In order to find out SoxR-reducing system in E. coli, we generated Tn10-insertion mutants and screened for constitutive expression of SoxS in a soxS-lacZ fusion strain. One mutation was mapped in rseB, a gene in rseABC (Regulation of SigmaE) operon. The constitutive soxS-expressing phenotype was due to the polar effect on the downstream gene, rseC. RseC is likely to function as a component of SoxR reduction system because SoxR was kept in oxidized form to activate soxS expression in rseC mutant. RseC is an integral membrane protein with an N-terminal cysteine-rich domain in the cytoplasm. The functionally critical cysteines were determined by substitution mutagenesis. The truncated N-terminal domain of RseC reduced the soxS transcription by $50\%$ as judged by in vitro transcription assay. Currently RseC is believed to be a reducing factor for SoxR. However, the mechanism for the reduction needs further investigation.
This study investigated the role of cancer/testis antigen DDX53 in regulating cancer stem cell-like properties. DDX53 shows co-expression with CD133, a marker for cancer stem cells. DDX53 directly regulates the SOX-2 expression in anti-cancer drug-resistant $Malme3M^R$ cells. DDX53 and miR-200b were found to be involved in the regulation of tumor spheroid forming potential of Malme3M and $Malme3M^R$ cells. Furthermore, the self-renewal activity and the tumorigenic potential of $Malme3M^R$-CD133 (+) cells were also regulated by DDX53. A miR-200b inhibitor induced the direct regulation of SOX-2 by DDX53 We therefore, conclude that DDX53 may serve as an immunotherapeutic target for regulating cancer stem-like properties of melanomas.
Molinate is thiocarbamate herbicide used primarily in rice production. Chondrogenesis is a multistep process that is essential for endocondral bone formation. The transcription factor Sox9 has an essential role during the sequential steps of chondrocyte differentiation. Bombina orientalis is one of the most common amphibians in the world and comprises a large proportion of their total number. We examined the embryotoxic and survival effects of molinate at various concentration in B. orientalis embryos. The survival rates of embryos at 312h post fertilization treated with molinate was decreased with concentration dependent manner. Also, developmental malformations appeared by molinate in B. orientalis embryos. the expression levels of Sox9 mRNA was examined by RT-PCR. In our result showed that Sox9 expression was found to be increased in malformed tadpole compared to normal tadpole. These results suggested that molinate was detrimental for survival and development of B. orientalis embryo.
Sox4는 DNA 결합 도메인인 HMG-box와 전사 활성 도메인인 serine rich region (SRR)과 아직 그 기능이 알려져 있지 않은 glycine rich region (GRR)등의 세 개의 기능 도메인을 가지는 전사인자이다. 전사인자인 Sox4는 생체 내 초기 분화 시 중요한 역할을 하는 유전자로 알려져 있으나 여전히 그 정확한 생리적 기능 및 세포 내에서 이 유전자 산물이 전사 활성 에 어떻게 관여하는지 그 정확한 기전은 잘 밝혀져 있지 않다. 이에 본 연구에서는 Sox4의 생리적 기능을 이해하고 세포 내에서 Sox4의 기능 연구에 유용하게 사용할 수 있는 항체를 제조하기 위해 Sox4를 대장균에서 발현, 정제하였다. 모든 기능 도메인을 다 포함하는 Sox4는 대장균에서 발현 시 대부분 절단되는 양상을 나타내었다. Sox4의 각 도메인을 대장균에서 GST-융합 단백질로 발현, 정제하여 그 발현 양상을 비교해 본 바 N-말단을 제거한 Sox4 ($\Delta$HMG)의 경우 67 kDa 크기의 단백질이 생성되므로 이 단백질을 항원으로 이용하여 Sox4의 GRR에 특이적으로 반응하는 항체를 제조하였다. 또한, 67 kDa 크기의 단백질 외에 34 kDa 크기에서 GST-융합 단백질이 관찰되었다. 이 밴드는 Sox4 (GRR)를 발현, 정제시에도 관찰되는 동일한 크기의 밴드이며 thrombin과의 반응을 통해 7 kDa 크기로 절단되는 Sox4 밴드이다. 그러므로 이 들 결과로부터 GRR 내에 단백질 분해효소의 표적 부위가 존재함을 확인할 수 있었다. 본 연구결과는 아직 그 기능이 밝혀져 있는 않은 Sox4의 새로운 도메인인 GRR이 단백질 분해 효소의 표적 부위로 작용하여 Sox4의 안정성을 조절함으로써 Sox4의 활성에 중요한 역할을 수행할 수 있다는 가능성을 제시하고 있다.은 억제 회복 효과는 $Mg^{2+}$에 의한 리보자임의 td intron 구조적 안정성에 기인하는 것으로 추정된다.력이 뛰어난(adaptable) 인간적 요구사항을 충족시켜야 한다. 셋째, 다이내믹 시미트리는 역(逆, reciprocity)의 원리와 보상(補賞, complement)의 원리를 제 1의 구성원리로 하며 공간에서 서로에 대한 역과 공통성(common property)을 갖고 자기유사를 지닐 때 연속체(continuum)를 손상하지 않고 전체공간을 유기체적으로 분절한다.같은 pattern 이었다. 그러나 JR89주에서는 280kb 가 나타나지 않아 다른 분리균주와 구분되었다.과 밀가루국(麴) 사이에 차(差)가 별(別)로 없었다.果)에서 총지질(總脂質)을 구성(構咸)하는 지방산(脂肪酸) 조성(組成)은 $C_{18:2}$산(酸), $C_{16:0}$산(酸)의 순(順)으로 그 함량(含最)이 맞은데 비(比)하여 각획분(各劃分)의 지질(脂質)을 구성(構成)하는 지방산(脂肪酸) 조성(組成)은 $C_{16:0}$산(酸), $C_{18:2}$산(酸)의 순(順)으로 그 함량(含量)이 많은 것으로 나타났으며 동결건조후(凍結乾燥後) 저장(貯藏)하는 동안에$C_{18:2}$산(酸), $C_{18:3}$산(酸)의 함량(含量)이 계속(繼續) 감소(減少)하고 있었다. 5. 4-monomethylsterol fraction에는 cycloartenol(20.6%)이 비교적(比較的) 높은 함량(含量)으로 함유(含有)되어 있었고, 그 외(外) cyclolaudenol, cycloeucalenol 및 citrostadienol 등이 함유(含有)되어 있었다. 6. 4-desmethylsterol fraction에
The virulence of superoxide dismutase (SOD) mutants of Vibrio vulnificus, as tested by intraperitoneal injection into mice, decreases in the order of sodC mutant, sodA mutant, and sodB mutant lacking CuZnSOD, MnSOD, and FeSOD, respectively. The survival of SOD mutants under superoxide stress also decreases in the same order. The virulence of soxR mutant, which is unable to induce MnSOD in response to superoxide, is similar to that of the sodA mutant, as the survival of the soxR mutant under superoxide stress is similar to that of the sodA mutant. Consistently, the lowered survival of the soxR mutant is complemented not only with soxR but also with sodA. Thus, the virulence of V. vulnificus is significantly affected by the cellular level of SOD activity, and an increase in SOD level through MnSOD induction by SoxR under superoxide stress is essential for virulence.
Promoters inducible by paraquat, a superocide-generating agent, were isolated from Escherichia coli using a promoter-probing plasmid pRS415 with promoterless lacA gene. Twenty one promoters induced by paraquat were selected and further characterized. From sequence analysis, thirteen of the promoters were mapped to their specific loci on the Escherichia coli chromosome. Several promoters were mapped to the upstream of known genes such as usgl, katG, and mglB, whose relationships with superoxide response have not been previously reported. Other promoters were mapped to the upstream region of unknown open reading frames. Downstream of HC 96 promoter are uncharacterized ORFs whose sequences are homologous to ABC-transporter subunits. Downstream of HC84 promoter is an ORF encoding a transcriptional regulator-like protein, which contains a LysR family-specific HTH (helix-turn-helix) DNA bindign motif. We investigated whether these promoters belong to the soxRS regulon. All promoters except HC96 were found to belong to the soxRS regulon. The HC96 promoter was significantly induced by paraquat in the soxRS deletion mutant strain. The basal transcription level of three promoters (HE43, HC71, HD94) significantly increased at the stationary phase, implying that they are regulated by RpoS. However, paraquat inducibility of all promoters disappeared in the stationary phase, suggesting that SoxRS regulatory system is active only in rapidly growing cells.
본 연구에서는 폐수처리장의 바이오필터로부터 Comamonas sp. NLF-7-7 균주를 분리하고 유전체서열을 PacBio RS II와 Illumina HiSeqXten 플랫폼을 사용하여 분석하였다. 염색체의 크기는 3,333,437 bp로 G + C 구성 비율은 68.04%, 총 유전자수는 3,197개, rRNA는 9개 및 tRNA는 49개로 구성되었다. 본 유전체는 오염물질분해와 플록형성에 관여하는 황산화 경로 유전자(SoxY, SoxZ, SoxA 및 SoxB)와 플록형성 경로 유전자(EpsG, EpsE, EpsF, EpsG, EpsL 및 glycosyltransferase)를 포함하고 있다. 이러한 Comamonas sp. NLF-7-7 균주는 폐수를 정화하는데 활용될 수 있다.
Objective: Human mesenchymal stromal cells (MSCs) exhibit variable differentiation potential and can be divided accordingly into distinct subpopulations whose ratios vary with donor age. However, it is unknown whether the same is true in pigs. This study investigated MSC subpopulations in miniature pig and compared their characteristics in young (2 to 3 months) and adult (27 to 35 months) pigs. Methods: Osteogenic, chondrogenic, and adipogenic capacity of isolated MSCs was evaluated by von Kossa, Alcian blue, and oil red O staining, respectively. Cell surface antigen expression was determined by flow cytometry. Proliferative capacity was assessed with the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay. Expression of marker genes was detected by quantitative real-time polymerase chain reaction. Results: Porcine MSCs comprised cells with trilineage and bilineage differentiation potential (tMSCs and bMSCs, respectively) and non-differentiating stromal cells (NDSCs). The tMSC and bMSC fractions were smaller in adult than in young pigs (63.0% vs 71.2% and 11.6% vs 24.0%, respectively, p<0.05); NDSCs showed the opposite trend (25.4% vs 4.8%; p<0.05). Subpopulations showed no differences in morphology, cell surface antigen expression, or proliferative capacity, but octamer-binding transcription factor 4 (OCT4) expression was higher in tMSCs than in bMSCs and NDSCs (p<0.05), whereas sex determining region Y-box 2 (SOX2) expression was higher in tMSCs and bMSCs than in NDSCs (p<0.05). Aging had no effect on these trends. Conclusion: Porcine MSCs comprise distinct subpopulations that differ in their differentiation potential and OCT4 and SOX2 expression. Aging does not affect the characteristics of each subpopulation but alters their ratios.
Most researches regarding emulsified fuel were in the areas of emulsifier, emulsified fuel manufacturing and emulsified fuel droplet combustion, but there were little papers published regarding emulsified fuel combustion and boiler efficiency in an industrial boiler. The main purpose of this study is to clarify whether improvements in the boiler efficiency and the reduction of pollutants such as CO, NOx, SOx and smoke exist or not when emulsified fuels are combusted in the commercial boiler. Main experimental parameters were water content in heavy oil , excess $O_2$, and boiler load. The fuels used in this experiment were 0.5 B-C, and 5 kinds of 0.5 B-C/water emulsified fuels. The combustion characteristics of heavy oil and its emulsions with water were investigated in an industrial boiler. The combustion stability was monitored and exhaust gases such as CO, NOx, SOx and smoke were measured with excess $O_2$ and combustion load. In case of emulsified fuel combustion, flame stability was poor and boiler efficiency was lowered by 1.6~5.7%, but emission levels of CO and smoke were improved.
The sense and antisense digoxigenin-labeled RNA probes of four genes, Cdc25A, Cdc25B, Sox2 and Mnb, were produced by using SP6 and T7 RNA polymerases, respectively, and in vitro transcription. Expression patterns of the four genes were detected by in situ hybridization in HH (Hamburger and Hamilton) stage 10 chick embryos. In general, expression patterns of the four genes were similar. mRNA of the four genes was mostly restricted to the entire CNS (central nervous system). All were confined to an identical region, neural tube, neural groove and caudal neural plate, corresponding to the notochord or spinal cord, but there was some distinction in specific region or in concentration, for example in somites. The overlap in expression at the same developmental stage in the CNS suggests that the four genes may be functional similar or related in CNS development. Expression patterns of the four genes support specific roles of these regulators in the developing CNS.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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