Staphylococcus aureus in Korean kimbab rolls was monitored seasonally in 4 major cities of Korea to investigate the risk of S. aureus in a pre-prepared meal. Thirty-five (28.6%) of 105 kimbab rolls purchased in winter were contaminated with S. aureus with an average level of 2.6 log CFU/g. Thirty-six (33.0%) of 109 kimbab rolls purchased in summer and autumn were contained S. aureus with an average level of 2.9 log CFU/g. Kimbab purchased in snack bars showed higher S. aureus contamination rates with the maximum level of 4.7 log CFU/g than that purchased in convenience stores. Of the raw materials in kimbab, uncooked perilla leaf had the highest contamination rate of S. aureus. Less than 50% of S. aureus isolated from kimbab produced enterotoxin and most of the staphylococcal enterotoxin produced by S. aureus in kimbab was type A.
Multiplex-PCR을 이용하여 대구와 경상북도 내의 다양한 입원 환자들로부터 분리된 187주의 MRSA 균주를 재료로 9가지 종류의 내독소(sea~see, seg~sej ), 3종류의 병독소(eta, etb, tst ) 그리고 내부 양성 지표로써 16S rRNA와 MecA 유전자를 검출하였다. S. aureus 균주에서 새로운 형태의 내독소 유전자(seg~sej)의 빈도가 65.9%로 매우 높게 잠복하고 있었으며, 고전적 형태의 내독소 유전자(sea~see)도 47.8%로 선행 연구에서 검출된 것만큼 높게 잠복하고 있었다. 새로운 형태의 내독소 중 쌍을 이룬 형태(즉, sec+seg+sei, seg+sei)는 많이 검출된 반면 단일 형태의 내독소(즉, seg, seh, sei, sej)는 거의 검출되지 않았거나 없었으며, 쌍을 이룬 내독소 유전자를 가진 S. aureus는 잠재적으로 보다 더 독성균주가 될 것으로 판단된다. 더 나아가 S. aureus 균주들 사이의 높은 보유율을 보이는 seg와 sei 사이의 체계적인 관련성은 staphylococcal enterotoxin들 사이에 중요한 계통발생적 연계가 있을 수 있다는 것은 암시한다.
Lee, Gi Yong;Lee, Haeng Ho;Um, Hong Sik;Yang, Soo-Jin
한국식품위생안전성학회지
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제34권6호
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pp.576-582
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2019
Staphylococcus pseudintermedius는 개에서 기회감염을 유발하는 병원체이며, 공중보건학적으로도 주요한 인수공통 병원체이다. 개에서 분리된 S. pseudintermedius 균주들은 주로 항생제 내성 및 개에서 피부 감염을 유발하는 주요 원인균으로 연구되어 왔지만, 가축에서 분리된 S. pseudintermedius 균주들의 항생제 내성 및 장내 독소 생성에 대한 정보는 매우 제한적이다. 본 연구에서는 개, 돼지, 육우에서 분리된 S. pseudintermedius 균주들에서 18가지의 장내 독소 (staphylococcal enterotoxin; SE) 유전자와 toxic shock syndrome toxin 유전자(tst-1)의 분포양상을 조사하였다. 또한, S. pseudintermedius 균주들의 항생제 내성 양상과 더불어 mecA 유전자 및 SCCmec type 또한 확인하였다. 육우에서 분리한 하나의 균주를 제외한 모든 개와 돼지 분리주 들이 4개 이상의 항생제에 내성을 보였으며, 개에서 분리된 6개의 균주 중 4개의 S. pseudintermedius 균주들이 메티실린 내성과 더불어 SCCmec V를 가진 것으로 확인 되었다. 총 11개의 SE 유전자들 (seb, sec, see, seg, sei, sej, sel, seo, sep, seq, seu) 및 tst-1가 개, 돼지 및 육우로부터 분리된 S. pseudintermedius 균주들에서 확인 되었으며, 대부분의 분리주들 (83%)에서 2개 이상의 SE 유전자들이 확인 되었고, 그 중 sel (42%) 및 sep (42%)가 가장 빈번하게 검출 되었다. 본 연구를 통하여 반려견에서 뿐만 아니라 주요 가축에서 존재하는 S. pseudintermedius 균주들에서 높은 항생제 내성 양상을 확인 하였으며, 항생제 내성과 더불어 여러 staphylococcal enterotoxin 및 tst-1 유전자들을 전파할 가능성을 확인 하였다.
Using the previous established multiplex PCR (mPCR), the presence of six kinds of staphylococcal superantigen (SAg) genes was investigated for nineteen Staphylococcus aureus isolates from the commercialized meat sources. As a result, only one isolate from pork among 19 S aureus isolates (5.3%) was confirmed as a potential SAg producer and harbored sec gene. The results in this study suggest that meat may not be major contagion of staphylococcal food poisoning (SFP) in Korea and that staphylococcal enterotoxin type C may be associated with the disease. Also, the mPCR method in this study can be a useful genotypic method which can overcome the typical disadvantages of conventional antibody-based methods due to antigenic homology, and furthur survey on food-borne S aureus isolates can provide the important epidemiological data for SFP in Korea.
Staphylococcus aureus is a major pathogen for cattle, causing various forms of subclinical and clinical mastitis and could be a causative agent of food poisoning, it produces various superantigenic exotoxins which have a great public health significance. A total of 72 S. aureus clinical isolates from dairy farms located in Kyunggi Province Korea were examined for the species identification by biochemical method, and for the detection of $\beta$-lactamase, enterotoxin and other exotoxins genes by PCR. The results of species identification by biochemical method agreed with those of PCR done with species specific primer STA-AU. $\beta$-lactamase is an enzyme closely associated with the resistance to antibiotic penicillin, which is an important means of treatment of mastitis, all the isolates were positive for the presence of genes encoding $\beta$-lactamase, which were reproduced in penicillin susceptibility disc assay. Six types of toxin genes, Staphylococcal enterotoxin (SE)A, SEB, SEC, SEE, toxic shock syndrome toxin (TSST-1) and exfoliative toxin A (ET A) were detected in 72 isolates by PCR associated genotypic method in this study, none of the isolates carried the genes for enterotoxin D (SED) and exfoliative toxin B (ETB). The occurrence rate of exotoxin genes rated as 12.5%, and the precision of the PCR identification results has been confirmed using the reference strains.
Based on their respective antitumor and thrombolytic activities, the superantigen staphylococcal enterotoxin C2 (SEC2) and staphylokinase (Sak) were chosen for the construction of the novel chimeric proteins Sak-linker-SEC2 and SEC2-linker-Sak using a linker composed of nine Ala residues. Both chimeric proteins possessed nearly the same PBMC proliferation stimulating activity and antitumor activity as SEC2 and thrombolytic activity as Sak. Neither the SEC2 or Sak component of each chimeric protein affected the activity of the other component. The results presented in this study provide a possible strategy to prevent and cure tumor thrombus.
Mastitis is one of the most significant cause of economic loss to the dairy industry. Especially, Staphylococcus aureus is a major contagious mastitis-causing pathogen in dairy cattle. Because of its high transmission rate and resistance to antibiotic therapy, staphylococcal mastitis presents a constant threat to the dairy industry. Staphylococcal enterotoxin C(SEC) produced by S aureus has been known as one of superantigens which are able to stimulate a large proportion of T lymphocytes independently of their antigenic specificity. In this experiment, we have conducted preliminary studies with mice and lactating cows to evaluate the immunogenicity and safety of the experimental vaccine consists of SEC mutant antigen on controlling the bovine mastitis associated with S aureus infections. The average value of somatic cell counts in quarter milk, isolation rate of S aureus were consistently decreased in SEC-SER vaccinated groups, whereas antibody titers were highly increased in SEC-SER vaccinated groups. Peripheral blood were also collected from the lactating cows to determine the proportion of leukocyte subpopulation associated with humoral immunity(HI) and cell mediated immunity(CMI). Proportion of leukocyte subpopulation expressing $BoCD2^+$(total T lymphocyte), $BoCD4^+$(T helper cell), $BoCD8^+$(T cytotoxic/suppressor cell) and NonT/NonB lymphocyte which are involved in CMI in SEC-SER vaccinated groups were decreased for the initial stage after first vaccination and then increased from ten weeks after first vaccination maintaining elevated level till 14 weeks after vaccination. In contrast, proportion of monocyte, MHC class II and B lymphocyte which are associated with the production of primary immune response in SEC-SER vaccinated groups were increased for the initial period and then decreased from ten weeks after first vaccination. We present evidence that vaccination of SEC-SER mutant antigen in lactating cows induced a significant proliferation of bovine T lymphocytes. These results suggest that SEC-SER mutant antigen used in this experiment might be one of potential immunogen in developing innovative vaccine against bovine IMI associated with S aureus. Additional challenge trials should be carried out to evaluate substantial protection against S aureus under the commercial farm conditions.
본 연구는 서부경남지역 딸기 농장 세 곳에서 Staphylococcus aureus를 검색하기 위하여 수행하였다. 본 연구를 위하여 각 농장의 토양과 수질, 재배시설, 포장시설, 작업자 그리고 딸기와 잎으로부터 총 71점의 시료를 채취하였다. 채취된 시료 중 16%의 시료가 Staphylococcus aureus에 오염되어 있는 것으로 나타났으며 이들 균들이 내열성 독소인 enterotoxin A, B, C를 생성할 수 있는 gene의 유무를 확인하기 위하여 PCR를 수행하였다. 그 결과 분리된 균주의 92%가 sea gene을 가지는 것으로 나타났으며 seb gene의 경우는 분리된 균주의 38%에서 나타났다. 그러나 sec를 생성하는 균주는 없었다. 따라서 딸기의 미생물학적 오염을 예방하기 위해서는 체계적인 위생관리 시스템인 운수농산물관리제도(GAP)를 도입해야 할 것으로 사료된다.
본 실험은 Staphylococcus aureus로부터 생성되는 enterotoxin A의 분리를 위하여 각종 분리방법을 조사하였고 그 특성들을 상호 비교하였던 바 다음과 같은 결과를 얻었다. Amberlite 수지는 배지로부터 처음 toxin을 분리 하는 데에는 간편한 수지이나 정제도에 있어서는 약 70%수준으로 다른 방법들에 비해 낮은 편이었다. CM-cellu-lose수지는 0.2M phosphate buffer로 용출했을 때 75% 정도의 정제도를 가진 toxin을 분리할 수 있었으나 stepwise법으로 용출했을 때에는 80% 이상으로 정제도를 높일 수 있었고 Amberlite 수지와 함께 사용했을 때에는 90%정도의 toxin을 얻을 수 있었다. Amberlite나 CM-cellulose수지로 정제한 후 gel filtration을 실시하면 정제도를 더 높일 수 있었다. FPLC는 분리도와 정제도에서 가장 우수하였으며 FPLC의 결과에 따라 Amberlite 수지는 toxin 분획을 중심으로 앞의 분획을 그리고 CM-cellulose 수지는 뒤의 분획을 주로 제거 하는 특징을 가진다. 따라서 위의 column중 하나만 사용한 후 FPLC를 사용하면 95%이상의 toxin을 분리하는 것이 가능하였다.
The aim of this study was to investigate the antimicrobial resistance profiles of and the enterotoxin gene distribution in 4 strains of Staphylococcus aureus (S10-2, S10-3, S12-2, and S13-2) isolated from 90 bulgogi samples. The S. aureus enterotoxin H gene (seh) was found in all the strains, while the S. aureus enterotoxin A gene (sea) was found only in 3 of the 4 strains. The S10-2 strain expressed a combination of enterotoxin genes - seg, seh, sei, sej, selm, and seln. The strains S10-2 and S13-2 were resistant to ampicillin and penicillin G, and all the isolated strains were resistant to tetracycline. The S10-2 strain was the only mecA-positive strain; it was also resistant to β-lactam antibiotics. Thus, genes encoding enterotoxin as well as those conferring antibiotic resistance were identified in the S. aureus strains isolated from pork bulgogi. These results represents the potential occurrence of MRSA in pork bulgogi, and the need for a monitoring system for pork bulgogi in order to prevent an outbreak of staphylococcal food poisoning.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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