• 한국초지조사료학회지
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• 제41권3호
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• pp.176-182
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• 2021

Ensiling is the most preferred technology to preserve the silage quality with high nutrients by the presence of lactic acid bacteria. In this study, lactic acid bacteria RJ1 and S22 were used to make the silages from different leguminous plants such as alfalfa, hairy vetch and red clover. Experimental groups were divided into control and LAB inoculated groups. LAB inoculated group; all legumes treated with a mixture of RJ1 and S22 and made an anaerobic condition for 45d. Without the addition of LAB considered the control group. The results showed that the lactic acid content was higher in all silages in response to LAB treatment and acetic acid content was slightly increased except red clover by LAB compared to control silages. A poor silage quality marker butyric acid was reduced all legume silages in response to LAB inoculation than control silages. The organic acid is closely associated with microbial population experimental silages. We noted that higher LAB and lower yeast were found in the silage in response to LAB treatment. The contents of crude protein (CP), acid detergent fiber (ADF), neutral detergent fiber (NDF), and total digestible nutrient (TDN) were not altered significantly between control and LAB treated silages. Overall data suggested that the inclusion of additional LAB potentially enhance the silage quality and preserved the nutrients for long period.

• 대한화장품학회:학술대회논문집
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• 대한화장품학회 2003년도 IFSCC Conference Proceeding Book I
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• pp.700-718
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• 2003

Fructan, a polysaccharide existing in plants or produced by microorganisms, is a sugar polymer of fructose with $\beta$-2,6 linkages. In this study, we investigated some cosmeceutical properties of Fructan such as moisturizing effect, cell proliferation effect, anti-inflammation effect and cell cytotoxicity. Zymomonas mobilis, a microorganism producing Fructan, was cultured in a medium containing 10％ sucrose and 2％ yeast extract as main components for 24 hours at 37$^{\circ}C$ and pH 7. Fructan was obtained by precipitation from the cultured medium by adding alcohol (alcohol ratio of 1:3) after removing the enzyme by centrifuging. Fructan exhibited almost same moisturizing effect as hyaluronic acid and cell proliferation effect on human fibroblast and keratinocyte as well. Moreover, on cell proliferation test on bio-artificial skin constructed by 3-dimensional(3-D) culture after inducing primary skin inflammation with 0.5％ sodium lauryl sulfate (SLS), the 3-D artificial skin treated with 0.01 mg/ml, 0.05mg/ml of Fructan exhibited higher cell proliferation than the 3-D artificial skin treated with SLS only. On anti-inflammation test on 3-D artificial skin evaluated by measuring secreted quantity of interleukin-1$\alpha$ (IL-1$\alpha$) which is a pre-inflammatory mediator induced by SLS, the quantity of IL-1$\alpha$on the 3-D artificial skin treated with 0.01 mg/ml, 0.05mg/ml of Fructan was less than the one on the 3-D artificial skin treated with SLS only. As a result of these studies, Fructan has anti-inflammation effect against inflammatory reaction by a skin irritant as well as cell proliferation effect in bio-artificial skin. Fructan was also evaluated as a safe material without any toxicity in safety tests using fibroblasts and animals.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제50권4호
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• pp.488-500
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• 2022

Most fungal infections by opportunistic yeast pathogens such as Candida spp. are the major causes of morbidity and mortality in patients with lowered immune. Previous studies have reported that some strains of Candida secret secondary metabolites play an important role in the decreasing of immunity in the infected patient. In this study, 110 Candida spp. were isolated from different clinical specimens from Baghdad hospitals. Candida isolates were identified by conventional methods, they were processed for Candida speciation on CHROMagar. The results of identification were confirmed by internal transcribed spacer (ITS) sequencing. Phylogenetic trees were analyzed with reference strains deposited in GenBank. Antifungal susceptibility testing was evaluated by the disc diffusion method and performed as recommended by the Clinical and Laboratory Standard Institute (CLSI) M44-A document. Candida isolates investigated produce secondary metabolites gliotoxin with HPLC technique and quantification. Out of 110 Candida isolates, C. albicans (66.36%) was the most frequent isolate, followed by the isolates of C. tropicalis (10.9%) and C. glabrata (6.36%) respectively. Concerning the antifungal susceptibility test, Candida isolates showed a high level of susceptibility to Miconazole (70.9%), Itraconazole (68.2%), and Nystatine (64.5%). The ability of obtained isolates of Candida spp. to produce gliotoxin on RPMI medium was investigated, only 28 isolates had the ability to secret this toxin in culture filtrates. The highest concentrations were detected in C. albicans (1.048 ㎍/ml). Gliotoxin productivity of other Candida species was significantly lower. The retention time for gliotoxin was approximately 5.08 min.

• 한국버섯학회지
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• 제21권4호
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• pp.209-214
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• 2023

본 연구에서 Pleurotus ostreatus No.42는 이전에 보고된 새로운 유형의 회전식 통풍관 생물반응기(RTB)를 사용하여 포도당-펩톤-효모-밀기울(GPYW) 배지에서 배양하였다. 이 배지에서 7일 동안 펠렛형 균사체 배양 후, 리그닌 분해효소인 다목적 과산화 효소(VP)를 분리 및 정제하였다. 다목적 과산화 효소의 정제 과정은 한외여과, DEAE-Sepharose CL-6B 컬럼, Mono Q 컬럼을 순차적으로 적용하여 정제하였다. 그 결과, SDS-PAGE상에서 분자량(MW)은 36.4 KDa, 등전점 (IEF)은 3.65로 나타났으며, 아미노산 조성은 VTCATGQTT로 확인되었다. 정제된 다목적 과산화 효소는 Mn 이온을 산화시킬 뿐만 아니라 비페놀성 화합물인 베라트릴 알코올을 분해하는 특성을 갖는 것으로 나타났다.

• Journal of Animal Science and Technology
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• 제47권6호
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• pp.975-984
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• 2005

본 연구는 유기태 셀레늄 급여가 한우의 생산성에 미치는 영향을 연구하기 위하여 유기태 셀레늄 혼합제의 첨가량을 달리하여 비육말기 거세한우에 급여하였을 때 나타나는 성장, 육질, 체내 셀레늄 분포 및 경제성을 분석 평가하고자 실시하였다. 총 45두의 비육후기 거세한우를 유기태 셀레늄 혼합제 급여 수준에 따라 15 두씩 3개의 시험구에 임의배치 하고 사료 건물 중 셀레늄 함량을 0.5ppm 수준이 되도록 유기셀레늄 혼합제를 급여한 시험구(0.5ppm OSM구), 1.0ppm 수준으로 처리한 시험구(1.0ppm OSM구) 및 대조구(혼합제 무첨가 관행사육구)로 나누어 4개월간 사양시험을 수행한 결과는 다음과 같다. 3개의 시험구간 총 증체량, 일일 증체량 및 사료 섭취량의 통계적 유의성은 없었다(p>0.05). 도체중량, 배최장근면적, 등지방두께, 육량지수, 육색지수, 지방색, 연도, 성숙도 등에서도 시험구간 유의적 차이가 인정되지 않았다(p>0.05). 그러나 상대적으로 유기태 셀레늄과 함께 미생물 제제가 많이 공급된 1.0ppm OSM 구에서 사료효율(사료요구량과 증체당 TDN), 도체등급 및 육질등급이 다른 시험구보다 좋은 성적을 나타냈다. 각 조직의 셀레늄은 유기태 셀레늄 급여에 의해 함량이 증가되었는데 0.5ppm OSM 구에서는 간과 우둔 그리고 1.0ppm OSM 구에서는 신장, 간, 등심 및 우둔의 셀레늄함량이 대조구보다 높았다(p<0.05). 조직 내 셀레늄 함량은 전반적으로 1.0ppm OSM 구에서 가장 높게 나타났으며, 각 조직간 셀레늄 함량은 신장, 간, 등심 그리고 우둔 순으로 높았다. 사양시험 종료시 도체 경락가를 기초로 경제성을 평가하였을 때 1.0ppm OSM 구가 대조구에 비하여 수익성이 5.5% 정도 높았다. 결론적으로, 유기셀레늄 혼합제의 급여와 급여수준은 사료섭취량, 증체량 그리고 도체특성에 큰 영향을 주지 않았지만 각 조직의 셀레늄 함량을 증가시켰다. 또한 유기셀레늄 혼합제를 1.0ppm 수준으로 사용하였을 때 육우 판매수입이 증가하였다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제42권7호
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• pp.1125-1132
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• 2013

종균용 김치를 제조를 하기 위해서는 김치 공장에서 저가로 종균이 대량배양 되어야 한다. 그러나 현재의 유산균배지는 종균 생산용으로 사용하기에는 비용이 많이 든다. 이를 해결하기 위해서는 새로운 배지를 개발해야 하는데 새로운 배지를 개발하기 위한 기본적인 요소에는 배추 추출액, 탄소원, 질소원, 무기염류가 있다. 선정된 최적배지 조성은 배추 추출액 잎 30%, maltose 2%, yeast extract 0.25%, $2{\times}$ salt stock(2% sodium acetate trihydrate, 0.8% disodium hydrogen phosphate, 0.8% sodium citrate, 0.8% ammonium sulfate, 0.04% magnesium sulfate, 0.02% manganese sulfate)으로 나타났다. 그리고 새롭게 개발된 배지의 이름은 MFL로 명명하였다. Leuconostoc(Leuc.) citreum GR1을 $30^{\circ}C$에서 24시간 배양하면 MRS 배지에서는 $3.41{\times}10^9$ CFU/mL, MFL 배지에서는 $7.49{\times}10^9$ CFU/mL의 생균수로 MFL 배지에서 배양하면 MRS 배지에서 배양했을 때보다 2.2배 더 높은 성장을 보였다. 또한 최적화 배지의 scale-up을 위해 5 L 발효조를 이용하여 2 L의 working volume으로 Leuc. citreum GR1을 배양하였다. 교반속도는 50 rpm에서 생균수 $8.60{\times}10^9$ CFU/mL를 얻었다. 발효조의 pH 조절은 pH-stat mode로 하였으며, 균체 성장의 최적 pH는 수산화나트륨 수용액을 이용한 pH 6.8이었고, 이 조건으로 20시간 배양 후 $11.42{\times}10^9(1.14{\times}10^{10})$ CFU/mL의 균체를 얻을 수 있었다. 이는 MRS 배지로 사용하여 얻은 생균수의 3.34배에 해당하는 높은 값으로, 본 연구에서 개발된 MFL 배지는 김치 종균용 Leuc. citreum GR1 배양을 위한 배지로 배지 단가 절감, 높은 균체 수율 등 충분한 경제적 장점을 기대할 수 있다.

• KSBB Journal
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• 제22권3호
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• pp.162-167
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• 2007

암모니아 가스는 환경오염 중 가장 피해가 큰 물질로 가축 뿐만 아니라 사람에게도 많은 피해를 준다. 본 연구의 목적은 Bacillus subtilis IB101을 이용하여 암모니아 가스의 제거효율이 좋은 조건과 최적으로 배양할 수 있는 생산배지의 최적화에 대하여 알아보는 것이다. 암모니아 제거 효과가 우수한 균주인 B. subtilis IB101의 암모니아 가스 제거 효능이 좋은 성장단계를 알아보았으며, 기본배지의 구성성분 중 $(NH_4)_2SO_4$의 농도에 변화를 주어 각각 다른 $(NH_4)_2SO_4$ 농도의 배지에서 배양된 cell이 암모니아 가스 제거에 미치는 영향을 알아보았다. 그리고 온도 및 pH에 따른 암모니아 가스 제거 효능의 최적조건을 알아보았다. B. subtilis IB101의 대량 배양을 위한 배지 조성을 얻기 위하여 Placket-Burman design과 one factor at a time method를 이용하여 기본배지의 구성성분의 영향에 대하여 살펴보고 최적의 배지조성을 알아보았다. Exponential phase 단계인 B. subtilis IB101을 접종한 것이 stationary phase 단계인 B. subtilis IB101을 접종한 것보다 암모니아 가스 제거 효율이 약 20% 정도 우수하였다. 30$^{\circ}C$, pH 4의 배양조건에서 암모니아 가스 제거 효율이 가장 높았다. 기본 배지 구성성분 중 $(NH_4)_2SO_4$의 농도의 변화에 따른 암모니아 가스 제거 효율에는 영향이 없었다. 최적화된 배지의 구성 성분은 yeast extract 10 g/l, soluble starch 2.5 g/1, $MgSO_4$ 6 g/l, $CaCl_2$ 1.55 g/1, $(NH_4)_2SO_4$ 5 g/1, $KH_2PO_4$ 0.75 g/l, 대두분 8 g/l이었다.

• 한국식품저장유통학회지
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• 제12권4호
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• pp.379-386
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• 2005

천연배지에서 배양한 소나무잔나비버섯(Fomitopsis pinicola)균사체와 균체외 유리아미노산 및 다당류함량을 조사하였다. 배지로는 YM(yeast-malt broth), CP(citrus peel-broth) 및 GT 배지(green tea-broth)를 사용하였으며 $30^{\circ}C$, 150rpm에서 10일간 배양하였다. 균사체의 수율은 GT, CP 및 YM에서 각각 42.3, 34.2 및 $9.89\%$였으며, 균사체를 제거한 배양액의 탁도는 GT 0.14, CP 0.16, YM 0.22이었다. 균사체의 총 유리아미노산 함량은 YM 928.19 $mg\%$, CP 1060.53 $mg\%$, GT 764.83 $mg\%$였으며, 주 아미노산은 YM은 lysine, CP와 GT는 glutamic acid였다. 균체외 총 유리아미노산 함량은 YM 659.75 $mg\%$, CP 954.55 $mg\%$, GT 838.69 $mg\%$였으며, 주 아미노산은 YM, CP 및 GT 모두 glutamic acid였다. 균사체와 균체외 total 아미노산 유도체의 함량은 CP>GT>YM 순이었다. 균사체의 주 아미노산 유도체는 YM은 cystathionine, CP와 GT는 hydroxy proline이였다. YM, CP 및 GT의 균체외 주 아미노산 유도체는 hydroxy proline이였다. 균사체와 균체외 AIS 함량은 CP>GT>YM순이었다. 산가용성 다당류 함량은 GT($0.69\%$)>YM($0.39\%$)>CP($0.18\%$)순, 균체외 산가용성 다당류 함량은 GT($0.87\%$)>CP($0.69\%$)>YM($0.09\%$)순이었다. 균사체의 알칼리 가용성 다당류 함량은 CP($5.21\%$)>GT($5.18\%$)>YM($4.56\%$) 순, 균체외는 GT($6.79\%$)>YM($3.57\%$)>CP($3.01\%$)순으로, 균사체 함유 다당류는 산가용성($0.18{\sim}0.69\%$)에 비하여 알칼리가용성($4.56{\sim}5.21\%$)의 함량이 현저하게 높았다. CP 배지에서 배양한 균사체의 알칼리가용성 다당류를 겔 여과한 결과 hexose와 uronic acid로 구성된 분자량 500,000 dalton의 다당류와 분자량 10,000 dalton이하의 단백질이 결합한 단백 다당체로 추정되었다.

• KSBB Journal
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• 제22권5호
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• pp.305-312
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• 2007

가능한 한 대량의 균주를 테스트하여 고생산성을 지닌 균주를 신속히 선별하기 위해서는 소규모 액상배양 방법의 확립이 필수적인데, 강력한 지질저하제인 monacolin-K의 생산균주인 균사형성 Monascus의 경우 포자나 균사체의 형성이 활발하지 않은 배양 생리적 특성으로 인해 소규모 (miniature) 액상배양이 매우 어려운 문제점이 있다. 본 연구에서는 monacolin-K 고생산성 균주개량의 효율성을 큰 폭으로 증가시키고자, 기존의 플라스크 액상배양 방법을 소규모화시킨 tube 배양 방법을 개발함으로써 단기간에 보다 많은 양의 균주를 테스트하고자 하였다. 이차대사산물인 monacolin-K의 생합성은 각각의 배양단계에서의 생산균주의 배양형태가 중요한데, 특별히 최종 생산배양에서 생산성 증가에 심각한 영향을 미치는 배양형태인 직경 1 mm 이하의 pellet 모양을 유도하기 위해서는 성장배양 시에 반드시 고농도의 균사모양이 유도되어야 하는 것으로 관찰되었다. 50 ml tube (7 ml의 조업부피)를 이용하는 소규모 액상 성장배양의 경우 solid seed 배양 단계에서의 포자형성배지의 조성을 통계적 방법을 통해 최적화하고, 또한 성장배지 성분에 brown rice 가루 20 g/L를 첨가할 때, 원하는 균사모양의 배양형태가 유도됨을 확인할 수 있었다. 한편 7 ml의 조업부피의 tube를 이용한 소규모 성장배양 방법의 개발로 인해, 기존의 flask 배양을 이용할 때보다 단기간에 훨씬 많은 변이주의 생산성을 조사하게 되어 균주개량 속도를 큰 폭으로 향상시킬 수는 있었으나, 선별된 개별 균주의 monacolin-K의 생산성은 오히려 전체적으로 감소하는 경향을 보여 주었다. 이러한 결과는 소규모 배양방법을 확립하기 위해 새로이 개발한 포자형성배지와 성장배지의 조성변화로 인해 기존에 확립된 생산배지에서는 생산균주의 monacolin-K 생합성 능력이 최대로 발휘되지 않았기 때문에 발생한 것으로 판단되었다. 따라서 본 연구를 통해 확립된 소규모 성장배양에 적합한 최적의 생산배지 조성을 확립하고자 통계적 방법인 Plackett-Burman design을 적용하여 monacolin-K 생산성 향상에 영향을 주는 glycerol, malt extract, yeast extract, brown rice의 4가지 성분들을 최종 선별하였고, 또한 이들의 최적농도 결정을 위해 반응표면분석 실험을 수행하였다. 이와 같이 결정된 최적 생산배지를 사용하여 생산배양을 수행한 결과, monacolin-K의 생산성이 2배 이상 증가하고, 배양 형태 또한 용존산소와 영양분의 전달이 매우 용이한 직경 1mm 이하의 pellet 모양을 유지함을 확인할 수 있었다.

• 한국식품과학회지
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• 제31권2호
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• pp.465-474
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• 1999

식용 단백질 생산 균주인 S. cerevisiae ATCC 7754에 돌연변이를 유도하고, 핵산 함량이 높으면서도 성장 속도가 빠른 고핵산 축적 균주를 선별하였고 배양 특성을 조사하였다. Saccharomyces cerevisiae ATCC 7754는 pH $3{\sim}4$에서 최대 활성을 보이는 산성 RNase와 pH 9에서 최대활성을 보이는 알칼리성 RNase를 가지고 있는 것이 확인되었으며 산성 RNase의 활성이 훨씬 높았다. Saccharomyces cerevisiae ATCC 7754의 RNase는 금속염에 의하여 영향을 받는데 산성 RNase의 경우는 $0.08\;M\;HgCl_2$에 의하여 활성이 크게 저하되었고, 알칼리성 RNase경우는 2.0 M NaCl이나 KCl에 의하여 활성이 크게 저하되었다. 반면 알칼리성 RNase는 $0.05\;M\;CaCl_2$, $0.02\;M\;ZnSO_4$, $0.008\;M\;HgCl_{2}$에 의하여 활성이 증가되었다. Ethylmethane sulfonate, 자외선, 감마선을 이용한 돌연변이를 통하여 핵산 축적능이 뛰어난 KCl 감수성 균주를 선발하고 YPD 배지에서 배양하면서 건조 균체량과 리보핵산 함량을 측정하여 건조 균체 단위 무게당 리보핵산의 함량이 가장 높은 B24 균주를 고핵산 변이주로 선택하였다. B24 균주는 모균주와 비슷한 증식 특성을 나타내었는데, pH $4.5{\sim}5.5$에서 성장이 잘 되었고 리보핵산 축적은 pH 4.5와 5.0에서 가장 잘 일어났으며, 또한 탄소원으로 당밀을 사용한 경우가 세포 내에 리보핵산이 가장 많이 축적되었고 균의 생육도 빠름을 알 수 있었다. 발효기를 이용한 유가식 배양에서는 배양 초기에 균체내 리보핵산 함량이 급격히 증가하고 이후 정지기까지 서서히 감소하여 최종적으로 리보핵산 함량이 균체 건물량의 19.8%(w/w)로 모균주의 16.1% (w/w)에 비해 우수하였으며, 이때 최대 69.6 g/L(건물량)의 균체를 수득하였다.