This experiment was carried out to investigate the effects of the laying hens on the immune response against bovine serum albumin(BSA) in egg yolk. Total 45 laying hens were divided into three groups according to breeds (White Leghorn, ISA Brown, Native hen). They were fed the experimental diet for 12 weeks. Immune response were examind in egg yolk from three groups of hens injected with BSA. The results obtained from this work were summaried as follows : 1. The weight of egg yolk and the percentage of hen-day production in the ISA Brown hens are greater than those in the Native hens and the White Leghons. 2. IgY concentrations in eggs from hens immunized with BSA were not different among the breeds laying hens. 3. The anti-BSA antibody activities determined by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) in the egg yolk were similar between the White-Leghorn and ISA Brown hens, but Native hens tended to decrease in 20∼50 days respectively. Therefore, the weight of egg yolk and the percentage of hen-day production in the ISA Brown hens are greater than those in the Native hens and the White Leghons will be as important factors for an efficient production of IgY.
Salmonella typhimurium 항원에 의해서 면역된 계란 특이항체(IgY)를 분리 정제하여, Anti-S. typhimurium 항체의 온도에 대한 활성을 실험한 결과 6$0^{\circ}C$에서 30분 가열시 91.5%, $65^{\circ}C$에서 15분 가열 시 각각 73.2%의 활성도를 나타내었으며, 8$0^{\circ}C$에서 15분간 가열 시는 거의 활성이 없는 것으로 나타났다. pH에 대한 안정성은 pH 7부터 pH 4까지는 각각 98.7%의 활성도를 유지하다가 pH 3부터 급격히 감소하여, pH 2에서는 9.6%로 거의 활성도를 나타내지 않았다. 항균활성은 생균수 측정에서는 항균활성을 확인할 수 없었으나, 응집반응과 disc diffusion susceptibility test에서 측정한 anti-S, typhimurium 항체의 항균활성도는 미약하나 확연한 미생물 억제현상을 확인할 수 있었다. 이상의 결과에서, 본 실험에서 사용된 IgY는 항원에 대한 항체특성 및 항균효과 등을 고려해 볼 때 앞으로 식중독균 제거 및 예방 치료뿐만 아니라 식품산업 소재, 각종 질병예방을 위한 의약품 소재, 연구용 kit와 진단용 kit 및 축산분야 등 다양한 분야에서 응용될 수 있으리라 기대 된다
The present was undertaken to establish a model for the control of adipocytes differentiation by using antibody from egg yolk. The emulsion of membrane protein of 3T3L-1 cell membrane protein with the complete Freund's adjuvant was firstly immunized in layer. Second and third boosting were undertaken with two weeks intervals by injection of the emulsion of the same antigen with the incomplete Freund's adjuvant. After 4 week of the first immunization, eggs were collected and antibody (IgY) was purified from egg yolk. The purity of IgY was 60-98% determined by single radial immunodiffusion (SRID) methods. Titer value of the antibody showed high reactiviy for the preadipocytes membrane protein measured by ELISA. When the IgY was added in the test media containing either 2.5% porcine serum or 10% FBS(control), the differentiation of 3T3L-1 cells and Glycerol-3-phosphate dehydrogenase(GPDH) activities was significantly decreased compared to the control cells(p〈0.05). When mice were subcutaneously injected with IgY raised against membrane protein of 3T3L-1 cells for 3 weeks, adipose tissue mass around ovary was tended to be decreased in female mice compared to those of control mice. It is suggested that a potential for manipulating of lipid accumulation through decrease in 3T3L-1 cell differentiation and fat accumulation in female mice by IgY treatment.
In a previous study, we developed a new food additive as an egg yolk antibody (IgY) against carbohydrate digestion enzymer for the regulation of blood glucose level and weight control. The IgY delayed and decreased the increment if blood glucose level after administration of sucrose in human being by 30% in 20∼30 min. We also developed a lipase inhibitor as a water extract of two kinds of herb, Platycodon grandiflorum and Solanum Melongena, Twenty three volunteers were subjected to the intake of the egg yolk IgY Plus the herbal extracts for 50 days. In average, the treated subjects appeared to lose 1.96 kg of body weight and 3.4 kg of body fat mass during the treated period. Furthermore, Panniculus adiposus and breech size were significantly decreased during the experimental period. Above results suggested that the administration of the dietary additives composed of egg yolk IgY and natural herbal extract improve the obesity by the decrement of body weight and body fat mass.
본 연구는 식중독은 물론, 아토피성 피부염의 원인물질로 알려져 있는 포도상구균 장내독소 B(Staphylococcal enterotoxin B; SEB)에 대한 특이 난황항체를 개발하고자 실험을 실시하였다. 우선, SEB 유전자를 클로닝한 다음, 대장균 발현시스템을 이용하여 약 30 kDa 정도의 재조합 SEB 단백질을 생산하였다. 재조합 SEB 단백질을 산란계에 2주 간격으로 3회 면역접종을 실시하고, 혈청 및 난황 내 항체가를 측정한 결과, 면역 후 4주경에 항체가가 최고치에 달하였으며, 산란계로부터 획득한 난황항체를 이용한 Western blot 결과, 재조합 SEB 단백질은 물론, 상용화 SEB 단백질과도 특이적으로 반응한다는 것을 규명하였다. 결론적으로, 식중독과 아토피성 피부염 등의 원인물질로 알려진 SEB에 특이적인 난황항체를 생산에 성공하였으며, 이러한 특이적인 난황항체는 식중독 및 아토피성 피부염의 예방 및 치료에 활용 가능할 것으로 사료된다.
Immunoglobulin Y (IgY) obtained from chicken as the immunization host brings several advantages to antibody production, such as improved yield, lower cost, longer stability and higher specificity than mammalian immunoglobulin. In the present study, we attempted to produce IgY against a sialic acid-binding lectin, Maackia fauriei agglutinin (MFA), from egg yolk of white Leghorn hens. For the isolation of IgY from egg yolk, we applied a water dilution method. The weekly yield of IgY was determined by enzyme-linked immunosorbent assay, with a final yield of anti-MFA IgY from total IgY of approximately $1\%$. The yielded IgY were used to prepare IgY-affinity column conjugated with CNBr-activated Sepharose 4B, which resulted in the lectin being successfully purified in a single step from Maackia fauriei. This purified lectin exhibited the same hemagglutination activity as lectin purified using conventional purification methods.
본 시험은 오리 사료 내 난황항체제제 첨가 시 생산성, 혈액 특성, 장내 미생물 및 면역글로불린에 미치는 영향을 조사하기 위하여 수행하였다. 1일령 오리(Cherry valley) 총 300수를 공시하여 5처리 3반복, 반복당 20수씩 공시하여 6주간 시험을 실시하였다. 처리구는 항생제를 첨가하지 않은 처리구(NC, negative control), 항생제 처리구(PC, positive control), 난황항체제제 0.1% 첨가구(T1), 난황항체제제 0.5% 첨가구(T2) 그리고 난황항체제제 1.0% 첨가구(T3)로 나누어 실험을 실시하였다. 종료 시 체중은 난황항체제제 첨가구와 항생제첨가구가무항생제처리구보다 유의적으로 높았고(P<0.05), 증체량 역시 난황항체제제 첨가구와 항생제 첨가구가 무항생제 처리구에 비해 높게 나타났다(P<0.05). 하지만 전 기간에 대한 사료 섭취량과 사료 요구율은 처리구간에 통계적인 유의차가 나타나지 않았다. 6주간 사양 T실험 후 혈액 생화학 및 혈구 분석 결과, 난황항체제제 0.1, 1.0% 첨가구에서는 total cholesterol 함량이 무항생제 처리구에 비해 다소 감소하는 경향을 보였으나, 통계적인 유의차는 없었다. 또한 AST와 ALT 함량 역시 처리구 간에 유의적인 차이를 보이지 않았다. 오리의 맹장 내 유산균 수는 난황항체제제 0.1와 0.5% 급여 시 다른 처리구에 비해 가장 높았으며(P<0.05), 대장균 수는 난황항체제제 수준이 증가함에 따라 감소하는 경향을 보였으나, 통계적 유의차는 없었다. 또한 혈청 내 면역글로불린 함량에도 처리구간에 유의적인 차이는 나타나지 않았다. 결과적으로 오리 사료 내 난황항체첨가 시 오리의 생산성을 개선시키고, 장내 미생물 균총에 효과적인 것으로 나타났으나, 아직까지 국내에서는 난황항체제제 첨가에 따른 사양 시험과 관련된 연구가 부족하다는 점을 감안할 때 향후 이에 대한 많은 연구가 필요할 것으로 사료된다.
난황에 포함된 IgY는 포유동물에 있는 바이러스나 항원에 반응하는 항체와 같은 역할을 한다. IgY 분리를 위해 난황을 전처리한 후 3-zone SMB를 이용하여 지질단백질들로 부터 분리하는 전산모사연구를 수행하였다. 회분식 크로마토그래피와 pulse input method(PIM) 실험을 이용하여 전산모사 매개변수와 흡착 등온식을 얻었다. Aspen simulator를 이용하여 전산모사를 수행하여 IgY를 분리할 수 있는 SMB 운전조건을 다음과 같이 제시할 수 있었다. 삼각형 이론의 $m_2$와 $m_3$ 값은 각각 0.18, 1.0이고 스위칭 타임은 419 초이었다. 전산모사 결과 raffinate의 IgY 순도가 98.39%이고 두번째 싸이클에서 순도가 정상상태에 도달하였다.
닭을 이용한 egg yolk immunoglobulin (IgY)의 생산과 이용 가능성을 조사하기 위하여 pepper mild mottle virus (PMMoV)로 닭을 면역하였다. Ring-test로 달걀의 난황에서 분리 정제한 IgY의 역가를 조사한 결과 IgY의 최고 역가는 1:2,560이었고 달걀 l 개에서 대략 $60{\sim}80 mg$의 IgY를 얻을 수 있었다. 최고역가를 갖는 IgY를 이용하여 Gelrite gel 이중확산법, 효소면역항체법 (ELISA), 조직자국면역반응법을 실시한 결과 간접면역효소항체법의 PMMoV 검출 감도는 1 ng/ml 이었고, 검정법의 바이러스 검출감도와 특이도는 IgG와 비슷한 경향을 보였다. 그러므로 한 마리의 닭으로부터 대량으로 생산 가능한 IgY는 식물바이러스에 대한 항체생산과 혈청학적 검정에 유용할 것으로 생각한다.
Preventive and therapeutic effects of egg yolk antibody, immunoglobulin Y (IgY), against canine parvovirus (CPV) was evaluated in 25 pups orally challenged with CPV-2a. Oral administration of IgY using powder, paste and coated paste delivery systems was compared. Each type of IgY was administered orally for 17 days from 3 days before challenge. The group of pups administered coated IgY showed mild symptoms such as a moderate decrease in total white blood cell count, no depression, vomiting and diarrhea when compared with other groups. The overall clinical score of the group of pups administered coated IgY was significantly lower than that of the challenge control group. However, mortality did not differ among groups because not all pups received symptomatic treatment. These results implied that oral treatment of coated IgY could improve therapeutic effects against CPV challenge if pups received symptomatic treatment.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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