Pseudomonas aeruginosa is an aerobic, Gram-negative, glucose-nonfermenting bacterium, which has emerged as a serious opportunistic pathogen. Recently, outbreaks of carbapenem resistant P. aeruginosa give rise to significant therapeutic challenges for treating nosocomial infections. The genes of metallo-${\beta}$-lactamase (MBL), a powerful carbapenemase, are carried as a part of the mobile gene cassettes inserted into integrons playing an important role in rapid dissemination of antibiotic resistance genes among bacterial isolates. In this study, we investigated the prevalence of integron in imipenem resistant P. aeruginosa isolates. A total of 61 consecutive, non-duplicate, and imipenem resistant P. aeruginosa strains were isolated from a university hospital in the Chungcheong province of Korea. We employed repetitive extragenic palindromic sequence-based PCR (rep-PCR) method for the selection of clonally different P. aerusinosa strains. PCR and DNA sequencing were conducted for the detection of integrons. Twenty-one clonally different P. aeruginosa strains were isolated. Only one (P28) of the strains harbored $bla_{VIM-2}$ that was found as gene cassettes in class 1 integrons. Four of 21 carbapenem resistant P. aeruginosa strains harbored class 1 integron containing aminoglycoside resistance determinant. All of the integrons detected in the study contained more than one resistance gene cassette, which can mediate resistance to multiple antibiotics. To prevent further spreading of the multi-drug resistant P. aeruginosa, conseguent monitoring and clinical polices are required.
Melanocortin 4 receptor: (MC4R) and Myostatin (MSTN) are two important growth trait-related genes in animals. In this study, we showed that two SNPs, MC4R-719A>G and MSTN-519C>T, found in the promoters of the MC4R and MSTN genes, respectively, are both associated with growth traits in Spinibarbus hollandi. Furthermore, we observed that there were significant associations between the expression levels of the MC4R and MSTN genes and these two growth trait-related SNPs. The expression level of MC4R gene in brain was lower in GG genotype fish with extremely high growth performance than that in AA genotype fish with extremely low growth performance. Expression level of the MSTN gene in muscle was lower in TT genotype fish with extremely high growth performance than that in CC and CT genotype fish with lower growth performance. The results indicated that these SNPs located in the promoters of MC4R and MSTN are associated with growth-related traits through modification of gene expression levels. The MSTN and MC4R SNPs may have useful application in effective marker-assisted selection aimed to increase output in S. hollandi.
The acyl-CoA dehydrogenase, C-2 to C-3 short chain (ACADS) gene is known to be related with fat metabolism, especially coverts the fat to the energy sources in cattle. In human, the mutations in this gene cause SCAD deficiency, which is one of the fatty acid metabolism disorders. The ACADS gene is located on bovine chromosome 17. The objective of this study was to identify SNPs in Hanwoo ACADS gene and identify the relationships with economic traits. In this study, two SNPs, T1570G SNP in exon 2 and G13917A SNP in exon 4, were observed. Moreover, in the coding region, 2 missense mutations, T (Cys) ${\rightarrow}$ G (Trp) mutation at 1570 bp and G (Arg) ${\rightarrow}$ A (Gln) mutation at 13917 bp, were observed. These mutations were subjected to the PCR-RFLP for typing 198 Hanwoo animals. The observed genotype frequency for T1570G was 0.135 (TT), 0.860 (TG) and 0.005 (GG), respectively. Also, 0.900 (GG) and 0.100 (GA) were observed for the G13917A mutation. The association of these SNPs with four economic traits, CW (Carcass Weight), BF (Backfat Thickness), LMA (Longissimus Muscle Area), MS (Marbling Score), were also observed. The results indicated that no significant results were observed in all four traits (P>0.05). This might indicate that further studies are ultimately needed to use the SNPs in ACADS gene in lager populations for effectively used for the marker assisted selection.
Kim, Sang-Wook;Lee, Jun-Heon;Kim, Jin-Ho;Won, You-Seog;Kim, Nae-Soo;Kim, Kwan-Suk
Journal of Animal Science and Technology
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v.52
no.1
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pp.9-16
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2010
A previous study has shown that the g.17924G>A polymorphism of fatty acid synthase (FASN) is associated with unsaturated fatty acid composition in the Hanwoo beef, hence this study was conducted to evaluate the effect of single nucleotide polymorphisms (SNPs) within FASN gene on the selection phenotypes of Hanwoo breeding stock. A total of 925 progeny test steers were used to genotype g.11280G>A, g.13125T>C, and g.17924G>A polymorphisms and significant associations were found among g.11280G>A, g.17924G>A, and carcass traits, such as carcass weight, backfat thickness, and beef quantity index. No significant association was found between g.13125T>C and carcass traits. Although the degree of linkage disequilibrium (LD) was not strong among g.11280G>A, g.13125T>C, and g.17924G>A in the LD analysis, four major haplotype classes were formed with the genotypic information within the FASN gene; the frequencies of the halpotypeswere -GCG-[0.378], -ATG-[0.301], -GTA-[0.191], and -ACG-[0.063], respectively. Phenotypic association was performed among these haploptypes, and the haplotype 2 (-ATG-)was significantly associated with higher carcass weight when compared to the other haplotypes, i.e. haplotype 1 (-GCG-) and haplotype 3 (-GTA-). A copy number of the FASN haplotype 3 (-GTA-) had also a significant association with carcass weight of subjects. In conclusion, it was observed that two polymorphisms (g.11280G>A and g.17924G>A) and their haplotypes within the FASN gene are consistently associated with carcass traits. Therefore, it is desirable to use the FASN polymorphisms for pre-selection program as genetic marker with improved carcass yield and beef quality of the Hanwoo sire at the Hanwoo Improvement Center as well as for commercial Hanwoo producers, the FASN genotypic information can be used for a part of selecting Hanwoo dam for superior calf production.
Attempts using in vitro and in vivo selection procedures have been made to search for hammerhead ribozymes that have higher activities than the wild-type ribozyme and also to determine whether other sequences might be possible in the catalytic core of the hammerhead ribozyme. Active sequences selected in the past conformed broadly to the consensus core sequence except at A9, and no sequences were associated with higher activity than that of the hammerhead with the consensus core, an indication that the consensus sequence derived from viruses and virusoids is probably the optimal sequence [Vaish et al. (1997) Biochemistry 36, 6495-6501]. Recently, during construction of ribozyme expression vectors, we isolated a mutant hammerhead ribozyme, with an insertion of G between A9 and G10.1, that appeared to show significant activity [Kawasaki et al. (1996) Nucleic Acids Res. 24, 3010-3016; Kawasaki et al. (1998) Nature 393, 284-289]. We, therefore, characterized kinetic properties of the G-inserted mutant ribozymes in terms of the NUX rule. We demonstrate that the NUX rule is basically applicable to the G-inserted ribozymes and, more importantly, one type of G-inserted ribozyme was very active with $k_{cat}$, value of $6.4\;min^{-1}$ in 50 mM Tris-HCl (pH 8.0) and 10 mM $MgCl_2$ at $37^{\circ}C$.
Journal of the Korea Institute of Information and Communication Engineering
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v.12
no.2
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pp.315-320
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2008
Nowadays, a lot of related data obtained from these research could be given a new present meaning to accomplish the original purpose of the whole research as a human genome project. In such a thread, construction of gene expression analysis system and a basis rank analysis system is being watched newly. Recently, being identified fact that particular sub-class of tumor be related with particular chromosome, microarray started to be used in diagnosis field by doing cancer classification and predication based on gene expression information. In this thesis, we used cDNA microarrays of 3840 genes obtained from neuronal differentiation experiment of cortical stem cells on white mouse with cancer, created system that can extract informative gene list through normalization separately and proposed combination method for selecting more significant genes. And possibility of proposed system and method is verified through experiment. That result is that PC-ED combination represent 98.74% accurate and 0.04% MSE, which show that it improve classification performance than case to experiment after generating gene list using single similarity scale.
Attributable to their major function in pathogen recognition, the use of bovine leukocyte antigens (BoLA) as disease markers in immunological traits in cattle is well established. However, limited report exists on polymorphism of the BoLA gene in zebu cattle breeds by high resolution typing methods. Thus, we used a polymerase chain reaction sequence-based typing (PCR-SBT) method to sequence exon 2 of the BoLA class II DRB3 gene from 100 animals (Boran, n = 13; Sheko, n = 20; Fogera, n = 16; Horro, n = 19), Hanwoo cattle (n = 18) and Bangladesh Red Chittagong zebu (n = 14). Out of the 59 detected alleles, 43 were already deposited under the Immuno Polymorphism Database for major histocompatibility complex (IPD-MHC) while 16 were unique to this study. Assessment of the level of genetic variability at the population and sequence levels with genetic distance in the breeds considered in this study showed that Zebu breeds had a gene diversity score greater than 0.752, nucleotide diversity score greater than 0.152, and mean number of pairwise differences higher than 14, being very comparable to those investigated for other cattle breeds. Regarding neutrality tests analyzed, we investigated that all the breeds except Hanwoo had an excess number of alleles and could be expected from a recent population expansion or genetic hitchhiking. Howbeit, the observed heterozygosity was not significantly (p < 0.05) higher than the expected heterozygosity. The Hardy Weinberg equilibrium (HWE) analysis revealed non-significant excess of heterozygote animals, indicative of plausible over-dominant selection. The pairwise FST values suggested a low genetic variation among all the breeds (FST = 0.056; p < 0.05), besides the rooting from the evolutionary or domestication history of the cattle. No detached clade was observed in the evolutionary divergence study of the BoLA-DRB3 gene, inferred from the phylogenetic tree based on the maximum likelihood model. The investigation herein indicated the clear differences in BoLA-DRB3 gene variability between African and Asian cattle breeds.
Dao, Hoai Thu;Truong, Quang Lam;Do, Van Tan;Hahn, Tae-Wook
Journal of Veterinary Science
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v.21
no.2
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pp.20.1-20.13
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2020
Actinobacillus pleuropneumoniae (APP) causes a form of porcine pleuropneumonia that leads to significant economic losses in the swine industry worldwide. The apxIBD gene is responsible for the secretion of the ApxI and ApxII toxins and the pnp gene is responsible for the adaptation of bacteria to cold temperature and a virulence factor. The apxIBD and pnp genes were deleted successfully from APP serotype 1 and 5 by transconjugation and sucrose counter-selection. The APP1ΔapxIBDΔpnp and APP5ΔapxIBDΔpnp mutants lost hemolytic activity and could not secrete ApxI and ApxII toxins outside the bacteria because both mutants lost the ApxI- and ApxII-secreting proteins by deletion of the apxIBD gene. Besides, the growth of these mutants was defective at low temperatures resulting from the deletion of pnp. The APP1ΔapxIBDΔpnp and APP5ΔapxIBDΔpnp mutants were significantly attenuated compared with wild-type ones. However, mice vaccinated intraperitoneally with APP5ΔapxIBDΔpnp did not provide any protection when challenged with a 10-times 50% lethal dose of virulent homologous (APP5) and heterologous (APP1) bacterial strains, while mice vaccinated with APP1ΔapxIBDΔpnp offered 75% protection against a homologous challenge. The ΔapxIBDΔpnp mutants were significantly attenuated and gave different protection rate against homologous virulent wild-type APP challenging.
Omelka, R.;Martiniakova, M.;Peskovicova, D.;Bauerova, M.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.21
no.4
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pp.484-488
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2008
We investigated the effect of the prolactin receptor gene (PRLR) on total number of born (TNB), number of born alive (NBA) and number of weaned (NW) piglets in Large White (LW), White Meaty (WM) and Landrace (L) sows from six Slovak breeding farms. The frequency of A allele was 0.48, 0.49 and 0.47 in LW, WM and L, respectively. We found numerous highly significant effects of PRLR locus on TNB ($p{\leq}0.01$; $p{\leq}0.05$) in all tested breeds. The most marked difference of +$1.31{\pm}0.45pigs/L$ was found between AA and BB genotypes in WM. Within the other breeds the difference between the homozygous genotypes reached up to +$0.94{\pm}0.3$ and +$1.21{\pm}0.19$ pigs per litter in LW and L, respectively. We also identified significant differences between AA and AB genotypes related to TNB in L. Similarly NBA, as well as NW traits were significantly affected ($p{\leq}0.01$; $p{\leq}0.05$) by the genotype just in LW and L. The homozygous genotype AA was favourable in all breeds and traits. Our results showed the possibility of PRLR utilization in marker-assisted selection within breeding programs to increase reproductive traits of pigs in Slovakia.
The purpose of this study was to investigate interaction effects of genes using a Harvester method. A sample of Korean cattle, Hanwoo (n = 476) was chosen from the National Livestock Research Institute of Korea that were sired by 50 Korean proven bulls. The steers were born between the spring of 1998 and the autumn of 2002 and reared under a progeny-testing program at the Daekwanryeong and Namwon branches of NLRI. The steers were slaughtered at approximately 24 months of age and carcass quality traits were measured. A SNP Harvester method was applied with a support vector machine (SVM) to detect significant SNPs in the CCDC158 gene and interaction effects between the SNPs that were associated with average daily gains, cold carcass weight, longissimus dorsi muscle area, and marbling scores. The statistical significance of the major SNP combinations was evaluated with $x^2$-statistics. The genotype combinations of three SNPs, g.34425+102 A>T(AA), g.4102636T>G(GT), and g.11614-19G>T(GG) had a greater effect than the rest of SNP combinations, e.g. 0.82 vs. 0.75 kg, 343 vs. 314 kg, 80.4 vs $74.7cm^2$, and 7.35 vs. 5.01, for the four respective traits (p<0.001). Also, the estimates were greater compared with single SNPs analyzed (the greatest estimates were 0.76 kg, 320 kg, $75.5cm^2$, and 5.31, respectively). This result suggests that the SNP Harvester method is a good option when multiple SNPs and interaction effects are tested. The significant SNPs could be applied to improve meat quality of Hanwoo via marker-assisted selection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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