Tak, Hyun-Min;Kim, Gyeong-Min;Kim, Jong-Su;Hwang, Cho-Rong;Kang, Min-Jung;Shin, Jung-Hye
Journal of Life Science
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v.24
no.5
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pp.549-557
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2014
This study examined the quality characteristics of fermented black garlic (BG) with probiotics. Nine strains of probiotics were tested in media containing 20% BG. Four of the strains grew well in the BG media: Lactobacillus rhamnosus, L. paracasei subsp. paracasei, L. casei, and L. plantarum. These four strains were used to make 10, 20, and 30% BG fermented product, respectively. The number of viable cells, pH, acidity, S-allyl cysteine (SAC) concentration, and nitric oxide (NO) and reactive nitrogen species (ROS) generation in Raw 264.7 macrophage cells were measured. L. plantarum showed the best growth of all the strains in the BG media. The pH of all the samples decreased during fermentation, and the acidity increased acidity. However, they did not differ significantly from the pH and acidity of the control. In all four strains, the SAC content did not differ before and after fermentation. However, the SAC content increased, depending on the BG concentration. NO production was inhibited in the L. rhamnosus inoculation strain compared to the other strains. ROS generation was also significantly inhibited in the L. plantarum inoculation strain compared to the other strains. The results show that the characteristics of BG fermentation products are determined by the fermentation strain. Therefore, fermentation products with particular characteristics can be produced using a single strain or mixed strains.
One hundred thirty nine bacteria were isolated from rotten onions collected from main producing districts, Chang-Nyung, Eui-Ryung, and Ham-Yang in Korea. The $18\%$ (25 strains) of bacterial isolates have carboxymethylcellulase (CMCase) activity and the $53\%$ (74 strains) have polygalacturonase (PGase) activity. Thirty one among randomly selected 45 strains of PGase producing bacteria have pathogenicity to onions. The isolates were classified into Pseudomonas sp. (18 strains), Bacillus sp. (11 strains), Yers-inia sp. (7 strains), and others (9 strains) on the basis of FAMEs patterns. Eighteen strains of Pseudomonas sp. were mainly divided into three cluster in the dendrogram and only the two clusters of them showed pathogenicity to onions. CMCase and PGase activities of Pseudomonas sp. weaker than those of Bacillus sp.. However, the pathogenicity of pseudomonas sp. to soften onions was stronger than that of Bacillus sp. Inoculation of $10^{2}$ cfu of Pseudomonas sp. gives rise to softening of onions. Pseudomonas sp. was identified as Pseudomonas gladioli by biochemical and physiological characteristics. P. gladioli is the first reported bacterium as a pathogen of onion in Korea. In low temperature, P. gladioli showed better growth and higher PGase activity than those of Bacillus sp. identified as Bacillus subtilis. And pH 9.0 is optimal pH for PGase activity of B. subtilis while that of P. gladioli is pH $5.0\∼6.0$ which is the acidity of onions. Taken together, P. gladioli may be a main pathogene of onion rot during the cold storage condition.
Paenibacillus polymyxa is a plant growth-promoting rhizobacterium (PGPR) which can be used for biological control of plant diseases. Several bacterial strains were isolated from rotten roots of Korean ginseng (Panax ginseng C. A. Meyer) that were in storage. These strains were identified as P. polymyxa, based on a RAPD analysis using a P. polymyxa-specific primer, cultural and physiological characteristics, an analysis utilizing the Biolog system, gas chromatography of fatty acid methyl esters (GC-FAME), and the 16S rDNA sequence analysis. These strains were found to cause the rot in stored ginseng roots. Twenty-six P. polymyxa strains, including twenty GBR strains, were phylogenetically classified into two groups according to the ERIC and BOX-PCR analyses and 16S rDNA sequencing, and the resulting groupings systematized to the degrees of virulence of each strain in causing root rot. In particular, highly virulent GBR strains clustered together, and this group may be considered as subspecies or biovar. The virulence of the strains seemed to be related to their starch hydrolysis enzyme activity, but not their cellulase or hemicellulase activity, since strains with reduced or no starch-hydrolytic activity showed little or no virulence. Artificial inoculation of the highly virulent strain GBR-1 onto the root surfaces of Korean ginseng resulted in small brown lesions which were sunken and confined to the outer portion of the root. Ginseng root discs inoculated in vitro or two-year-old roots grown in soil drenched with the inoculum developed significant rot only when the inoculum density was $10^{6}-10^{7}$ or more colony-forming units (CFU) per ml. These results suggest that P. polymyxa might induce ginseng root rot if their population levels are high. Based on these results, it is recommended that the concentration of P. polymyxa should be monitored, when it is used as a biocontrol agent of ginseng, especially in the treatment of stored roots.
The lactobacilli associated with a fermented goat milk product from Tajikistan were isolated to characterize their technological properties and antibiotic resistances in order to assess their suitability for development as starter cultures. In this study, twenty three strains were identified by 16S rRNA sequencing as typical dairy-associated lactic acid bacterial strains, i.e. L. plantarum, L. pentosus, L. delbrueckii, L. helveticus and L. paracasei. These strains were generally susceptible to most antibiotics tested in this study and this allowed a selection of strains as safe starters. The draft genomes of four representative strains were sequenced and the number of contigs of the four assembled genomes ranged from 51 to 245 and the genome sizes ranged from 1.75 to 3.24 Mbp. These representative strains showed differences in their growth behavior and pH-reducing abilities in in vitro studies. The co-inoculation of these Lactobacillus spp. strains together with a yeast Kluyveromyces marxianus MBT-5698, or together with the yeast and an additional Streptococcus thermophilus MBT-2, led to a pH reduction to 3.4 after 48 h. Only in the case of fermentation inoculated with the co-culture, the viscosity of the milk increased noticeably. In contrast, fermentations with single strains did not lead to gelation of the milk or to a decrease in the pH after 24h. The results of this study provide a comprehensive understanding of the predominant lactobacilli related to Tajikistani fermented milk products.
To develope the enhanced bacterial strains capable of biodegradation for various chlorinated aromatic compounds, 100 bacterial strains were isolated from soil samples of suburbs of Taejon, Cheongju, and Jeonju by the enrichment culture. These strains can degrade pentachlorophenol (PCP) which is a kind of wood preservatives. Nineteen strains of the isolates were selected by fast colony-forming rate on solid minimal media containing PCP as an only source of carbon and energy. These strains were identified to genus level. Fifteen strains were identified as Pseudomonas, 1 strain as Acinetobacter and 3 strains were not. Genus Alcaligenes strains were not found among them. Pseudomonas sp. MU135. MU139, MU163 and MU 184 were able to degrade for 4 kinds of chlorinated compounds, PCP, 2,4-D, MCPA and 3CB. Pseudomonas sp. If was observed that MU139 exhibits the highest degradability in liquid minimal media at 72 hours after inoculation. Pseudomoans sp. MU147, MU177, MU184 and MU192 also degraded the compounds at higher rates. As the results, Pseudomonas sp. MU139 and unidentified strain MU184 had biodegrability for broad range of chlorinated compounds and higher rates of degradation for PCP.
Thirteen strains or crosses of Lentinus edodes obtained from home and abroad were compared for their mycelial characteristics on artificial media. Eleven of them were selected and inoculated on logs in order to study for their productivity, and the morphological characteristics of the mushrooms were investigated. 1) Seven strains, i. e., 11001, 12001, 13005, 13012, 13015, 12004 and 20101 were grown well on the sawdust medium. 2) The best mycelial growth and establishment of infection on logs were obtained from strains 20101 and 11001. 3) The highest yield of the mushrooms on logs during the six year periods were obtained from strains 11001, 12001 and 20101. 4) The highest yield of the mushrooms usually was obtained on the fourth year after inoculation. 5) The fruit body productivity in terms of dry weight recovery was the highest in strains 13005 and 20101. 6) The most productive period of the mushrooms during the years depended on strains. Most prevalent types of the strains were summer and autumn growing types, and more mushrooms were produced during these periods. 7) Morphological characteristics of the mushroom were more or less dependent on environmental conditions. 8) Thicker fruit bodies and relatively uniform shapes of the mushroom were produced by strain 20101.
Field strains of Ornithobacterium rhinotracheale (OR) were tested on their virulence in specific pathogen free (SPF) embryonated chicken eggs and 3-week-old broilers. When infected with three different OR isolates (OR-161, OR-240 and OR-295) through yolk sac infection route, all strains appeared to be highly pathogenic with responsible mortality 66% and 100% within 12 days post infection (DPI). To test the virulence of OR in the commercial broilers, 3 week-old broilers were grouped depends on the inoculation route of OR isolate (OR-295) through five different infection routes; group 1 (IT: intratracheal), group 2 (IM: intramuscular), group 3 (IV: intravenous), group 4 (aerosol) and group 5 [Mixed: NDV (LaSota)+OR aerosol]. Within 5 to 7 days after inoculation, only broilers given NDV+OR were slightly depressed and coughing, and had mild facial redness. Grossly, foamy and yellow-white yogurt like exudate in the air sacs, predominantly in the abdominal air sacs was present. In histology, infiltration of the air sac epithelium and lamina propria by macrophage and polymorphonuclear granulocytes was seen with cell debris and inflammatory cells, correlated with the presence of OR antigen, as demonstrated by immunohistochemistry. Field strains of OR were able to induce high mortality in the embryonated chicken eggs, whereas broilers were less susceptible to OR infection. Interestingly, in the absence of NDV infection, the four groups of OR single infection only different route showed minimal and temporary microscopic air sac lesions. Thus, Newcastle disease virus (LaSota strain) showed triggering effects on the OR infection in chickens.
The pathogenic potential of Acnnthamoebc strains was evaluated by experimental infection of murine AIDS (MAIDS) model. C57BL/6 mice were induced to immunocompromized state by intraperitoneal injection of LP-BM5 MuLV and revealed the typical splenomegalty and Iymphatic enlargement of axillar and inguinal regios on necropsy 4 weeks after viral infection. Although there was no significant difference in the mortality rate of MAIDS mouse according to the culture temperature, it was very different in the mortality rate from strain to strain of Accnthnmoebc. A. henIHi OC-3A strain isolated from the brain of a GAE patient showed !he highest mortality rate and A. culbertsoni A-1 strain from tissue culture was the second. KA/S3 and KA/S2 strains isolated from soil revealed very low virulence. The mice infected by intranasal inoculation of Acanthnmoebc showed relatively chronic course than intravenous inoculation. The gross findings of lungs and brains from infected mice were variable among mice. On the microscopic observations, the lungs showed much more severe inflammation and necrosis than the brains microscopically. This MAIDS model would be useful to study the opportunistic protozoan infections of AIDS patients. In the light of these results. the pathogenic potential and the virulence of Acnnthamoebo may be determined genetically.
Ten strains of the entomopathogenic fungi Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana were evaluated to find the most effective strain for optimization studies. The first criterion tested for strain selection was the mortality (> 50%) of Spodoptera litura larvae after inoculation of the fungus for 4 days. Results on several bioassays revealed that B. bassiana BNBCRC showed the most virulence on mortality S. litura larvae (80% mortality). B. bassiana BNBCRC also showed the highest germination rate (72.22%). However, its conidia yield ($7.2{\times}10^8$ conidia/mL) was lower than those of B. bassiana B 14841 ($8.3{\times}10^8$ conidia/mL) and M. anisopliae M6 ($8.2{\times}10^8$ conidia/mL). The highest accumulative radial growth was obtained from the strain B14841 (37.10 mm/day) while the strain BNBCRC showed moderate radial growth (24.40 mm/day). M. anisopliae M6 possessed the highest protease activity (145.00 mU/mL) while M. anisopliae M8 possessed the highest chitinase activity (20.00 mU/mL) during 96~144 hr cultivation. Amongst these criteria, selection based on virulence and germination rate lead to the selection of B. bassiana BNBCRC. B. bassiana B14841 would be selected if based on growth rate while M. anisopliae M6 and M8 possessed the highest enzyme activities.
A previously unreported bacterial disease on chili pepper (Capsicum annuum L.) seedlings affecting as many as 4% of seedlings was observed in greenhouses in Chihuahua, Mexico (Delicias and Meoqui counties). Initial lesions appeared as irregular small spots on leaves and brown necrosis at margins tips were observed. Later, the spots became necrotic with a chlorotic halo. Advanced disease was associated with defoliation. A Gram negative, rod-shaped bacterium was isolated from diseased chili pepper seedlings. Three inoculation methods revealed that isolated strains produce foliage symptoms, similar to those observed in naturally infected seedlings. Pathogenic strains that caused symptoms in inoculated seedlings were re-isolated and identified to fulfill koch's postulate. Polyphasic approaches for identification including biochemical assays (API 20E and 50CH), carbon source utilization profiling (Biolog) and 16S rDNA, hsp60 and rpoB sequence analysis were done. Enterobacter cloacae was identified as the causal agent of this outbreak on chili pepper seedlings.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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