인삼엽을 강광(100 KLuw) 및 고온($45^{\circ}C$, 암상태)에 처리하여 효소(glucose-6-phosphate dehydrogenase, acid phosphatase, catalase, peroxidase)의 활성도를 조사한 결과 두 처리구에서 공히 감소하는 경향이었으나, 특기 강광에서 활성도가 현저히 감소하였다. 이와 같은 활성도 감소는 효소의 thermal stabilities나 coagulation 등과 같은 광에 의한 2차적인 엽온상승 효과에 따른 inactivation이 아니며, proteolytic activity 증가로 인한 효소단백질의 함량감소로 확인되었다. 인삼엽에서 proteolytic activity가 강광에 의해 급속히 증가하는 것으로 보아 정상엽(normal leaf)에 inactive 상태로 내재(compartmentation)되어 있는 proteinase가 타 식물에 비해 많은 것으로 사료된다. 또한 chlorphyll bleaching과 효소의 inactivation을 유발시킬 수 있는 superoxide radical(${O_2}^{-}$)의 광화학적 생성율이 비교식물(Solanum nigrum)보다 높게 나타나고 crude saponin이 superoxide의 생성율을 촉진하는 것으로 보아 superoxide에 의한 pigment system의 광산화율이 타 식물에 비해 높을 것으로 사료된다.
A balance between production and degradation of reactive oxygen species (ROS) is critical for maintaining cellular homeostasis. Increased levels of ROS during oxidative stress are associated with disease conditions. Antioxidant enzymes, such as extracellular superoxide dismutase (EC-SOD), in the extracellular matrix (ECM) neutralize the toxicity of superoxide. Recent studies have emphasized the importance of EC-SOD in protecting the brain, lungs, and other tissues from oxidative stress. Therefore, EC-SOD would be an excellent therapeutic drug for treatment of diseases caused by oxidative stress. We cloned both the full length (residues 1-240) and truncated (residues 19-240) forms of human EC-SOD (hEC-SOD) into the donor plasmid pFastBacHTb. After transposition, the bacmid was transfected into the Sf9-baculovirus expression system and the expressed hEC-SOD purified using FLAG-tag. Western blot analysis revealed that hEC-SOD is present both as a monomer (33 kDa) and a dimer (66 kDa), as detected by the FLAG antibody. A water-soluble tetrazolium (WST-1) assay showed that both full length and truncated hEC-SOD proteins were enzymatically active. We showed that a potent superoxide dismutase inhibitor, diethyldithiocarbamate (DDC), inhibits hEC-SOD activity.
유리 라디칼과 활성 산소종, 산화방지제 간의 불균형이 염증성 구강내 질환의 발생과 진행에 있어 중요한 역할을 한다는 주장이 제기되었고 최근에는 만성 염증성 치주질환에서도 산화에 의한 소실이 관찰되었다. 다양한 내적인 항산화 방어 기전 중 superoxide dismutase 가 $O_2$를 $H_2O_2$로 효과적으로 전환시킴으로써 활성산소종에 대한 일차적인 방어를 맡고 있다. 현재까지 인간에서 발견된 superoxide dismutase 는 cytoplasmic copper-zinc SOD와 mitochondrial manganase SOD, extracellular SOD의 3가지 아형이다. 이번 연구는 만성 치주질환을 가전 환자의 치주조직에서 효소 항산화제인 SOD의 발현정도를 알아봄으로써 질환조직 내의 산화자극 정도를 평가해 보고자하였다. 전남대학교 치주과에 내원한 33명의 만성 치주질환자와 20명 의 임상적으로 건강한 대상으로부터 조직을 얻어 Cu/Zn-SOD와 Mn-SOD, EC-SOD를 이용한 면역조직화학 염색을 시행하였다. 임상적 소견과 조직학적 소견이 일치하지 않아 조직학적 소견을 기준으로 건강한 조직, 경도, 중등도, 중도 치주질환 조직으로 그룹을 나누고 완전한 상피와 결합조직을 가진 27개의 표본에 대한 분석을 시행하였다. 치주질환 조직에서 건강한 조직에 비해 Cu/Zn-SOD가 상피의 기저층과 상피에 근접한 결합조직에서 발현되고 Mn-SOD는 염증이 증가함에 따라 크게 상피의 과립증과 각화층, 그리고 상피에 근접한 결합조직에서 발현됨으로써 활성산소종이 치주조직 파괴에 관여한다는 것을 알 수 있었다. 세 아형 모두 혈관주위에서 발현되었고 특히 EC-SOD는 작은 모세혈관주위에서만 발현되었으나 염증에 의해 혈관벽이 두꺼워지고 혈관 수가 증가한 곳에서 뚜렷하게 염색되었다. 이번 연구는 염증성 치주조직내 증가된 SOD의 활성이 치주질환자의 산화자극 정도와 관련되어 있음을 시사하였다.
Objectives : The objective of this study was to compare the antioxidant effects among cultivated wild ginseng and ginseng extracts. Methods : In vitro antioxidant activities were examined by superoxide and hydroxyl radical scavenging activities of ginseng and cultivated wild ginseng extracts. Results : 1. In the superoxide radical scavenging activities of ginseng and cultivated wild ginseng extracts, antioxidant activities of cultivated wild ginseng extracts was showed higher than cultivated ginseng in the concentration of 0.25 and $0.50mg/m{\ell}$. 2. In the hydroxyl radical scavenging activities of ginseng and cultivated wild ginseng extracts, antioxidant activities of cultivated wild ginseng extracts was showed higher than cultivated ginseng in the concentration of 1.0, 2.5, and $5.0mg/m{\ell}$. Conclusions : In summary, the results of this study demonstrate that cultivated wild ginseng extracts had higher antioxidant activities to cultivated ginseng.
Hoichunyonggyuksan(HCYGS) and Yongseksan(YSS) are important prescriptions that have been used in oriental medicine for stomatitis and wound healing. The study was done to evaluate the inhibitory effects of cytotoxicity, formation of superoxide on the macrophage and neutrophil, prostaglandins($PGE_2$), interleukins($IL-1{\Beta}$), collagenase activity and synthesis of collagen and DNA. The results were obtained as fo1lows: 1. HCYGS and YSS were not showed the proliferation difference of human fibroblast and monocyte in all concentrations to be experimented and in result, it was concluded that they have no cytotoxicity. 2. YSS inhibited the formation of superoxide to $48\% at the concentration of $0.001\%$ in the mouse monocyte. 3. HCYGS inhibited the formation of superoxide to $13\%$ at the concentration of $0.001\%$ as compared with control in the human monocyte. 4. HCYGS and YSS inhibited the formation of superoxide to $25\%\;and\;35\%$ respectively at the concentration of $0.0001\%\;and\;HCYGS\;showed\;38\%$ inhihitory rate on the formation of superoxide at concentration of $0.001\%$ in the human neutrophil. 5. The concentration of inhibiting the production of prostaglandins($PGE_2$) to $11\%$ in the human monocyte stimulated with E. coli were $0.01\%$ of HCYGS. 6. The concentration of inhibiting the production of interleukins($IL-l{\Beta}$) to $43\%\;and\;39\%$ in the human monocyte stimulated with E. coli were $0.01\%$ of HCYGS and YSS. 7. HCYGS and YSS didn't influence on collagen synthesis and total protein in fibroblasts. 8. HCYGS and YSS inhibited the collagenase activity to $22\%\;and\;19\%\;at\;0.1\%,\;45\%\;and\;56\%\;at\;0.2\%,\;57\%\;and\;52\%$ at $0.5\%$ respectively, but YSS exerted the inhibitory effect on collagenase activity to $27\%$ at the lower concentration of $0.01\%$. 9. HCYGS and YSS didn't show the faster recovary than control group hut exerted the consistant effect on the anti-inflammations and the formation of granulation tissue.
허혈심근의 재관류시 arachidonic acid가 반응성 산소대사물의 발생원으로서 심근 손상에 미치는 영향을 검토하였다. Langendorff 관류장치를 이용하여 흰쥐 적출심장을 0.5ml/min의 저용량으로 관류 (45분)한 후 정상관류 (7 ml/min)로 복귀 시키므로써 실험적인 허혈-재관류 심장을 만들었다. 재관류시 Na arachidonate $(10^{-7}{\sim}10^{-2}{\mu}g/ml)$를 투여한 후 superoxide anion 생성을 관찰하고, 심근 손상의 지표로 lactic dehydrogenase(LDH)유리를 측정 하였으며 이들에 대한 각종 arachidonic acid 대사 억제 약물의 영향을 비교 검토하였다. Superoxide anion 생성은 SOD-억제성 ferricytochrorme C 환원 반응을 이용하였다. 연구성적은 다음과 같다. 1) 저용량 관류후 재관류시 ferricytochrorme C환원은 superoxide dismutase (SOD, 300 U/ml) 및 indomethacin (60 nmole/ml), ibuprofen $(30\;{\mu}g/ml)$에 의하여 억제되었다. 2) Na arachidonate는 용량의존적으로 ferricytochrorme C 환원을 증가 시켰으며 반응성 산소대사물 제거효소인 superoxide dismutase (SOD, 300 U/ml)에 의하여 현저히 억제되었다. 3) Na arachidonate $(10^{-3}\;{\mu}g/ml)$에 의한 superoxide anion 생성은 cyclooxygenase 억제약물인 indomethacin (60 nmol/ml), lipooxygenase 억제약물인 nordihydroguaiaretic acid$(NDGA,\;0.1\;{\mu}mole/ml)$, arachidonic acid의 substrate inhibitor인 eicosatetraynoic acid $(ETYA,\;1\;{\mu}g/ml)$에 의하여 현저히 억제되었다. 4) Na arachidonate는 LDH 유리를 증가시켰으며 SOD에 의하여 유의하게 억제 되었다. 5) Na archidonate에 의한 LDH 유리증가는 indomethacin, NDGA, ETYA에 의하여 유의하게 억제 되었다. 이상의 결과로 흰쥐의 허혈-재관류심근에서 arachidonic acid는 그 대사 과정에서 반응성 산소대사물을 발생하고 이는 심근세포손상에 부분적으로 기여할 수 있을 것으로 여겨졌다.
Quinazolinones, 2-substituted and 3-substituted, mainly synthesized by microwave irradiation, were subjected to anti-platelet aggregation and inhibition of superoxide anion generation assays. Interestingly, 2-phenyl-4-quinazolinone (4) exhibited significant inhibitory activities toward platelet aggregation and neutrophil activation, and it might therefore serve as a prototype lead compound.
Nonactin, known as an ionophore antibiotic, was antagonized by the actibity of quercetin, an oxygen radical scavenger. This compound generated superoxide radicals in Bacillus subtilis lysates. A recombination-deficient mutant strain of B. subtilis was more sensitive than a wild strain, and this hypersensitivity was reduced in the presence of dithiothreitol as an antioxidant. These results suggest that superoxide radical is important in the antibacterial action of this agent.
In the course of screening for antioxidant compounds by measuring the radical scavenging effect on 1,1-diphenyl- 2-picrylhydrazyl (DPPH), a total extract of the twigs of Stewartia koreana (Theaceae) was found to show potent antioxidant activity. Subsequent activity-guided fractionation of the methanolic extract led to the isolation of six phenolic compounds, ampelopsin (1), catechin (2), proanthocyanidin-A2 (3), fraxin (4), (2R, 3R)-taxifolin-3-${\beta}$-D-glucopyranoside (5), and (2S, 3S)-taxifolin-3-${\beta}$-D-glucopyranoside (6), as active principles. Their structures were elucidated by spectroscopic studies. Compounds 1-6 were isolated for the first time from this plant. Among them, three compounds 1-3 showed the significant antioxidative effects on DPPH, and riboflavin originated superoxide quenching activity. In riboflavin-nitrobluetetrazolium (NBT)-light system, compound 1 showed better superoxide quenching activity than vitamin C.
Actively growin Excherichia coli(KCTC 1039) cells were treated with paraquat (1, 1'-dimethyl-4, 4'-bipyridili-um dichloride) by cultivating them in the presence of 1.0mM paraquat. The treatment was carried out with or without shaking to understand the effect of oxygen on paraquat action to thebacterial superoxide dismutase (SOd). By the treatment with vigorous shaking , population growth of the organism almostly stopped and specific activities of SOD of the cells drastically decreased. On contrast ot it, the herbicide showed only l limited inhibitory action on bacterial growth and SOD activity by stationary treatment. Proteins prepared from parquat-treated cells divided into two peaks by Sephacryl column chormatogrpahy, while proteins from the intact cells formed a single peak. Cytoplasmic proteins and plasma membrane proteins of intact cells formed separated three peaks by Sephadex G-75 column chormatography. respectively. Among them the second peak disappeared by paraquat treatment , while the third peak became more apparent. Fractions from the first and the third peak showed SOD activity. Paraquat was detected from the same fractions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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