindane up to 40-folds. Degradation of lindane (700 mg/l) by VITJzN01 in liquid medium amended with bio-microemulsions was found to be enhanced by 36% in 2 days, compared with degradation in 12 days in the absence of bio-microemulsions. Lindane-spiked soil slurry incubated with bio-microemulsions also showed 20-40% enhanced degradation compared with the treatment with glycolipids or yeast alone. This is the first report on lindane degradation by Pseudozyma sp., and application of bio-microemulsions for enhanced lindane degradation. MEL-stabilized bio-microemulsions can serve as a potential tool for enhanced remediation of diverse lindane-contaminated environments.
Seo, Dong-Chul;Chung, Sun-Hwa;Lee, Joo-Young;Kim, Mee-Jeong;Chung, Jin-Ho
Toxicological Research
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v.11
no.2
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pp.295-302
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1995
Menadione-ghitathione conjugate (MEN-SG), a metabolite of menadione, is known to be a redoxcycler in rat hepatocyte subcellular fraction. Therefore, it was assumed that MEN-SG could exert cytotoxlclty to ral platelets, another target tissue of menadione. We first synthesized MEN-SG, the identity of which was verified by mass, $^1{H}$-NMR and UV-visible spectra. In addition, the stability of MEN-SG was investigated in biological assay system. MEN-SG was degraded in a time-dependent manner in DMSO which had been used as a vehicle and thus, tris-HCl buffer was used as a vehicle of MEN-SG despite the low solubility in it. Perchloric acid as well as platelets itself did not affect the stability of MEN-SG. Our next attempt was the evaluation of cytotoxicity of MEN-SG in rat platelets. MEN-SG did not induce cytotoxicity to rat platelets measured by two different methods, LDH release and turbidity changes. The extents of oxygen consumption by MEN-SG in intact platelets were significantly lower than those by menadione, though it had been observed that oxygen consumptions by menadione and MENSG were similar in subcellular fractioas of platelets. These results suggest that MEN-SG is not toxic to rat platelets despite its redox cycling capacity and glutathione conjugation reaction of menadione could be regarded as a detoxification process.
About 300 actinomycetes were isolated from two forest and one sea-shore soil and tested for inhibitory effects on mycelial growth of six plant pathogenic fungi Magnaporthe grisea, Alternaria mali, Colletotrichum gloeosporioides, Phytophthora capsici, Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum, and Rhizoctonia solani. Among 300 actinomycetes tested, only 16 actinomycetes showed the antifungal activity against the test fungi. Isolate NH 50 was selected for production and purification of antifungal antibiotic substances. Actinomycete isolate NH 50 displayed the broad antifungal spectra against 11 plant pathogenic fungi. To identify actinomycete isolate NH 50, cultural characteristics on various agar media, diaminopimelic acid type, and morphological characteristics by scanning electron microscopy were examined. As a result, actinomycete isolate NH 50 was classified as a rare actinomycete that had LL-DAP type and did not produce spores. After incubation of isolate NH 50 in yeast extract-malt extract-dextrose broth, antifungal compound NH-B1 that inhibited mycelial growth of some plant pathogenic fungi was purified from the methanol eluates of XAD-16 resins by a series of purification procedures, i.e., silica gel flash chromatography, C18 flash chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, silica gel medium pressure liquid chromatography (MPLC), C18 MPLC, and high pressure liquid chromatography (HPLC). UV spectrum and 1HNMR spectrum of antifungal compound NH-B1 dissolved in methanol were examined. The antibiotic NH-B1 showed the major peaks at 230 and 271.2nm. Based on the data of 1H-NMR spectrum, NH-B1 was confirmed to be an extremely complex polymer of sugars called polysaccharides. The antibiotic NH-B1 showed strong antifungal activity against Alternaria solani and Cercospora kikuchi, but weak activity against M. grisea.
Cho Jun-Young;Choi Gyung-Ja;Lee Seon-Woo;Jang Kyoung-Soo;Lim He-Kyoung;Lim Chi-Hwan;Lee Sun-Og;Cho Kwang-Yun;Kim Jin-Cheol
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.2
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pp.280-285
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2006
Methanol extract of the rhizomes of turmeric, Curcuma longa L., effectively controlled the development of red pepper anthracnose caused by Colletotrichum coccodes. In addition three antifungal substances were identified from the methanol extract of C. longa rhizomes as curcumin, demethoxycurcumin, and bisdemethoxycurcumin using mass and $^{1}H-NMR$ spectral analyses. The curcuminoids in a range $0.4-100\;{\mu}g/ml$ effectively inhibited the mycelial growth of three red pepper anthracnose pathogens, C. coccodes, C. gloeosporioides, and C. acutatum. The three curcuminoids inhibited mycelial growth of C. coccodes and C. gloeosporioides to an extent similar to the synthetic fungicide dithianon did, but the synthetic agent was a little more effective against C. acutatum. The curcuminoids also effectively inhibited spore germination of C. coccodes, and bisdemethoxycurcumin was the most active. Among the three curcuminoids, only demethoxycurcumin was effective in a greenhouse test in suppressing red pepper anthracnose caused by C. coccodes.
Skeletal muscle can be ultrastructurally damaged by eccentric exercise, and the damage causes metabolic disruption in muscle. This study aimed to determine changes in the metabolomic patterns in urine and metabolomic markers in muscle damage after eccentric exercise. Five men and 6 women aged 19~23 years performed 30 min of the bench step exercise at 70 steps per min at a determined step height of 110% of the lower leg length, and stepping frequency at 15 cycles per min. $^1H$ NMR spectral analysis was performed in urine collected from all participants before and after eccentric exercise-induced muscle damage conventionally determined using a visual analogue scale (VAS) and maximal voluntary contraction (MVC). Urinary metabolic profiles were built by multivariate analysis of principal component analysis (PCA) and orthogonal partial least square-discriminant analysis (OPLS-DA) using SIMCA-P. From the OPLS-DA, men and women were separated 2 hr after the eccentric exercise and the separated patterns were maintained or clarified until 96 hr after the eccentric exercise. Subsequently, urinary metabolic profiles showed distinct trajectory patterns between men and women. Finally, we found increased urinary metabolites (men: alanine, asparagine, citrate, creatine phosphate, ethanol, formate, glucose, glycine, histidine, and lactate; women: adenine) after the eccentric exercise. These results could contribute to understanding metabolic responses following eccentric exercise-induced muscle damage in humans.
Kim, A Hyeon;Nho, Jong Hyun;Woo, Kyeong Wan;Gang, Ju Eun;Sim, Mi Ok;Kim, Min Suk;Ham, Seong Ho;Cho, Hyun Woo
Korean Journal of Pharmacognosy
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v.49
no.1
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pp.47-54
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2018
Astilbe rubra (AR) is a perennial, belongs to the Saxifragaceae family, it contains tannin and triterpene. AR has been used in republic korea to improve toxication, fever, pain and convulsion. Recently, number of natural products have been analyzed for potential pharmacological activities including anti-cancer, anti-obesity and anti-diabetic medication. Consequently, we investigated the growth inhibition effect of Astilbe rubra water extract (WAC), ethanol extract (EAC) and bergenin on Hela cell (human adenocarcinoma cell). From whole plant of A. rubra, bergenin was isolated by column chromatography and its structures were identified by $^1H$, $^{13}C$ NMR and IT TOF-ESI MS. High extraction efficiency of bergenin was shown at 0.95% under 60 min reflux extraction with 50% MeOH. The MTS assay showed that EAC (ethanol extract) treatment increased cell death in a dose-dependent manner. Moreover, EAC treatment on Hela cell increased apoptotic cell death and caspase-3 activity. Results suggest that EAC has growth inhibition effect on Hela cells, but not WAC and bergenin. $500{\mu}g/mL$ EAC treatment inhibited Hela cell at $60.2{\pm}1.5%$.
Kim, Min Suk;Woo, Kyeong Wan;Lee, Ki Ho;Lee, Hyun Joo;Lee, Seon Yu;Kang, Byoung Man;Jeon, Byung Hun;Cho, Jung Hee;Cho, Hyun Woo
Korean Journal of Pharmacognosy
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v.47
no.3
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pp.232-236
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2016
In traditional Korean medicine, Osmunda japonica Thunb has been used as hemostasis and antipyretic treatment. The main compound "cinnamtannin B-1" was obtained by column chromatographic separation, and its structure was determined by spectroscopic methods, including $^1H$, $^{13}C$ NMR, and IT-TOF-ESI MS. Ash, moisture and extract content and acidinsoluble ash were monitored as identification test to establish the analytical methods. The optimum reflux extraction condition was 100% methanol extracted 30 min for 2 times. A quantitative analysis using HPLC method exhibited that the main compound at 24.7 min and its content was 0.96% in methanol extraction.
A sensitive and rapid high-performance liquid chromatographic-tandem mass spectrometric (HPLC/MS/MS) assay was developed for the determination of soyasaponins in soybean. Among soyasaponins, soyasaponin I was isolated and characterized from methanol extracts of soybean as analytical standards and the development of a new analytical procedure for quantification of its content in various cultivars. The structures of these compound was elucidated by $^1H$, $^{13}C$ NMR experiments and by mass spectrometric analysis. Aqueous ethanol extracts of soybean samples were injected on an Agilent XDB-C18 column ($4.6mm{\times}50mm$, $1.8{\mu}m$) with a mobile phase consisting of 10 mM ammonium acetate-acetonitrile, a flow rate of 0.3 mL/min and a total run time of 8 min. Detection was performed by mass spectrometer bin the multiple reaction monitoring (MRM) mode with negative electrospray ionization (ESI) m/z at 941 ${\rightarrow}$ 615 for soyasaponin I. In the 9 soybean samples, contents of soyasaponin I ranged from 205 to 726 mg/kg, and correlated negatively with seed size.
Gene therapy using low molecular weight water soluble chitosan (LMWSC) as polycationic polymer shows good biocompatibility, but low transfection efficiency. The mechanism of folic acid (FA) uptake in the cells to promote targeting and internalization could improve transfection rates. The objective of this study was to synthesize and characterize the WSCFA-DNA complex and evaluate their cytotoxicity, in vitro. In $^1H-NMR$ spectra, specific peaks appeared both of FA and LMWSC in $D_2O$. WSCFA nanoparticles have spherical shapes with particle size show below 110 nm. In the cell cytotoxicity test, the WSCFA-DNA complex showed high cell viability, in vitro. Gel electrophoresis showed condensed DNA within the carriers. hi vitro transfection efficiency was assayed by fluorescence spectroscopy WSCFA nanoparticles have less cytotoxicity, good DNA condensation and particle size around 110 nm, which makes them a promising candidate as a non-viral gene vector.
Injectable chitosan hydrogels have attracted great potential due to sustained-release property and safety. Here, palmityl-acylated glycol chitosan (Pal-GC) was used to generate physically cross-linked hydrogels by virtue of hydrophobic attraction of linear fatty carbons. Glycol chitosan was chemically modified with N-hydroxysuccinimide-activated palmitic acid in dimethylsulfoxide (DMSO) containing dimethylaminopyridine. Through a series of preparation steps of (i) dialysis with DMSO, (ii) addition of palmityl-acylated exendin-4 (Ex4-C16), and (iii) dialysis with water, Pal-GC was self-assembled to form physically cross-linked hydrogels entrapped with Ex4-C16. The Pal-GC derivative was analyzed by using 1H NMR, and the surface morphology of Pal-GC hydrogels formed was examined by scanning electron microscopy. Also, the hypoglycemic effect induced by Pal-GC hydrogels containing Ex4-C16 (250 nmol/kg) was evaluated in non-fasted type 2 diabetic db/db mice and compared with GC hydrogels containing native Ex4 at the same dose. Results showed that palmityl group was successfully conjugated with the amines of glycol chitosan, and that Pal-GC efficiently generated the hydrogels formation. Moreover, Pal-GC hydrogels containing Ex4-C16 was found to greatly prolong the hypoglycemia duration (~ 4 days). This was due to the dual-functions of the palmityl groups present in both GC and exendin-4 such as hydrophobic attraction and plasma albumin-binding. We consider this new type of self-assembled GC hydrogels loaded with Ex4-C16 would be a promising long-acting sustained-release system with anti-diabetic property.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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