Bacillus subtilis B29, B. subtilis M10 and Streptomyces sp. CC19 obtained from phyllosphere of cucumber plants were selected for biological control of fungal air-borne diseases. For the downy mildew, diseased area of B. subtilis B29, B. subtilis M10 and Streptomyces sp. CC19 showed 0.5%, 20.2% and 42.0%, but that of control was 82.0% respectively, in cucumber seedling test. Incidence of powdery mildew by once application of B. subtilis B29, B. subtilis M10 and Streptomyces sp. CC19 was 2.8%, 3.6% and 12.3%, respectively, whereas that of control was 65.6%. On the gray mold, diseased area of B. subtilis B29, B. subtilis M10 and Streptomyces sp. CC19 was 8.0%, 30.8% and 5.2%, respectively, compared to 81.2% for the control. Therefore, B. subtilis B29 could be a prospective antagonist for biological control of powdery mildew, downy mildew and gray mold of cucumber plant.
Kim, Da Som;Bae, Chang Hwan;Yeo, Joo Hong;Chi, Won-Jae
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.44
no.4
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pp.512-521
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2016
A bacterial strain was isolated from a soil sample collected on Jeju Island, Korea. The strain, designated WJ-2, exhibited a high xylanase activity, whereas cellulase activity was not detected. The 16S rRNA gene sequence of WJ-2 was highly similar to type strains of the genus Streptomyces. A neighbor-joining phylogenetic tree based on 16S rRNA gene sequences showed that strain WJ-2 is phylogenetically related to Streptomyces atrovirens. Furthermore, DNA-DNA hybridization analysis confirmed that strain WJ-2 is a novel subspecies of Streptomyces atrovirens. The genomic DNA G+C content was 73.98 mol% and the major fatty acid present was anteiso-C15:0 (36.19%). The growth and xylanase production of strain WJ-2 were significantly enhanced by using soytone and xylan as nitrogen and carbon sources, respectively. Crude enzyme preparations from the culture broth of strain WJ-2 exhibited maximal total xylanase activities at pH 7.0 and $55^{\circ}C$. Thin-layer chromatography analysis revealed that the crude enzyme degrades beechwood xylan to yield xylobiose and xylotriose as the principal hydrolyzed end products.
Chi Won-Jae;Kim Mi-Soon;Kim Jong-Hee;Kang Dae-Kyung;Hong Soon-Kwang
Korean Journal of Microbiology
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v.41
no.4
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pp.255-261
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2005
A 6.7kb DNA fragment containing the sprT gene encoding Streptomyces griseus trypsin (SGT) was cloned from Streptomyces griseus ATCC 10137, and the complete nucleotide sequence was determined. Nucleotide sequence and deduced amino acid or the EcoRI-HindIII fragment revealed the presence or the six complete ORFs containing the sprT gene and one incomplete ORF, which were named ORF1, SGT, ORF2, ORF3, ORF4, ORF5, and ORF6, respectively. ORF1 has homology with the oxidoreductases from several organisms. ORF2 and ORF3 show similarity with unknown proteins and transcription regulator that belongs to the ArsR family, respectively. ORF4 and ORF5 show homology with the peptidoglycan bound protein with LPXTG motif from Listeria monocytogenes and the membrane protein with transmembrane helix from several organisms, respectively. The last ORF, ORF6, shows homology with the lipoprotein from Streptomyces avermitilis.
A new antagonistic strain of actinomycete, designated AP19-2, was isolated from the feces of giant pandas inhabiting the Foping National Nature Reserve in China. Cultural characteristic studies strongly suggested that this strain is a member of the genus Streptomyces. The nucleotide sequence of the 16S rRNA gene of strain AP19-2 evidenced profound similarity (97-99 %) with other Streptomyces strains. Two pure active molecules were isolated from a fermentation broth of Streptomyces sp. strain AP19-2 via extraction, concentration, silica gel G column chromatography, and HPLC. The chemical structures of the two related compounds (referred to as chromomycin $A_2$ and chromomycin $A_3$) were established on the basis of their Infrared spectra (IR), High Resolution Electrospray Ionization Mass Spectrometry (HR-ESI-MS), and Nuclear Magnetic Resonance (NMR) data, and by comparison with published data.
The 2-deoxystreptamine and paromamine are two key intermediates in kanamycin biosynthesis. In the present study, pSK-2 and pSK-7 recombinant plasmids were constructed with two combinations of genes: kanABK, and kanABKF and kacA respectively from kanamycin producer Streptomyces kanamyceticus ATCC12853. These plasmids were heterologously expressed into Streptomyces lividans TK24 independently and generated two recombinant strains named S. lividans SK-2/SL and S. lividans SK-7/SL, respectively. ESI/ MS and ESI-LC/MS analysis of the metabolite from S. lividans SK-2/SL showed that the compound had a molecular mass of 163 $[M+H]^+$, which corresponds to that of 2-deoxystreptamine. ESI/MS and MS/MS analysis of metabolites from S. lividans SK-7/SL demonstrated the production of paromamine with a molecular mass of $324[M+H]^+$. In this study, we report the production of paromamine in a heterologous host for the first time. This study will evoke to explore complete biosynthetic pathways of kanamycin and related aminoglycoside antibiotics.
To search for the antifungal substances, various actino-mycete isolates were obtained from various soils of Korea using plate dilution method on the humic acid vitamin agar plates. In the screening procedures using a dual culture method, 32 actionomycete isolates were selected, which showed the inhibitory activity against mycelial growth of plant pathogenic fungi Altirnaria mali, Colletotrichum gloeosporides, Fusarium oxysporum f.sp. cucumerinum, Magnaporthe grisea, Phytophthora capsici, and Rhizoctonia solani. Bioassay of the crude extracts from culture filtrates and mycelial mets revealed that 12 antagonistic actionomycetes produced highly active antifungal substances. Actinomycete strain S5-55 which showed the substantial antifungal activity against the tested fungi was selected for production of the antifungal substances. Based on the cytochemical and morphological characteristics, strain S5-55 was identified as a Streptomyces species. The results of the numerical identification using the TAXON program confirmed that Streptomyces strain S5-55 was identical with Streptomyces humidus including in TAXON major cluster 19. The production of antifungal substance was most favorable when S. humidus strain S5-55 was cultivated for 10 dats on soluble starch broth supplemented with $K_2$HPO$_4$. The antifungal substances active against the plant pathogenic fungi P. capsici and M. grisea were partially purified using $\textrm{C}_{18}$ reversed-phase column chromatography.
We selected two mutants namely strain D5 and Nu23 by mutagenesis of anthracycline producing Streptomyces: the former is an $\varepsilon$-rhodomycinone overproducing mutant selected from Streptomyces sp. C5, a baumycin producer and the latter, a blocked mutant of early pathway for doxorubicin biosynthesis obtained from Streptomyces peucetius ATCC 27952, a doxorubicin producer. The mutant strain Nu23 does not produce anthracycline metabolites but retains the most of enzyme activities converting aklavinone to doxorubicin and the mutant strain D5 produced $\varepsilon$-rhodomycinone at a level of 150 $\mu$g/ml. These strains were grown separately in NDYE medium and each was mixed at day 3 by equal volume of culture broth but the quantity of doxorubicin produced was far below an estimation based on the level of $\varepsilon$-rhodomycinone normaly produced by the strain D5. On the other hand doxorubicin was reached at maximum level after 4 days in the mixed culture condition which was composed of culture broth of strain D5 grown for 6 day and that of strain Nu23 grown for 3 day. It was turned out that the growth of mutant strain D5 was inhibited by the accumulation of daunorubicin and doxorubicin in mixed culture broth, which cause the limitation of $\varepsilon$-rhodomycinone.
Extracellular neutral pretense of Streptomyces rimosus producing oxytetracycline was purified by ammonium sulfate fractionation, DEAE Sephadex A-50 chromatography and Sephadex G-100 gel filteration, and was showed single band on the cathodic gel electrophoresis. The optimum pH and temperature of the enzyme were pH 8.0 and 6$0^{\circ}C$, respectively. The enzyme was activated about 80% in the presence of Co$^{2+}$ ion, and strongly inhibited by Hg$^{2+}$, Fe$^{2+}$ and chelatig agent, EDTA. Molecular weight of the enzyme was estimated to be 12, 000. The Km value of the enzyme of casein as a substrate was 2.7$\times$10$^{-4}$M.
The present research program was conducted to characterize a strain of actinomycetes producing an anti methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) antibiotic. Soil samples were collected from various sites in Korea and a number of actinomycetes were isolated from the soil samples by applying selective agar for actinomycetes. Among over 400 isolates, a strain (AMLK-135) producing anti-MRSA antibiotic against S. aureus TK 784 was selected. According to the morphological and physiological characteristics, the strain AMLK-135 was confirmed to belong to the genus Streptomyces. From the results of species identification with the TAXON program, the strain AMLK-135 was shown to belong to major cluster 5 (Streptomyces exfoliatus), but it had a low simple matching coefficient ($S_{SM}$ SM/) value to member organisms of major cluster 5. Percentage ($\%$) of strain further away of the strain AMLK-135 was low (1.9400) and it was placed further away than the outer-most members in major cluster 5. Therefore, the strain AMLK-135 was identified as a new species of the genus Streptomyces.
Thirteen different Streptomyces isolates were evaluated for their ability to produce keratinase using chicken feather as a sole carbon and nitrogen sources under solid state fermentation (SSF). Streptomyces sp. NRC 13S produced the highest keratinase activity [1,792 U/g fermented substrate (fs)]. The phenotypic characterization and analysis of 16S rDNA sequencing of the isolate were studied. Optimization of SSF medium for keratinase production by the local isolate, Streptomyces sp. NRC13S, was carried out using the one-variable-at-a-time and the statistical approaches. In the first optimization step, the effect of incubation period, initial moisture content, initial pH value of the fermentation medium, and supplementation of some agro-industrial by-products on keratinase production were evaluated. The strain produced about 2,310 U/gfs when it grew on chicken feather with moisture content of 75% (w/w), feather: fodder yeast ratio of 70:30 (w/w), and initial pH 7 using phosphate buffer after 8 days. Based on these results, the Box-Behnken design and response surface methodology were applied to find out the optimal conditions for the enzyme production. The corresponding maximal production of keratinase was about 2,569.38 U/gfs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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