Kyoung-Hui, Kong;Choon-Sup, Kim;Kim, Do-Hyung;Wi-Sik, Kim
Journal of fish pathology
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v.35
no.2
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pp.241-246
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2022
White spot syndrome virus (WSSV) is a prevalent and virulent pathogen affecting cultured whiteleg shrimp (Litopenaeus vannamei) in Korea. In this study, seven monoclonal antibodies (mAbs) (10A12, 16C3, 17G4, 21G5, 22C4, 23B6 and 24G6) were produced by using purified WSSV. The reactivity of these mAbs was analysed by Western blot (WB), indirect immunofluorescence (IIF), and lateral flow immunochromatographic assay (LFIA). WB analysis demonstrated that three mAbs (17G4, 22C4, and 23B6) reacted specifically to VP28 with an approximate molecular weight of 24 kDa, mAb 16C3 reacted with approximately 17 kDa. IIF analysis demonstrated specific fluorescence signals on gill tissues of WSSV-infected shrimp, with five mAbs (10A12, 16C3, 22C4, 23B6, and 24G6), pleopods from WSSV-infected shrimp were used for LFIA, where, two mAbs (21G5 and 22C4) exhibited positive reaction. In conclusion, it can be inferred that the mAbs usage and specificity depends on the nature of assay used for diagnosis.
Fourteen melandrin derivatives(I-XIV) were investigated on analgesic, anti-inflammatory and antiviral activities . Compound I [N-(p-hydroxybenzoyl)-5-hydroxyanthranilic acid methvl ester], Xll [N-(2-phenoxypropionyl)-5-hydroxy anthranilic acid propyl ester and XIV [N-(2-phenoxypropionyl)-5-hydroxyanthranilic acid exhibited analgesic activity in tail pressure and Randall-Selitto method. But no anti-inflammatory activity was shown. Compound I exhibited weak antiviral activity on Herpes simplex virus type I F strain by virus-induced cytopathic effect(CPE) assay and it's selectivity index(Sl) was 8.17.
Dengue fever (DF) is an acute febrile illness caused by dengue viruses in the family Flaviviridae, genus Flavivirus. DF has so far posed any problem in Korea, however it has been recently believed to be associated with oversea's traveler infected with dengue virus. Antibody titers of sera from DF patients against dengue virus were measured by indirect immunofluorescence assay (IFA) and plaque reduction neutralization test (PRNT), including the haematologic test. Three of patients with DF showed highly fluorescent and neutralizing antibody titers by IFA and PRNT assay. Two of them showed higher, remarkably. Meanwhile, one of them was tested and resulted in severe tirombocytopenia, elevated serum levels of aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT) activities as well as mild leucopenia, increased monocytes and basophils and depressed lymphocytes in haematological differential count.
Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and polymerase chain reaction (PCR), widely used for the detection of plant viruses, are not easily performed, resulting in a demand for an innovative and more efficient diagnostic method. This paper summarizes the characteristics and research trends of biosensors focusing on the physicochemical properties of both interface elements and bioconjugates. In particular, the topological and photophysical properties of quantum dots (QDs) are discussed, along with QD-based biosensors and their practical applications. The QD-based Fluorescence Resonance Energy Transfer (FRET) genosensor, most widely used in the biomolecule detection fields, and QD-based nanosensor for Rev-RRE interaction assay are presented as examples. In recent years, QD-based biosensors have emerged as a new class of sensor and are expected to open opportunities in plant virus detection, but as yet there have been very few practical applications (Table 3). In this article, the details of those cases and their significance for the future of plant virus detection will be discussed.
This study established a new polymerase spiral reaction (PSR) that combines with reverse transcription reactions for HCV detection targeting 5'UTR gene. To avoid cross-contamination of aerosols, an isothermal amplification tube (IAT), as a separate containment control, was used to judge the result. After optimizing the RT-PSR reaction system, its effectiveness and specificity were tested against 15 different virus strains which included 8 that were HCV positive and 7 as non-HCV controls. The results showed that the RT-PSR assay effectively detected all 8 HCV strains, and no false positives were found among the 7 non-HCV strains. The detection limit of our RT-PSR assay is comparable to the real-time RT-PCR, but is more sensitive than the RT-LAMP. The established RT-PSR assay was further evaluated for detection of HCV in clinical blood samples, and the resulting 80.25% detection rate demonstrated better or similar effectiveness compared to the RT-LAMP (79.63%) and real-time RT-PCR (80.25%). Overall, the results showed that the RT-PSR assay offers high specificity and sensitivity for HCV detection with great potential for screening HCV in clinical blood samples.
The value of the cell enzyme-linked immunosorbent assay as a possible replacement for the indirect immunofluorescence antibody test for the estimation of antibodies against BD virus was assessed in four animal models. The serum antibody response was measured by both assay systems;the variability of both tests was less than one diluent step, and correlation of the two tests was assessed using regression analysis. The study showed that the all four animal models gave satisfactory correlation of CELISA and IFA. There, CELISA is acceptable for use in mouse, rabbit, chicken and rat models.
Kim, Na-Kyeong;Lee, Hyo-Jeong;Ryu, Tae-Ho;Cho, In-Sook;Ju, Ho-Jong;Jeong, Rae-Dong
Research in Plant Disease
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v.27
no.2
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pp.79-83
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2021
The aim of the present study was to develop a sensitive and specific detection method for the rapid detection of apple scar skin viroid (ASSVd) in apple leaves. The resulting reverse transcription recombinase polymerase amplification (RT-RPA) assay can be completed in 10 min at 42℃, is 10 times more sensitive than conventional reverse transcription polymerase chain reaction, and can specifically amplify ASSVd without any cross-reactivity with other common apple viruses, including apple stem grooving virus, apple stem pitting virus, and apple chlorotic leaf spot virus. The reliability of the RT-RPA assay was assessed, and the findings suggested that it can be successfully utilized to detect ASSVd in field-collected samples. The RT-RPA assay developed in the present study provides a potentially valuable means for improving the detection of ASSVd in viroid-free certification programs, especially in resource-limited conditions.
A method for the rapid detection and quantification of Newcastle disease virus (NDV) produced in an animal cell culture-based production system was developed to enhance the speed of the NDV vaccine manufacturing process. A SYBR Green I-based real-time RT-PCR was designed with a conventional, inexpensive RT-PCR kit targeting the F gene of the NDV LaSota strain. The method developed in this study was validated for specificity, accuracy, precision, linearity, limit of detection (LOD), limit of quantification (LOQ), and robustness. The validation results satisfied the predetermined acceptance criteria. The validated method was used to quantify virus samples produced in an animal cell culture-based production system. The method was able to quantify the NDV samples from mid- or late-production phases, but not effective on samples from the early-production phase. For comparison with other quantifiable methods, immunoblotting, plaque assay, and tissue culture infectious dose 50 ($TCID_{50}$) assay were also performed with the NDV samples. The results demonstrated that the real-time RT-PCR method is suitable for the rapid quantification of virus particles produced in an animal cell-culture-based production system irrespective of viral infectivity.
In order to find less toxic antiviral agents from basidiomycetes, EA, the water soluble substance, was prepared from the carpophores of Elfvingia applanata (Pers.) Karst. EA was examined for antiviral activity against five strains of pathogenic viruses such as encephalomyocarditis virus (EMCV), vesicular stomatitis virus (VSV) Indiana and New Jersey strains, influenza A virus (Flu A), and varicella zoster virus (VZV) in vitro. Antiviral activity was evaluated by plaque reduction assay. Among five strains of viruses tested, EA exhibited the most potent antiviral activity against VSV Indiana strain with 50% effective concentration $(EC_{50})$ of 0.104 mg/ml in Vero cells, and its selectivity index (SI) was 36.5. EA was also examined for the virucidal activity, antiviral activity in preincubation on VSV Indiana strain in order to examine possible mode of antiviral activity. Preincubation of Vero cells with EA did not confer protection against VSV, however, prolonged exposure of cells to EA inhibited the replication of virus dose-dependently. In virucidal activity, the titer of infectious virus did not decrease significantly.
Park, Hong-Lyeol;Yoon, Jae-Seung;Kim, Hyun-Ran;Baek, Kwang-Hee
The Plant Pathology Journal
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v.22
no.2
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pp.168-173
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2006
To develop the diagnostic method for the viral infection in apple, the partial genes corresponding to the N-terminal region of RNA polymerase of Apple stem grooving virus (ASGV) and coat protein of Apple chlorotic leaf spot virus (ACLSV) were characterized from the infected apple cultivars in Korea. Based on the nucleotide sequences of the characterized partial genes, the virus gene-specific primers were designed for the detection of ASGV and ACLSV infected in species of Malus. The RT-PCR using the primers for the genes of ASGV and ACLSV successfully gave rise to 404 and 566 bp DNA fragments, respectively. Using those viral gene-specific primers, the multiplex RT-PCR assays were also established to diagnose the mixed infection by ASGV and ACLSV simultaneously. Furthermore, the control primers, which have to be included for the RT-PCR as an internal control, were designed using the nucleotide sequence of the gene encoding elongation factor $1{\alpha}(EF1{\alpha})$. This multiplex RT-PCR including the control primers provides more reliable, rapid and sensitive assay for the detection of ASGV and ACLSV infected in Korean apple cultivars.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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