The effect of plant growth regulators and gelling agents for plant regeneration from leaf segment of Chrysanthemum zawadskii ssp. coreanum was investigated. NAA was more effective than BA for plant regeneration. MS medium supplemented with NAA 1 mg/L was the most effective in plant regeneration. The effect of agar and gelite as gelling agent was compared. Agar(0.8%) was more effective than gelite(0.2%) in plant regeneration. Regenerated shoots was successfully increased by shoot grafting in MS medium supplemented with NAA 0.1 mg/L in vitro, and hardened by shoot grafting in artificial soil mix(Peatmoss : Perlite = 1 : 1).
This study was carried out to establish the micropropagation system of Bupleurum latissimum Nakai that is a Korean native endangered species. Callus were induced from the leaf, petiole and floral bud and the percentage of callus formation was highest in the floral bud on the MS medium containing 2.0 mg ${\cdot}$$L^{-1}$ 2,4-D. Especially, callus induced from floral bud was formed 77.8% and the percentage of shoot formation was 42.6% on the MS medium containing 2.0 mg ${\cdot}$$L^{-1}$ 2,4-D plus 1.0 mg ${\cdot}$$L^{-1}$ TDZ. For simultaneously callus formation and shoot regeneration, 1/2 MS medium was more effective than MS medium. The percentage callus formation, shoot regeneration and rooting were 46.3%, 13.0%, 13.0% in 1/2 MS medium, respectively. Soot regeneration from callus was good in 1/2 MS medium supplemented with 2.0 mg ${\cdot}$$L^{-1}$ 2,4-D plus 1.0 mg ${\cdot}$$L^{-1}$ BA where percentage of shoot regeneration was 74.1 %, and the number of shoot per explant was 2.4. The percentage of rooting was lowest (57.8%) in control while it was highest (97.8%) in 1.5 mg ${\cdot}$$L^{-1}$ NAA. In acclimatization of regenerated plantlets, the percentage of survived plantlets was highest (86.1%), and plant height, root length and fresh weight were good in the soil for horticulture.
Protoplasts were isolated from the leaf mesophyll tissue of in vitro 4-weeks-old Arabidopsis thaliana and cultured in MS liquid medium supplemented with 2.0 mg/L NAA, 0.5 mg/L BAP and 9% mannitol in the dark at $25^{\circ}C$. When protoplast-derived microcolonies were dehydrated, the frequency of callus induction enhanced approximately 7-fold higher compared with non-dehydrated microcolonies in CP medium. Fifty callus lines were selected from dehydrated microcolonies. Shoots were efficiently initiated from the green spots of the selected shoot forming calli cultured on MS regeneration medium supplemented with 0.05 mg/L IAA, 7.0 mg/L 2-iP and 30 g/L sucrose under continous illumination for 4 weeks. Shoot regeneration frequencies (calli regenerating at least one shoot) were 3.5%~56%. Histological observations of shoot forming callus revealed that tracheary elements initiated from inner compact cells, and that meristemoids developed to shoot primordia and shoots. Roots were induced from these regenerating shoots on MS medium without phytohormones. These regenerants were successfully transplanted into potting soil. Morphological characterization of 50 protoplast-derived plants showed that the frequency of normal type was 78%.
This study was conducted to examine the effects of explant sources and plant growth regulators on mass propagation of Cyclamen persicum. Tuber, cotyledon, and petiole tissues were cultured on MS medium supplemented with different concentrations and combinations of auxins and cytokinins. Shoots were not induced from calli on cotyledon and petiole explants cultured on MS medium containing various concentrations of 2,4-D or NAA. However, multiple shoots were formed directly from tuber explants cultured on the medium containing 0.5 and 1.0 mg/L 2,4-D or NAA. In MS medium with cytokinin alone, TDZ was more effective in shoot formation than BA or kinetin in all explants. The combinations of NAA and BA was found to be most effective in shoot formation from tuber, cotyledon and petiole explants. Especially, shoots were formed from all the tuber explants on the medium containing 0.5 mg/L of NAA and BA. Hormonal effects on root formation were examined by subculturing single shoots on MS medium containing NAA or IBA. The medium with 0.5 mg/L IBA was most effective in root induction and subsequent plantlet regeneration.
This study was conducted to examine the effect of plant growth regulators on the formation of adventitious bud callus(ABC) and plant regeneration in shoot tip culture of Zantedeschia spp. 'Florex Gold'. Treatment of $0.1mgL^{-1}\;N$-phenyl-N'-1,2,3-thiadiazol-5-ylurea(thidiazuron, TDZ) was more promotive for formation of ABC in shoot tip culture than 6-benzylaminopurine(BA) treatment, and short shoots were developed. Comparing to treatment of BA, mixing treatment of BA and 1-naphthaleneacetic acid(NAA) inhibited the formation of ABC and multiple shoot. The proliferation of ABC derived from sections(0.3 cm) of ABC produced by shoot tip culture in medium supplemented with $0.1mgL^{-1}\;TDZ$ was more effective in medium with $0.1mgL^{-1}\;TDZ$ or $2.0mgL^{-1}\;BA$ than the other treatments. The shoot regeneration and growth from sections of ABC was more promotive in treatment of $0.001mgL^{-1}\;TDZ$. Also, the root growth from sections of ABC was better in medium with $0.001mgL^{-1}\;TDZ$ or $0.2mgL^{-1}\;BA$. Consequently, in vitro mass production of Zantedeschia spp. 'Florex Gold' can be obtained via indirect organogenesis through plant regeneration and proliferation of ABC which was derived from shoot tip culture at $0.1mgL^{-1}\;TDZ$.
In this study, a plant tissue culture system was established for Atractylodes spp., an economically valuable medicinal crop in Korea that has low domestic production and is increasingly imported. In particular, Atractylodes ovata was treated with four types of cytokinins, 6-benzylaminopurine (BA), zeatin, kinetin, and thidiazuron (TDZ), in two different concentrations (0.5 and 1.0 mg/L). Among the four types of cytokinins, the BA treatment was effective for the shoot and root growth of A. ovata. Both the 0.5 mg/L and 1.0 mg/L concentrations of BA showed similar results; however, the 1.0 mg/L concentration of BA was more effective in promoting shoot and root growth. The treatments showed that the TDZ treatment was not effective for the shoot and root growth, except for the number of shoots and the fresh weight (FW) of the root; therefore, it was unsuitable for this species. In this study, we established a mass production system of A. ovata. Our results showed that direct in vitro regeneration may make a significant contribution to improving the cultivation of the medicinal plant A. ovata.
An efficient procedure was developed for adventitious shoot bud induction and plantlet regeneration from various explants of the ten genotypes of Pepper (Capsicum annuum L.) using Thidiazuron (TDZ). Among various treatments at 1.0-3.0 mg/L TDZ Induced maximum number of adventitious shoots depending upon the explant type and genotype compared to other treatments. Among the explants tested, leaf induced maximum number of adventitious shoots than the cotyledons. TDZ-mediated organo-genesis was possible in 10 pepper cultivars, the extent of the response being genotype-dependent. Of the ten genotypes tested, C. annuum cvs CA960, $G_4$ and X-235 were produced maximum number of adventitious shoots and Sell was the least, and all other genotypes gave moderate response. Elongation of multiple shoots was observed on medium supplemented with SA (0.05 mg/L) in combination of IAA (0.05 mg/L). Differences in ability for in vitro shoot regeneration and elongation depend upon the variety and explant type. The elongated shoots were success. Fully rooted on MS medium containing at 1.0 mG/L IAA. Plantlets regenerated from different explants of ten genotypes were found to be diploid (2n=24) and were devoid of any chromosomal aberrations. Regenerated plants were successfully established in soil where 85-90% of them developed into morphologically normal and fertile plants.
A reliable and effective tissue culture system was established for Perilla frutescens (perilla) using different cultivar, explant source, and growth regulator composition in medium. MS medium supplemented with 2.0 mg/L BA and 0.1 mg/L NAA was maximum at shoot induction. Cotyledon explants formed more shoots than hypocotyl explants. The frequency of plant regeneration through organogenesis was higher (22.8%) than that (6.1%) of somatic embryogenesis. Five genotypes of perilla were screened for the feasibility of shoot regeneration, cotyledon explant of 'Manbaek' showed the highest shoot induction at a frequency of 27.3% among the tested cultivars.
In this study, we established a novel somatic embryogenesis and plant regeneration system through cell suspension culture of white dandelion (Taraxacum coreanum NAKAI.). Embryogenic calli could be initiated from leaf and root explants of sterile seedlings on solid Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 1.0 mg/L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) after 3-week cultures. To proliferate embryogenic calli rapidly, cell suspension culture was performed with transferred to liquid MS medium with various combinations of plant growth regulators (PGRs) including 2,4-D, ${\alpha}$-naphthalene acetic acid (NAA), indole-3-acetic acid (IAA), $N^6$-benzylamino purine (BAP), thidiazuron (TDZ), and kinetin. During suspension cultures, embryogenic calli not only greatly proliferated, but shoot organogenesis also simultaneously occurred from the surface of somatic embryos. Among them, TDZ at lower concentration, 0.1 mg/L produced the highest efficiency of somatic embryo formation and shoot organogenesis. Rooting of embryogenic calli with adventitious shoots was done on solid MS medium containing 0.1 mg/L NAA and 0.3% activated carbon. Nearly 80% of embryogenic calli with shoot organogenesis could be rooted normal. Well-rooted plantlets were transferred into pots under a greenhouse condition, and plants derived from this system appeared phenotypically normal.
The effect of thidiazuron on callus growth and shoot regeneration of Solanumspecies was very positive. Increasing concentrations of thidiazuron stimulated callus growth of Solanum ptycanthum and Solanum nigrum. Shoot regeneration of S. ptycanthum and S. nigrum was greater on medium with thidiazuron than that with IAA and BA. Thidiazuron at $0.5{\mu}M$ or above increased the number of shoots regenerated from S. ptycanthum calli compared to the IAA with BA. High concentrations of thidiazuron $( >I{\mu}M)$ increased the number of shoots than BA or low levels of thidiazuron and IAA or BA The addition of IAA to thidiazuron media reduced S. ptycanthum shoot formation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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