전신마취제의 잉여 몰부피는 Halobacteriun Halobium에서 추출분리된 Purple membrane과 Red membrane에서 vesicle의 현탁액에서 $25^{\circ}C$ 잉여부피 dilatometer로 측정되었다. 우리의 연구에 의해 전신마취제인 Propofol은 잉여몰부피와 상관 관계가 있는 것으로 밝혔다. Halobacteriun Halobium에서 비중 차이에 의해 추출 분리된 Purple membrane과 Red membrane의 잉여몰 부피는 vesicle의 아미노산과 지질의 영향이다. 이들은 잉여 몰부피 dilatometer로 잉여 몰 부피를 측정되었으며, 흡광세기는 280 nm 330 nm 에서 연구되었다. Purple membrane과 Red membrane이 Propofol에 의한 입자크기 분석, 상대적 혼탁도가 기계적 특성을 위해 연구되었다. 확산 교환에 의한 점성 중합체 용액의 입자 크기 분석은 측정에 의한 중요한 단계이다. Propofol이 vesicle에서 재구성된 시료들 중에서, 특히 PM+RM+Propofol의 잉여 몰 부피가 PM, RM의 잉여 몰 부피보다 가장 크게 측정되었다.
Lee, Se Jeong;Kim, Hyun-Wook;Na, Ji Eun;Kim, DaSom;Kim, Dai Hyun;Ryu, Jae Ryun;Sun, Woong;Rhyu, Im Joo
Applied Microscopy
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제48권3호
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pp.55-61
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2018
The synaptic vesicle is a specialized structure in presynaptic terminals that stores various neurotransmitters. The actin filament has been proposed for playing an important role in mobilizing synaptic vesicles. To understand the role of actin filament on synaptic vesicle pooling, we characterized synaptic vesicles and actin filament after treatment of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) or Latrunculin A on primary cultured neuron from rat embryo hippocampus. Western blots revealed that BDNF treatment increased the expression of synapsin I protein, but Latrunculin A treatment decreased the synapsin I protein expression. The increased expression of synapsin I after BDNF disappeared by the treatment of Latrunculin A. Three-dimensional (3D) tomography of synapse showed that more synaptic vesicles localized near the active zone and total number of synaptic vesicles increased after treatment of BDNF. But the number of synaptic vesicle was 2.5-fold reduced in presynaptic terminals and the loss of filamentous network was observed after Latrunculin A application. The treatment of Latruculin A after preincubation of BDNF group showed that synaptic vesicle number was similar to that of control group, but filamentous structures were not restored. These data suggest that the actin filament plays a significant role in synaptic vesicles pooling in presynaptic terminals.
Proteomic analyses of synaptic vesicle fraction from rat brain have been performed for the better understanding of vesicle regulation and signal transmission. Two different approaches were applied to identify proteins in synaptic vesicle fraction. First, the isolated synaptic vesicle proteins were treated with trypsin, and the resulting peptides were analyzed using a high-pressure capillary reversed phase liquid chromatography/tandem mass spectrometry (cRPLC/MS/MS). Alternatively, proteins were separated by two-dimensional gel electrophoresis (2DE) and identified by matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometry (MALDI-TOF/MS). Total 18 and 52 proteins were identified from cRPLC/MS-MS and 2DE-MALDI-TOF-MS analysis, respectively. Among them only 2 proteins were identified by both methods. Of the proteins identified, 70% were soluble proteins and 30% were membrane proteins. They were categorized by their functions in vesicle trafficking and biogenesis, energy metabolism, signal transduction, transport and unknown functions. Among them, 27 proteins were not previously reported as synaptic proteins. The cellular functions of unknown proteins were estimated from the analysis of domain structure, expression profile and predicted interaction partners.
무미 양서류발생중에 근절 예정 부위의 최전방에 나타나는 cranial myotomes인 W, X, Y, Z는 후기 배 발생중에 "reduction"을 나타내는 특이한 체절이다. Cranial Myotome이 programmed autonomous death를 수행하는지 또는 otic vesicle과 같은 주위 조직의 영향에 의해 reduction을 일으키는지에 대한 가설을 검증하기 위해 Xenopus를 재료로 하여 서술적인 면과 조직이식을 통한 발생학적 실험을 수행하였다. 먼저 주위의 otic vesicle을 제거하여도 W, X, Y, Z degeneration에는 아무런 영향도 없었으며 otic vesicle을 체절을 따라 새로운 지역으로 이식하여도 그 부위에서 체절이 사라지는 현상이 유도되지 않았다. 한편, WXYZ형성 예정지역을 trunk somite 부위로 이식한 결과 원래대로 reduction을 나타내었고 truck somite 형성조직을 WXYZ 부위로 이식하여도 원래의 운명대로 분화하였다. 따라서 cranial myotome은 근육이 분절되는 발생시기에 도달하면 주위의 조직에 상관없이 예정된 운명에 따라 자동적으로 소멸되는 것으로 결론지을 수 있다.결론지을 수 있다.
Ultrastructural studies of germ cell development during spermatogenesis and taxonomic values in mature sperm morphology of Argopecten irradians irradians were investigated by transmission electron microscopic observations. In the early stage of spermatid during spermiogenesis, a few granules and proacrosomal granules are formed by the Golgi complex. In the late stage of spermatid during spermiogenesis, a proacrosomal vesicle becomes an acrosomal vesicle in the acrosome through spermiogenesis. The sperm is approximately $ 45-48{\mu}m$ in length including a jar-shaped sperm nucleus (about $1.45{\mu}m$ long), an acrosome (about $0.34{\mu}m$ long) and tail flagellum. The axoneme of the sperm tail shows a 9+2 structure. As one of common characteristics of mature sperm morphologies in Pectinidae species in subclass Pteriomorphia, mature spermatozoon consists of the cone-shaped acrosomal vesicle and subacrosomal material on the invaginated jar-shaped nucleus. The acrosomal vesicle of this species is composed of electron high dense opaque part (material) from the base to the tip, as have seen in the species in the subclass Pteriomorphia. Exceptionally, five mitochondria are found in the sperm midpiece of this species, unlike four in most species of Pectinidae in subclass Pteriomorphia. However, the acrosomal vesicle of spermatozoa of A. irradians irradians resemble to those of other investigated Pectinidae species in subclass Pteriomorphia. Therefore, we can use sperm morphology as a tool in the resolution of taxonomic relationships within the Pectinidae species. These morphological charateristics of acrosomal vesicle belong to the family Pectinidae in the subclass Pteriomorphia.
주름 개선을 위한 활성물질인 아데노신의 경피 투과를 위해 나노 플렉시블 베시클에 포집을 시도하였다. 나노 플렉시블 베시클은 인지질, 에탄올, lysolecithin으로 구성되는데, 수화 과정에서 형성된 액정 상을 물속에 분산시켜 만드는 액정형 베시클이다. 본 연구에서는 베시클 입자크기에 영향을 미치는 요인을 알아보기 위하여 실험계획법 중 하나인 다구찌 방법을 적용하였다. 다구찌 직교 배열을 활용하여 베시클 입자크기에 대한 망소 특성의 S/N 비를 산출하였다. 베시클 구성성분에서 에탄올과 lysolecithin 비율, 수화 과정에서 투입되는 수용액 양 등이 베시클 입자크기에 큰 영향을 미치는 주요 인자들이고, ANOVA 분석을 통해 이들 인자가 신뢰수준 95%에서 유의함을 확인하였다.
플라스틱 제품의 가소제 성분으로 쓰여지며, 내분비 교란물질로 알려져 있는 di-(2-ethylhexyl)phthalate (DEHP)가 흰쥐 부속생식선의 발달에 미치는 영향을 알아보기 위하여, 미성숙한 상태의 웅성 흰쥐에 DEHP(1g/kg/day, 2g/kg/day, 3g/kg/day)를 15일간 구강으로 삽관 투여한 후, 저정낭 상피세포들을 중심으로 광학 및 전자 현미경적 관찰을 실시하였다. DEHP 투여에 의한 광학현미경적 변화로서는 분비선의 크기와 상피층의 두께가 감소하고, 강소 주변부위에서 교원섬유를 비롯한 결합조직 성분들이 증가하는 경향을 나타냈다. 저정낭 분비세포들의 미세구조를 보면, 원주형의 대조군 세포들내 전자밀도가 높은 분비과립들은 소포내 가장자리에 치우쳐 있었고, 세포질내에서 조면소포체와 골지복합체가 잘 발달하였으며, 다수의 미세융모들이 존재하고 있었다. DEHP 1g을 처리한 실험군에서 분비세포들의 미세구조상의 뚜렷한 변화는 관찰되지 않았으나, 미세융모와 분비소포의 분포가 다소 감소한 것으로 나타났다. 2g을 처리한 실험군에서는 분비세포의 세포질이 감소하여 세포의 형태가 원주형에서 입방형으로 변화되었으며, 핵막이 불규칙한 모습을 보였고, 조면소포체의 발달이 미흡하였으며, 분비소포의 수도 크게 감소하였다. 3g을 처리한 실험군에서는 세포소기관들의 미세구조가 뚜렷한 변화를 나타냈다. 핵내 이질염색질이 크게 증가하였고, 세포질내에서 분비소포를 거의 관찰할 수 없었으며, 2차 리소솜이나 공포들도 관찰할 수 있었다. 이상과 같이, DEHP는 저정낭내 분비세포들의 분화 및 기능을 농도 의존적으로 억제하는 것으로 나타났으며, 이러한 저해작용은 DEHP에 의한 테스토스테론의 농도 감소와 연관이 있는 것으로 판단된다.
흰쥐를 실험 동물로 하여 각간핵의 신경세포의 미세구조와 신경연접 기구를 확인하고, 고삐핵으로 부터 각간핵으로 투사되는 축삭종말의 형태를 밝히기 위하여 고삐핵을 전기적으로 제거(electrolytic lesion)한 후 간각핵에서 퇴행성 변화를 보이는 축삭종말을 전자현미경으로 관찰하였던 바, 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 흰쥐 각간핵에는 크기에 따라 대신경세포 ($27\\times12 \\mum$)와 소신경세포 ($15\\times10 \\mum$)가 구별되었다. 대신경세포는 그 세포질내에 잘 발달된 소기관들이 있었으며, 핵에는 약간의 핵막 함입이 형성되어 있었다. 소신경세포는 소기관들이 빈약하게 발달되어 있었고 핵은 매우 깊은 핵막의 함입이 이루어져 있었다. 이들 대, 소신경세포의 구성비는 3:7 정도로 소형세포가 많았다. 2. 각간핵의 신경종말의 현접형태는 그 종말내에 포함되어 있는 연접소포의 크기와 모양 및 분포 상태, 그리고 연접부에 형성된 연접치밀질의 발달에 기초를 두어 관찰한 결과 4형이 구별되었다. 제I형 연접은 작고 둥근 연접소포 (직경 40 nm)를 포함하여, 비대칭성 연접을 이루었고, 본연접이 가장 많이 출현하였다(40%). 제II형 연접은 크고 원형의 연접소포(직경 45 nm)를 포함하며, 대칭성인 연접치밀질을 형성하였고, 그 출현율은 18%였다. 제III형 연접은 원형 및 난원형 (직경, $25\\times40 nm$)이 섞여 있었으며, 대칭성인 연접을 형성하고 있었고, 33%의 출현율을 보였다. 제IV형 연접은 타원형의 연접소포 (직경, 25\\times50 nm$)를 갖고 있었으며 대칭성인 연접을 띠고 있었다.
Human ${\alpha}$-synuclein is the major component of the protein aggregates known as Lewy bodies or Lewy neurites, which define the intracellular lesions of Parkinson's disease. Despite extensive efforts, the physiological function of ${\alpha}$-synuclein has not yet been elucidated in detail. As an approach to defining its function, proteins that interacted with ${\alpha}$-synuclein were screened in phage display assays. The SNARE protein vesicle t-SNARE-interacting protein homologous 1B (VTI1B) was identified as an interacting partner. A selective interaction between ${\alpha}$-synuclein and VTI1B was confirmed by coimmunoprecipitation and GST pull-down assays. VTI1B and ${\alpha}$-synuclein were colocalized in N2a neuronal cells, and overexpression of ${\alpha}$-synuclein changed the subcellular localization of VTI1B to be more dispersed throughout the cytosol. Considering the role played by VTI1B, ${\alpha}$-synuclein is likely to modulate vesicle trafficking by interacting with a SNARE complex.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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