식품부패미생물에 대한 감초추출물의 항균력을 확인하고 유효성분을 분리한 후 그 구조를 확인 하였다. 감초추출물은 대표적인 항균제인 메타중아황산칼륨과 myconazole과 비슷한 항균 활성을 나타내었다. 용매분획을 실시한 결과 chloroform fraction이 가장 항균활성이 높은 것으로 나타났다. 이에 chloroform분획을 silica gel column chromatography를 통해 분리하여 항균활성이 가장 큰 분획물인 KC를 분리하였다. 이 화합물은 ESI-MS 와 $^1H$-NMR, $^{13}C$-NMR 결과로부터 활성물질의 구조를 동정하였으며 그 결과 KC는 (R)-glabridin인 것으로 확인하였다.
Seo, Dong-Hyuk;Lee, Sang-Hoo;Park, Hey-Lin;Kwon, Tae-Jong;Jung, Seun-Ho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제12권3호
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pp.522-525
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2002
A very rapid and efficient separation technique for cellular rhizobial cyclosophoraoses was developed based on fractional precipitation and partition chromatography. Cyclosophoraoses are known to function in the osmotic regulation and root nodule formation of legumes during the nitrogen fixation process. Cyclosophoraoses are produced as unbranched cyclic (1longrightarrow12)-${\beta}$-D-glucans in Agrobacterium or Rhizobium species. Recent research has shown that cyclosophoraoses can form inclusion complexation with various unstable or insoluble guest chemicals, thereby implying great potential for industrial application. Typical separation of pure cellular cyclosophoraoses has been so far carried out by several time-consuming steps, including size exclusion, anion exchange, and desalting liquid chromatographies, with a relatively poor recovery. However, the proposed method demonstrated that the successive application of fractional ethanol precipitation and one step of silica gel-based flash column chromatography was enough to simultaneously purify neutral or anionic forms of cyclosophoraoses. This novel technique is very rapid and provides a high recovery.
Kale(Brassica oleracea var. acephala) is one of Cruciferous vegetables that is closely related to the wild ancestral form of cabbabe. The ethanol extract of kale which contains the active compoundsss under Salmonella assay system was fractionated with chloroform to collect the nonpolar solvent soluble compounds, and then further fractionation was carried out by silica gel column chromatography. Among kale extracts separated by silical gel column chromatography, the fractions of 4, 5 and 6 exhibited strong antimutagenic activities. The major active compounds from the fraction were identified as chlorophyll derivatives by the analysis with HPLC-fritp-MS. The molecular weights of each chlorophyll derivatives in the sample were acquired from the peaks of positive ion atomosphere pressure chemical ionization (APCI) mas spectrometry.
An antifungal antibiotic was produced from Bacillus sp. YJ-63, and antibiotic was purified to a homogeneity by butanol extraction, Silica-gel column chromatography, Sephadex LH-20 gel filtration column chromatography and HPLC. The purified antibiotic showed one spot on Thin Layer Chromatography, which was negative to ninhydrin and positive to iodine. This finding indicated that the antibiotic was a cyclopeptide structure. UV absorption spectrum of the antibiotic in methanol was maximal at 277 nm, which corresponded to the spectrum for all of the Iturin antibiotic. The antibiotic was stable up to $121^{cdot}C$ and in the range of pH $3.O{\sim}l2.0$ with a stable of ${\alpha}-amino$ acid and ${beta}-amino$ acid, and showed high activity for fungi and yeasts,
자소자의 탈지시료로부터 FPA, SPA 및 IPA 형태의 phenol성 물질을 추출하여 이중 항산화활성이 가장 강한 FPA 추출물에 존재하는 항산화성분을 column chromatography 및 HPLC에 의하여 분리하였다. Chlorogenic acid를 표준물질로하여 측정한 탈지된 자소자에 함유되어 있는 phenol성 물질의 총함량은 0.38% 였고, 총 phenol성 물질중 FPA, SPA 및 IPA 추출물이 차지하는 비율은 71.1%, 15.8% 및 13.1%였다. 세가지 형태의 phenol성 물질의 항산화활성을 electron donating ability (EDA)와 linoleic acid를 기질로 하여 TBA값을 측정하여 비교하였을 경우 FPA 추출물이 가장 높은 항산화활성을 나타내었다. 항산화활성이 가장 높게 나타난 FPA 추출물을 silica gel column chromatography로 분획하여 항산화활성을 비교한 결과 acetone : methanol의 비가 8 : 2인 획분에서 가장 높은 항산화활성을 나타내었다. 항산화활성이 가장 높았던 획분을 HPLC에 의하여 분리한 결과 HPLC chromatogram 상에서 5가지 활성물질 획분이 분리되었으며, 이들 획분을 분취하여 항산화활성을 비교한 결과 F-I 획분이 가장 높은 항산화활성을 나타내었다.
장내유해세균에 대한 세균성 장내질환치료와 관련된 한약재의 항균활성 검색을 통해 우수한 효과가 인정된 가자를 선정하고 혐기적 broth system에서 각 용매별 분획물의 6종의 장내유해세균에 대한 항균활성을 측정하였으며 그 항균물질을 column chromatography 법에 의해 부분 정제하였다. 가자 메탄올 추출물은 100-2,000g/ml 농도에서 시험균 Eubacterium limosum ATCC 10825, Escherichia coli ATCC 25922, Bacteroides fragilis KCTC 5013, Clostridium perfringens ATCC 3627, Staphylococcus aureus KFCC 11764 및 Salmonella typhimurium ATCC 14028 모두에 대해 항균활성을 보였으며 특히 2,000g/ml 농도에서는 Escherichia coli ATCC 25922 및 Staphylococcus aureus KFCC 11764을 제외하고는 거의 생육하지 못하였다. 각 분획물(n-hexane, ethylether, ethylacetate 및 water)들간의 항균활성은 Clostridium perfringens ATCC 3627을 제외하고는 유의적인 차이가 없었다. 가자의 ethylacetate 분획은 Sephadex G-200 column chromatography에 의한 30개 분획 중 12에서 21번까지의 분획에서 강한 항균활성을 나타내었으며 silica gel column chromatography에 의한 40개 분획 중에서는 22에서 34까지의 분획에서 항균활성을 보였다.
동맥경화증과 같은 심혈관 질환을 야기시키는 주요 위험요인인 혈중 콜레스테롤의 수준을 낮추기 위하여 콜레스테롤 생합성 과정의 속도조절단계 효소의 하나인 squalene synthase의 활성을 저해하는 물질을 분리 정제하여, 물질의 이화학적 특성과 생물학적 특성을 검토하였다. Squalene synthase 저해물질은 acetone extraction, ethyl acetate extraction, silica gel column chromatography, sephadex LH-20 column chromatography, 결정화 등을 이용하여 분리 정제하여 YUF-01을 얻었다. 기기분석을 통하여 구조분석을 행한 결과 YUF-01은 분자량 368, 분자식 $C_{20}H_{21}O_6$으로 분석되었으며 243과 421 nm 에서 UV-VIS 흡광을 나타내었고 $^{13}C$ NMR spectrum과 $^1H$ NMR spectrum을 검토하였을 때 aromatic ketone 구조인 curcuminoid 계통의 curcumin과 일치하였다. Squalene synthase에 대한 curcumin의 $IC_{50}$ 값은 $100{\mu}M$이었으며, non-competitive inhibitor로 작용하였다.
밤나무 잎에 함유된 기능성 물질 검색의 일환으로 항미생물 효과를 검정하고 활성물질의 분석을 시도하였다. 예비실험을 통해 추출물의 활성을 확인한 후 시료를 n-hexane, EtOAc, MeOH로 순차 추출하여 정제한 다음 활성이 강한 MeOH 분획의 0.2 g, 0.5 g에 해당하는 추출물로 13종의 미생물에 대해 활성을 측정한 결과, Cram 양성 세균 중에서 S. aureus와 S. epidermidis는 대조구로 사용한 benzoic acid보다 강한 활성이 나타났고, M. luteus와 L. mesenteroides, B. subtilis에서도 활성이 인정되었으며, Gram 음성 세균인 E. coli, S. typhimurium, P. aeruginosa에서도 강한 활성이 나타나 밤나무 잎 추출물은 비교적 넓은 항균 spectra와 활성이 있음이 확인되었다. 이에 활성물질을 규명하고자 시료를 solvent fractionation, silica gel adsorption column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, HPLC 등으로 정제하고 활성이 나타난 산성 획분과 페놀성 획분의 물질을 분리한 후 MS, $^1H-NMR,\;^{13}C-NMR$ 등으로 분석한 결과, 산성 획분에서는 stigmast- 5-en-3-ol($\beta$-sitosterol)이 활성을 갖는 물질로 나타났다.
연꽃의 자방으로부터 80% MeOH로 추출하고, 얻어진 추출물을 n-hexane, ethyl acetate, n-butanol 및 H2O으로 용매 분획하였다. 이 중 n-hexane 분획물에 대해 silica gel과 octadecyl silica gel column chromatography 및 Prep-HPLC system을 반복 수행하여 5 종의 물질을 분리 하였다. 각 화합물의 화학구조는 NMR, GC/MS및 ESI/MS 등의 분광학적 스펙트럼을 측정하고, 해석하여 1-eicosanol (1), cycloartenol (2), trans-squalene (3), pentadecanoic acid (4) 및 β-sitosterol (5)으로 동정하였다. 이 화합물들은 연꽃 자방추출물에서 처음으로 분리하고 동정하였으며 앞으로 이 화합물들에 대한 다양한 생리적 및 약리적 활성을 검토함으로써 건강기능성 식품 또는 의약품의 소재로서의 충분한 가치가 있다고 여겨진다.
Thin layer, paper and column chromatography were compared for the separation, detection and quantitation of three kinds of estrogen in urine of dairy cows. While thin layer chromatography utilizing silica gel was better for the detection of estrogens, column chromatography using celite 545 was preferable. Spectrophotometry was compared with fluorometry for determination of estrone, estradiol-17 ${\beta}$ and estriol eluted by paper chromatography and column chromatography. Optical density of three standard estrogens showed almost same curve at maximum absorption wave length of 230 and $282m{\mu}$. However, the former showed a higher peak. In fluorometry, the fluorescence intensity of estrone and estradiol-17 ${\beta}$ were rather strong, when the estrogens were dissolved in sulfuric acid, and showed higher sensitivity than that of the spectrophotometry. However, in the case of estriol was exceptional.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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