Kim, Hyun-Hwi;Song, Hyun-Kyu;Lee, Bong-Jin;Park, Sung Jean
한국자기공명학회논문지
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제19권2호
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pp.88-94
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2015
Bub1 is one of the spindle checkpoint proteins and plays a role in recruitment of the related proteins to kinetochore. Here, we studied the structural characteristic of the evolutionarily conserved 160 amino acid region in the N-terminus (hBub1 CD1), using Circular Dichroism (CD) and NMR. Our CD results showed that hBub1 CD1 is a highly helical protein and its structure was affected by pH: as pH was elevated to basic pH, the helical propensity increased. This could be related to the surface charge of the hBub1 CD1. However, the structural change did not largely depend on the salt concentration, though the thermal stability a little increased. The previous NMR analysis revealed that the hBub1 CD1 adopts eight helices, which is consistent with the CD result. Our result would be helpful for evaluating the molecular mechanism of the hBub1 CD1 and protein-protein interactions.
p73 is a structural and functional homologue of the p53 tumor suppressor protein. Like p53, p73 induces apoptosis and cell cycle arrest and transactivates p53-responsive genes, conferring its tumor suppressive activity. In addition, p73 has unique roles in neuronal development and differentiation. The importance of p73-induced apoptosis lies in its capability to substitute the pro-apoptotic activity of p53 in various human cancer cells in which p53 is mutated or inactive. Despite the great importance of p73-induced apoptosis in cancer therapy, little is known about the molecular basis of p73-induced apoptosis. In this review, we discuss the p73 structures reported to date, detailed structural comparisons between p73 and p53, and current understanding of the transcription-dependent and -independent mechanisms of p73-induced apoptosis.
구조적 생물 정보학 분야는 단백질의 3차원 구조를 대상으로 단백질을 연구하는 분야이며, 구조적생물 정보학의 중요한 분야 중의 하나는 단백질 3차원 구조 가시화이다. 단백질의 3차원 구조를 규명하는 장비의 발달로, 규명되는 단백질의 크기와 개수가 증가함에 따라, 고성능의 단백질 가시화 시스템의 필요성도 크게 증가하였으나, 기존의 단백질 구조 가시화 시스템은 3차원 그래픽 하드웨어에 최적화 되지 못하여, 거대 단백질의 가시화에 충분한 성능을 가지지 못하였다. 본 논문에서 제안하는 단백질 3차원 구조 가시화 시스템은 거대 단백질의 가시화 하기 위하여, 3차원 그래픽 하드웨어의 최적화 기법중의 하나인 기하 인스턴싱 기법을 사용하여 빠르게 거대 단백질을 렌더링 한다. 성능 실험에서 7종의 다른 크기의 단백질을 대상으로, 4가지 가시화 방법에 대하여, 제안하는 시스템과 기존의 시스템과의 단백질 렌더링 성능 비교 실험을 하여, 대부분의 경우 우수한 성능을 보였다.
In the present investigation, we attempted to design a protocol to develop a hybrid protein with better bioremediation capacity. Using in silico approaches, a Hybrid Open Reading Frame (Hybrid ORF) is developed targeting the genes of microorganisms known for degradation of organophosphates. Out of 21 genes identified through BLAST search, 8 structurally similar genes (opdA, opd, opaA, pte RO, pdeA, parC, mpd and phnE) involved in biodegradation were screened. Gene conservational analysis categorizes these organophosphates degrading 8 genes into 4 super families i.e., Metallo-dependent hydrolases, Lactamase B, MPP and TM_PBP2 superfamily. Hybrid protein structure was modeled using multi-template homology modeling (3S07_A; 99%, 1P9E_A; 98%, 2ZO9_B; 33%, 2DXL_A; 33%) by $Schr{\ddot{o}}dinger$ software suit version 10.4.018. Structural verification of protein models was done using Ramachandran plot, it was showing 96.0% residue in the favored region, which was verified using RAMPAGE. The phosphotriesterase protein was showing the highest structural similarity with hybrid protein having raw score 984. The 5 binding sites of hybrid protein were identified through binding site prediction. The docking study shows that hybrid protein potentially interacts with 10 different organophosphates. The study results indicate that the hybrid protein designed has the capability of degrading a wide range of organophosphate compounds.
Journal of the Korean Data and Information Science Society
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제16권3호
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pp.683-693
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2005
This paper presents a new transmembrane Protein topology prediction method which is an attempt to model the topological rules governing the topogenesis of transmembrane proteins. Context-dependent structural regions of the transmembrane protein are used as basic modeling units in order to effectively represent their topogenic roles during transmembrane protein assembly. These modeling units are modeled by means of a tied-state hidden Markov model, which can express the position-specific effect of amino acids during ransmembrane protein assembly. The performance of prediction improves with these modeling approaches. In particular, marked improvement of orientation prediction shows the validity of the proposed modeling. The proposed method is available at http://bioroutine.com/TRAPTOP.
Antifreeze proteins (AFPs) have ice binding affinity, depress freezing temperature and inhibit ice recystallization which protect cellular membranes in polar organisms. Recent structural studies of antifreeze proteins have significantly expanded our understanding of the structure-function relationship and ice crystal growth inhibition. Although AFPs (Type I-IV AFP from fish, insect AFP and Plant AFP) have completely different fold and no sequence homology, they share a common feature of their surface area for ice binding property. The conserved ice-binding sites are relatively flat and hydrophobic. For example, Type I AFP has an amphipathic, single ${\alpha}$-helix and has regularly spaced Thr-Ala residues which make direct interaction with oxygen atoms of ice crystals. Unlike Type I AFP, Type II and III AFP are compact globular proteins that contain a flat ice-binding patch on the surface. Type II and Type III AFP show a remarkable structural similarity with the sugar binding lectin protein and C-terminal domain of sialic acid synthase, respectively. Type IV is assumed to form a four-helix bundle which has sequence similarity with apolipoprotein. The results of our modeling suggest an ice-binding induced structural change of Type IV AFP. Insect AFP has ${\beta}$-helical structure with a regular array of Thr-X-Thr motif. Threonine residues of each Thr-X-Thr motif fit well into the ice crystal lattice and provide a good surface-surface complementarity. This review focuses on the structural characteristics and details of the ice-binding mechanism of antifreeze proteins.
Foot-and-mouth disease virus (FMDV) is a small single-stranded RNA virus which belongs to the family Picornaviridae, genus Apthovirus. It is a principal cause of FMD which is highly contagious in livestock. In a wild type virus infection, infected animals usually elicit antibodies against structural and non-structural protein of FMDV. A structural protein, VP1, is involved in neutralization of virus particle, and has both B and T cell epitopes. A RNA-dependent RNA polymerase, 3D, is highly conserved among other serotypes and strongly immunogenic, therefore, we selected VP1 and 3D as vaccine targets. VP1 and 3D genes were codon-optimized to enhance protein expression level and cloned into mammalian expression vector. To produce recombinant protein, VP1 and 3D genes were also cloned into pET vector. The VP1 and 3D DNA or proteins were co-immunized into 5 weeks old BALB/C mice. Antigen-specific serum antibody (Ab) responses were detected by Ab ELISA. Cellular immune response against VP1 and 3D was confirmed by ELISpot assay. The results showed that all DNA- and protein-immunized groups induced cellular immune responses, suggesting that both DNA and recombinant protein vaccine administration efficiently induced Ag-specific humoral and cellular immune responses.
A continuous culture study was conducted to determine the impact of ruminal degradable soy protein (S-RDP) level and dilution rate (D) on growth of ruminal non-structural carbohydrate-fermenting microbes. Corn starch, urea and isolated soy protein (ISP) were used to formulate three diets with S-RDP levels of 0, 35 and 70% of total dietary CP. Two Ds were 0.03 and $0.06h^{-1}$ of the fermenter volume in a single-effluent continuous culture system. As S-RDP levels increased, digestibilities of dietary dry matter (DM), organic matter (OM) and crude protein (CP) linearly (p=0.001) decreased, whereas digestion of dietary starch linearly (p=0.001) increased. Increasing D from 0.03 to $0.06h^{-1}$ resulted in decreased digestibilities of dietary DM and OM, but had no effect on digestibilities of dietary starch (p=0.77) and CP (p=0.103). Fermenter pH, the concentration of volatile fatty acids (VFA) and daily VFA production were unaffected (p=0.159-0.517) by S-RDP levels. Molar percentages of acetate, propionate and butyrate were greatly affected by S-RDP levels (p=0.016-0.091), but unaffected by D (p=0.331-0.442). With increasing S-RDP levels and D, daily bacterial counts, daily microbial N production (DMNP) and microbial efficiency (MOEFF; grams of microbial N produced per kilogram of OM truly digested) were enhanced (p=0.001). The increased microbial efficiency with increasing S-RDP levels is probably the result of peptides or amino acids that served as a stimulus for optimal protein synthesis. The quantity of ruminal degradable protein from soy proteins required for optimum protein synthesis of non-structural carbohydrate-fermenting microbes appears to be equivalent to 9.5% of dietary fermented OM.
Rashidan, Kianoush Khajeh;Nassoury, Nasha;Giannopoulos, Paresa N.;Guertin, Claude
BMB Reports
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제35권6호
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pp.595-603
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2002
A gene that encodes a homologue to baculoviral ODVP-6E/ODV-E56, a baculoviral envelope-associated viral structural protein, has been identified and sequenced on the genome of Choristoneura fumiferana granulovirus (ChfuGV). The ChfuGV odvp-6e/odv-e56 gene was located on an 11-kb BamHI subgenomic fragment using different sets of degenerated primers, which were designed using the results of the protein sequencing of a major 39 kDa structural protein that is associated with the occlusion-derived virus (ODV). The gene has a 1062 nucleotide (nt) open-reading frame (ORF) that encodes a protein with 353 amino acids with a predicated molecular mass of 38.5 kDa. The amino acid sequence data that was derived from the nucleotide sequence in ChfuGV was compared to those of other baculoviruses. ChfuGV ODVP-6E/ODV-E56, along with othe baculoviral ODVP-6E/ODV-E56 proteins, all contained two putative transmembrane domains at their C-terminus. Several putative N-and O-glycosylation, N-myristoylation, and phosphorylation sites were detected in the ChfuGV ODVP-6E/ODV-E56 protein. A similar pattern was detected when a hydrophobicity-plots comparison was performed on ChfuGV ODVP-6E/ODV-E56 with other baculoviral homologue proteins. At the nucleotide level, a late promoter motif (GTAAG) was located at -14 nt upstream to the start codon of the GhfuGV odvp-6e/odv-e56 gene. a slight variant of the polyadenylation signal, AATAAT, was detected at the position +10 nt that is downstream from the termination signal. A phylogenetic tree for baculoviral ODVP-6E/ODV-E56 was constructed using a maximum parsimony analysis. The phylogenetic estimation demonstrated that ChfuGV ODVP-6E/ODV-E56 is most closely related to those of Cydia pomonella granulovirus (CpGV) and Plutella xylostella granulovirus (PxGV).
genomics의 정보해석이나 신경전달물질 또는 약의 전달체계에서 아주 중요한 역할을 담당하는 막단백질의 구조연구는 기존의 X-ray나 용액상 핵자기공명분광법으로 수행하기 어려우나 지방질 이분자층이나 여러분자층에서 움직이지 않게 정렬시킨 단백질시료를 이용하여 특이하게 고안된 home-built solid-state NMR probe를 이용하면 구조를 연구할 수 있다. 이 논문에서는 박테리오파지인 pf1의 growth, 분리, 정제 및 pf1에서의 coat protein의 분리, 정제과정과 최종적으로 분리 정제된 pf1의 coat protein의 인산지방질 이분자층에서의 구조를 고체상 핵자기공명 분광법을 이용하여 연구하고자 한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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