Background: Endodontic sealers or their toxic components may become inflamed and lead to delayed wound healing when in direct contact with periapical tissues over an extended period. Moreover, an overfilled sealer can directly interact with adjacent tissues and may cause immediate necrosis or further resorption. Therefore, the treatment outcome conceivably depends on the endodontic sealer's biocompatibility and osteogenic potential. This study aimed to evaluate the cell viability and osteogenic effects of four different sealers in osteoblastic cells. Methods: AH Plus (resin-based sealer), Pulp Canal Sealer EWT (zinc oxide-eugenol sealer), BioRoot RCS (calcium silicate-based sealer), and Well-Root ST (MTA-based calcium silicate sealer) were mixed strictly according to the manufacturer's instructions, and dilutions of sealer extracts (1/2, 1/5 and 1/10) were determined. Cell viability was measured using the water-soluble tetrazolium-8 (WST-8) assay. Differentiation was assessed by alkaline phosphatase (ALP) activity and mineralized nodule formation by Alizarin Red S staining. Results: The cell viability of the extracts derived from the sealers excluding Well-Root ST was concentration dependent, with sealer extracts having the least viability at a 1/2 dilution. At sealer extract dilution of 1/10, the test groups showed the same survival rate as that control group, with the exception of BioRoot RCS. Among all experimental groups, BioRoot RCS showed the highest cell viability after 48 hours. The ALP activity was significantly higher in a concentration-dependent manner. Furthemore, all four materials promoted ALP activity and mineralized nodule formation compared to the control at 1/10 dilutions. Conclusion: This is the first study to highlight the differences in biological activity of these four materials. These results suggest that the composition of root canal sealers appears to alter the form of biocompatibility and osteoblastic differentiation.
Microorganisms and their by-products are considered to be the major causes of pulpal and periapical pathosis. The role of microorganisms in endodotic infection has been studied regarding the prevalence of particular organisms found in root canal and periapical lesions. The aim of this study was to investigate the effect of culture supernatants of several oral microorganims isolated from infected root canals on the viability of cultured cell lines using colorimetirc assay. S. simulans, S. sciuri, E. faecium, S. intermedius, S. mitis, S. sanguis and S. uberis were incubated in Todd-Hewitt broth for 16 hours. 20 and 100ul of filtered bacterial cell culture supernatants were added to MK and Hep-2 cells. Cell viability was measured using MIT colorimetric assay. 20ul and 100u1 of S. sanguis supernatant showed significant cytotoxicity compared to control on MK cells. 100ul of S. sanguis supernatant significantly depressed viability of HEp-2 cells. E. faecium and S. intermedius did not affect the viability of MK and HEp-2 cells.
Objectives: The purpose of this study was to evaluate in vitro cytotoxicity of the pozzolan cement and other root-end filling materials using human periodontal ligament cell. Materials and Methods: Endocem (Maruchi), white ProRoot MTA (Dentsply), white Angelus MTA (Angelus), and Super EBA (Bosworth Co.) were tested after set completely in an incubator at $37^{\circ}C$ for 7 days, Endocem was tested in two ways: 1) immediately after mixing (fresh specimens) and 2) after setting completely like other experimental materials. The methods for assessment included light microscopic examination, cell counting and WST-1 assay on human periodontal ligament cell. Results: In the results of microscopic examination and cell counting, Super EBA showed significantly lower viable cell than any other groups (p < 0.05). As the results of WST-1 assay, compared with untreated control group, there was no significant cell viability of the Endocem group. However, the fresh mixed Endocem group had significantly less cell viability. The cells exposed to ProRoot MTA and Angelus MTA showed the highest viability, whereas the cells exposed to Super EBA displayed the lowest viability (p < 0.05). Conclusions: The cytotoxicity of the pozzolan cement (Endocem) was comparable with ProRoot MTA and Angelus MTA. Considering the difficult manipulation and long setting time of ProRoot MTA and Angelus MTA, Endocem can be used as the alternative of retrofilling material.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.42
no.4
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pp.291-301
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2015
This study compared the in vitro cell viability and differentiation potentials of human deciduous dental pulp cells (DPCs) on mineral trioxide aggregate (MTA)-like products (ProRoot MTA, RetroMTA and Endocem Zr). The experimental materials were prepared as circular discs, which were used to test the effects of the materials on the viability of human DPCs when placed in direct and indirect contact. Furthermore, the pH of the extracted materials was recorded, and their effect on cell differentiation potential was evaluated by evaluating the alkaline phosphatase (ALP) activity and Alizarin Red S staining of DPCs incubated with the test materials. In direct contact, the cell viability of human DPCs was higher with ProRoot MTA and RetroMTA than with Endocem Zr. However, when in indirect contact, the cell viability of human DPCs was generally higher in Endocem Zr than in ProRoot MTA and Retro MTA. With respect to pH, the alkalinity was lower for Endocem Zr than for the other test materials. The ALP activities of the cells were not enhanced by any of the experimental materials. Alizarin Red S staining of the tested human DPCs revealed that their differentiation potential was lower than for cells incubated with osteogenic induction medium. While there were differences in the responses of the human DPCs to the test materials, all displayed degrees of cytotoxicity and were unable to enhance either the viability or differentiation of human DPCs. However, Endocem Zr exhibited better cell viability and was less alkaline than the other test materials.
Khedmat, Sedigheh;Dehghan, Somayyeh;Hadjati, Jamshid;Masoumi, Farimah;Nekoofar, Mohammad Hossein;Dummer, Paul Michael Howell
Restorative Dentistry and Endodontics
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v.39
no.3
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pp.149-154
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2014
Objectives: This study was performed to evaluate the cytotoxicity of four calcium silicate-based endodontic cements at different storage times after mixing. Materials and Methods: Capillary tubes were filled with Biodentine (Septodont), Calcium Enriched Mixture (CEM cement, BioniqueDent), Tech Biosealer Endo (Tech Biosealer) and ProRoot MTA (Dentsply Tulsa Dental). Empty tubes and tubes containing Dycal were used as negative and positive control groups respectively. Filled capillary tubes were kept in 0.2 mL microtubes and incubated at $37^{\circ}C$. Each material was divided into 3 groups for testing at intervals of 24 hr, 7 day and 28 day after mixing. Human monocytes were isolated from peripheral blood mononuclear cells and cocultered with 24 hr, 7 day and 28 day samples of different materials for 24 and 48 hr. Cell viability was evaluated using an MTT assay. Results: In all groups, the viability of monocytes significantly improved with increasing storage time regardless of the incubation time (p < 0.001). After 24 hr of incubation, there was no significant difference between the materials regarding monocyte viability. However, at 48 hr of incubation, ProRoot MTA and Biodentine were less cytotoxic than CEM cement and Biosealer (p < 0.01). Conclusions: Biodentine and ProRoot MTA had similar biocompatibility. Mixing ProRoot MTA with PBS in place of distilled water had no effect on its biocompatibility. Biosealer and CEM cement after 48 hr of incubation were significantly more cytotoxic to on monocyte cells compared to ProRoot MTA and Biodentine.
Rapid loss in viability of neem (Azadirachta indica A. Juss.) seed is a major problem. Present effort was undertaken for developing a set pattern for assessing of viability and vigour in seed of various mother tree age of neem (Age I-06 years, Age II-15 years, Age III-25 years and Age IV->30 years old). Various viability test viz. triphenyle tetrazolium chloride test, electrical conductivity, excised embryo test, and germination test have been performed on seeds obtained from mother tree age classes. Inconsistency was observed with the TTC and EC test in germination of seed in laboratory as well as nursery. While various vigour tests viz. cold test, chemical stress test (methanol stress test), and accelerated ageing test alongwith ageing index, germination test (G%, MGT and GV) and various seedling growth parameters like seedling length (cm), number of leaves, collar diameter (cm), total biomass (g) alongwith mathematical indices i.e. vigour index, sturdiness quotient, volume index, quality index, root shoot ratio in nursery as well have been taken for study and showed better consistency. On the basis present study results of various viability and vigour test indicated that mother tree age class II performed better in comparison to others and it can be recommended for seed collection. Further it is also recommended that viability of neem seed may be assessed using various laboratory tests like excise embryo test and germination test (G%, MGT and GV) and vigour test may be taken preferably by cold germination test, chemical (methanol) stress test, accelerated ageing test in laboratory and germination alongwith various seedling growth parameters seedling length (cm), number of leaves, collar diameter (cm), total biomass (g) alongwith mathematical indices like Vigour Index, Sturdiness quotient, Volume Index, Quality index, root shoot ratio in nursery as discussed in this study.
Rhizobium japonicum was isolated from the nodule of soybean root grown at the reclaimed tidal land in Kang-Wha island. The effect of pH and salt concentration to the viability of the isolated strain were examined in relationship between microbial growth and accumulation of PHB. Optimal pH value for the good viability of the isolated strain was 7.0 and also, at 5.0 and 6.0 viability was favorable to large extent, but 9.0 was unfavorable. Examined the effect of salt concentration treated two times as of the salinity in the reclaimed tidal land, viability of the isolated strain showed about 30 to 40%. And also in treatment with NaCl(40g/l) whatever the pH value adopted, viability was mostly less than 10%. The amount of accumulated PHB was relatively high at low pH value(5-6) and at high salt concentrration, respectively.
Objectives: The aim of this in vitro study was to evaluate the biocompatibility of newly proposed root-end filling materials, Biodentine, Micro-Mega mineral trioxide aggregate (MM-MTA), polymethylmethacrylate (PMMA) bone cement, and Smart Dentin Replacement (SDR), in comparison with contemporary root-end filling materials, intermediate restorative material (IRM), Dyract compomer, ProRoot MTA (PMTA), and Vitrebond, using human periodontal ligament (hPDL) fibroblasts. Materials and Methods: Ten discs from each material were fabricated in sterile Teflon molds and 24-hour eluates were obtained from each root-end filling material in cell culture media after 1- or 3-day setting. hPDL fibroblasts were plated at a density of $5{\times}10^3/well$, and were incubated for 24 hours with 1:1, 1:2, 1:4, and 1:8 dilutions of eluates. Cell viability was evaluated by XTT assay. Data was statistically analysed. Apoptotic/necrotic activity of PDL cells exposed to material eluates was established by flow cytometry. Results: The Vitrebond and IRM were significantly more cytotoxic than the other root-end filling materials (p < 0.05). Those cells exposed to the Biodentine and Dyract compomer eluates showed the highest survival rates (p < 0.05), while the PMTA, MM-MTA, SDR, and PMMA groups exhibited similar cell viabilities. Three-day samples were more cytotoxic than 1-day samples (p < 0.05). Eluates from the cements at 1:1 dilution were significantly more cytotoxic (p < 0.05). Vitrebond induced cell necrosis as indicated by flow cytometry. Conclusions: This in vitro study demonstrated that Biodentine and Compomer were more biocompatible than the other root-end filling materials. Vitrebond eluate caused necrotic cell death.
Background: Sodium salicylate (SS) is a nonsteroidal anti-inflammatory drug (NSAID) for the treatment of neuralgia or pain from rheumatoid arthritis. When abused or used in excess, SS can induce cytotoxicity. The present study examined whether SS has a neurotoxic effect. Methods: Cell viability was examined by MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2,5-dipheny ltetrazolium bromide] assay and Sulforhodamine (SRB) assay after cultivating dorsal root ganglion (DRG) neurons derived from neonatal mouse. These cells were treated with various concentrations of SS for 24 hours. In addition, the amount of protein synthesis against SS was measured in these cultures. Results: Cell viability (20, $40{\mu}g/ml$ SS) significantly decreased in a dose-dependent manner. Additionally, SS inhibited protein synthesis after the exposure of cultured mouse DRG neurons to $30{\mu}g/ml$ of SS for 24 hours. Conclusions: The present study suggests that SS is toxic in cultured DRG neurons derived from neonatal mouse by decreasing cell viability and the amount of protein synthesis.
Calcium hydroxide has been used not only as pulp capping and pulpotomy agents in the operative dentistry, but dressing and temporary filling materials in root canal treatment. Calcium hydroxide was known to stimulate odontoblast to produce new reparative dentin and to eliminate microorganims effectively in the infected root canals. The purpose of this study was to evaluate the effect of calcium hydroxide solution on cultured L929 cells and its antibacterial effect on several streptococci. Calcium hydroxide solution (0.121g/100ml) was added to L929 cells and cell viability was measured using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-dimethyltetrazolium bromide (MTT) and neutral red (NR) dye. Calcium hydroxide solution (20, 40, 60, 80, 100 and $150{\mu}l$) was added to L929 cells in 96-well microplates for 1, 4 and 24 hours respectively. Cell viability was gradually decreased when the volume and exposure time of calcium hydroxide solution were increased. When $150{\mu}l$ of calcium hydroxide was applied to L929 cells for 24 hours, there was more than fifty percent reduction of cell viability. Calcium hydroxide solution (20g/100ml) showed antibacterial effect against S. uberis, S. intermedius and S. mitis after thirty-second exposure. But 0.121g/100ml concentration of cacium hydroxide solution exhibited no antibacterial effect on six streptococci after one-hour exposure.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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